基于痘苗病毒天坛株的SARS疫苗构建及与改良安卡拉株疫苗的比较

摘要

用灭活的病毒颗粒作为疫苗免疫动物后能够非常有效抵挡相应的致病性冠状病毒的攻毒。但是，这种方法对于严重急性呼吸综合征的致病病毒——SARS冠状病毒而言，在使用上有很大的局限性。因为在使用灭活的SARS病毒颗粒做疫苗时，很可能会存在活的SARS病毒，一旦它们泄漏，将会会带来非常严重的后果。目前，有一种SARS疫苗是基于减毒痘苗病毒载体MVA构建的，这种命名为SARS-MVA的重组痘苗病毒疫苗，是通过将全长的SARS S蛋白基因导入MVA基因组的第三缺失区构建而成的。SARS-MVA在哺乳动物细胞中是复制缺陷型的，并且能在小鼠，兔和猴子体内诱导高水平的中和抗体。在用SARS-MVA两次免疫上述动物后，收集的血清在稀释1000到10000倍后，仍能抑制50％的病毒。 然而，考虑到1981年以前，痘苗病毒天坛株作为天花疫苗在中国被广泛应用并为消灭天花发挥了重要作用。因此，在本实验中我们通过将全长的SARS S蛋白基因导入痘苗病毒天坛株基因组的第三缺失区，构建了另外一种重组痘苗病毒SARS-MVTT。实验中我们发现，以105和106PFU剂量通过肌肉途径免疫小鼠后，SARS-MVTT和SARS-MVA都没有造成小鼠体重的下降，并且都能在小鼠体内诱导高水平的抗S蛋白中和抗体，两种病毒诱导的中和抗体水平都还存在着剂量依赖效应。此外，以105和106PFU剂量分别通过口腔和鼻腔途径免疫小鼠后，我们发现SARS-MVTT免疫后的血清在稀释1000到10000倍后仍能抑制50％的病毒，而SARS-MVA则无法达到50％的病毒抑制。这揭示出SARS-MVTT在粘膜免疫途径方面是一种远比SARS-MVA有优势的疫苗。

目录

声明

摘要

引言

第一章 文献综述

1．冠状病毒的历史

2．传染性非典型肺炎及SARS-CoV

二、痘苗病毒作为疫苗载体的研究进展

1．痘苗病毒的生物学

2．痘苗病毒的形态发生学

3．基因工程痘苗病毒活载体疫苗的构建及应用

4． 痘苗病毒安卡拉株(Modified Vaccinia virus Ankara，MVA)和痘苗病毒天坛株(Vaccinia Virus Tiantan，VTT)

第二章 实验研究

1、实验材料和方法

2、实验结果

3、讨论

二、重组痘苗病毒SARS-MVTT和SARS-MVA在小鼠体内毒力和免疫原性的比较

1、实验材料和方法

2．实验结果

3． 讨论

三、基于重组痘苗病毒SARS-MVTT的对不同途径预先免疫野生痘苗天坛株后免疫效果的比较

1、实验材料和方法

2．实验结果

3、讨论

参考文献

博士期间发表的论文

致谢