中国大鲵细菌性败血症（Bacterial septicermia）（暂定名）的病原特性及组织病理变化研究

摘要

近年来，湖南省一些大鲵养殖场中人工养殖的大鲵不断发生大规模的疾病，给大鲵养殖业造成了巨大的经济损失。为了尽快查清引起大鲵发病的原因，进而寻找防治疾病的方法，笔者经过近3年的时间首次对湖南省润孚公司、张家界大鲵保护中心等地的大鲵的疾病进行了流行病学调查。对患病大鲵经解剖取样、送武中科院汉病毒所检测，排除了此病是由病毒引起的可能性；经显微镜观察，排除由寄生虫引起死亡的可能性。经调查研究发现：患病大鲵的体表、肌肉、肝脏、胰脏、肾脏、肠道、胃、肺等器官组织出现不同程度的充血、出血，腹部膨大，有大量腹水，并发生溶血，故将此病暂定名为大鲵细菌性败血症(Bacterialsepticermia)。本文主要对这种细菌性败血症进行了病原特性与病理变化的初步研究。 于2004年～2006年12月间先后对湖南润孚生物工程公司人工养殖10尾典型症状的患病大鲵的6个不同组织器官进行了病原检测，共分离纯化出600余株细菌。通过人工感染大鲵、革兰氏染色、生化鉴定比较、敏感药物测定等试验，最后选定具有代表性的9株为供试菌株。选取其中一株进行大鲵回归实验与16SrDNA 扩增与测序，结果确认引起该病的病原菌为嗜水气单胞菌。药敏试验结果表明，9株菌株均对9株菌株对环丙沙星、头孢曲松、头孢他啶、头孢孟多、头孢哌酮、庆大霉素、头孢西丁药物相对比较敏感，而对克林霉素、头孢唑林、甲硝唑、SMZ 具有耐药性。 对病鲵血液进行40余项血液病理学指标检测分析，其结果表明：只有9项测定值处于健康水平参考值范围内，其余30项测定值均远远低于健康水平参考值。取病鲵的肝脏、胰脏、肠道、胃、肺、肾等器官组织用福尔马林液固定，石蜡切片，H.E.染色，在光学显微镜下进行观察。结果表明：肝脏的肝小叶结构不清，毛细血管和小叶间胆管被破坏，巨噬细胞增多，肝细胞肿胀、变性、坏死，散乱分布，看不到明显的中央静脉，没有明显的肝细胞索，肝组织中的毛细胆管和小叶胆管破裂，胆管中的物质渗入到肝组织中；胰脏腺细胞变性，有的细胞坏死、解体，腺泡细胞间充斥大量脂肪细胞；胃内壁固有层被破坏，胃上皮细胞解体；小肠绒毛膜柱状上皮细胞纹状缘消失，肠系膜、卵系膜充气积水；肺组织无完整支气管，含大量淋巴细胞；肾小管多数处于变性、坏死；肾小管内发生淤血，有红细胞浸润，肾小体坏死、解体。

目录

文摘

英文文摘

声明

1前言

1.1国内外大鲵的自然资源及养殖状况

1.1.1国内外大鲵的自然资源及地理分布

1.1.2中国大鲵(Andrias davidianus)的自然资源及地理分布

1.1.3中国大鲵(Andrias davidianus)的养殖状况

1.1.4中国大鲵(Andrias davidianus)的普通生物学

1.2中国大鲵(Andrias davidianus)养殖中存在的主要问题

1.2.1繁殖问题

1.2.2病害问题

1.3中国大鲵(Andrias davidianus)疾病的研究概况

1.3.1细菌性疾病

1.3.2寄生虫疾病

1.3.3其它

1.4开展本项目研究的背景、目的及意义

1.4.1开展本项目研究的背景

1.4.2研究的目的

1.4.3研究的意义

2材料与方法

2.1试验材料

2.1.1材料来源

2.1.2主要仪器设备

2.1.3培养基及主要试剂

2.1.4药物与药敏纸片

2.2试验方法

2.2.1大鲵流行病学调查

2.2.2病鲵样品的采集

2.2.3样品中病原菌的分离与纯化

2.2.4人工感染中国大鲵试验

2.2.5病原菌的鉴定

2.2.6大鲵的组织病理学观察

2.2.7大鲵血液病理学检测

2.2.8药物敏感性试验

2.2.9敏感药物的应用试验

3结果与分析

3.1大鲵细菌性败血症流行病学调查结果

3.1.1大鲵人工养殖场发病的原因

3.1.2人工养殖场大鲵发病的症状

3.2病鲵样品中细菌的分离纯化

3.2.1分离菌的培养特性

3.2.2分离菌的形态特征及染色

3.3人工感染大鲵试验

3.4生化鉴定试验

3.5分子鉴定试验结果

3.6大鲵(Andrias davidianus)的组织病理学观察

3.7大鲵(Andrias davidianus)血液病理学检测结果

3.8室内药物敏感性试验

3.9敏感药物对人工感染鲫鱼的治疗应用试验结果

4.讨论与结论

4.1细菌性败血症(暂定名)的确认

4.2细菌性败血症(暂定名)的病源细菌特性

4.3病源细菌的感染特性与疾病控制

4.4结论

5展望

5.1本研究对大鲵养殖生产的作用和意义

5.2本研究仍待解决的问题及今后的研究方向

参考文献

致 谢

作者简介

在读硕士期间论文发表情况