气管平滑肌上钙激活的大电导钾离子通道中不同亚基功能

摘要

本文对气管平滑肌上钙激活的大电导钾离子通道中不同亚基功能进行了研究。离子通道一般拥有选择性通透离子和在适当刺激的情况下能够开放这两种特性。离子通道无论在动物还是植物的细胞中都发挥着至关重要的作用，不仅负责调控膜电位，还控制着细胞增殖和激素释放，钾离子通道就是其中之一。大电导钙激活的钾离子通道，简称BK通道，是钾离子通道中较复杂的一类离子通道，它调控着各种各样的生理活动。BK通道广泛存在于生物体内的大部分细胞中，如平滑肌细胞、心肌细胞、脑垂体细胞、神经细胞，甚至存在线粒体中。因为BK通道具有钙激活，大电导，多方位调控等特性，而且对生命体尤为重要，所以一直在被广泛研究。BK通道尽管是由单基因slowpoke编码而成，但是却丝毫没有影响到其多样性。由于β亚基拥有监控通道开放，调控代谢等多种功能，使得 BK通道在多种组织中保持多样性。BK通道一般是通过细胞内钙浓度升高或是膜电位去极化激活。这意味着BK通道可以调节肌肉收缩，因此，BK通道在肌细胞中的研究具有广阔的前景。众所周知，BK通道是由α和β两种亚基组成。β亚基（β1-β4）在BK通道中扮演着重要的角色，四种β亚基的作用各不相同，β1亚基可以使通道迅速活化，由于它的电压感受器结构，还能增强BK通道的钙敏感性；β2亚基是调控通道的开关；β3亚基可以迅速关闭通道[3]；β4亚基则可以钝化通道的调控特性。因此不同的亚基之间功能相辅相成，使得BK通道更具复杂性和多样性[4]。我们希望弄清BK通道不同亚基的功能。结果显示，气管平滑肌细胞表达BK-α，β1，β4亚基mRNA；BK-α亚基失活之后，BK单通道电流消失，说明BK-α亚基是BK通道组成的核心部分；BK-β1亚基失活后BK单通道电流得到部分抑制；而在BK-β4亚基失活后， BK单通道电流无明显变化。

目录

声明

第1章 绪 论

1.1 BK通道

1.2 BK通道α亚基及其抗体

1.3 BK通道β1亚基及其抗体

1.4 BK通道β4亚基及其抗体

1.5 本文构想

第2章 实验材料、仪器和试剂

2.1实验材料

2.2实验仪器和耗材

2.3实验试剂

2.4溶液配制

第3章 实验方法

3.1 荧光定量PCR

3.2 膜片钳技术

3.3 数据分析

第4章 实验结果

4.1 小鼠气管平滑肌上BK-α，β1和β4亚基的表达差异

4.2 BK-α亚基抗体阻断小鼠气管平滑肌细胞BK单通道电流

4.3 BK-β1亚基抗体对气管平滑肌细胞BK单通道电流的影响

4.4 BK-β4亚基抗体对气管平滑肌细胞BK单通道电流的影响

第5章 讨论

参考文献

致谢

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