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芙蓉鲫(芙蓉鲤♀×红鲫♂)及其原始亲本遗传变异的比较分析

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1 前言

1.1国内外鱼类杂交育种研究的现状

1.1.1国外水产养殖业鱼类杂交研究进展

1.1.2我国鱼类杂交育种的现状与成就

1.2芙蓉鲫的由来及研究进展

1.2.1芙蓉鲤人工雌核发育试验情况

1.2.2雌核芙蓉鲤的变异与选择

1.2.3芙蓉鲫形态特征

1.2.4芙蓉鲫的染色体倍性

1.2.5芙蓉鲤性腺组织学与败育性

1.2.6芙蓉鲫的肉质与生长

1.2.7芙蓉鲫的应用与推广

1.3 RAPD技术及其在水产养殖上的应用

1.3.1 RAPD技术的基本原理及特点

1.3.2 RAPD技术在水产动物上的研究应用

2材料与方法

2.1试验材料用具

2.1.1供试鱼类

2.1.2主要仪器和实验试剂

2.1.3主要试剂的配制

2.2试验方法

2.2.1试验样本的采集

2.2.2基因组DNA的抽提

2.2.3基因组DNA的检测

2.2.4 PCR扩增

2.2.5琼脂糖凝胶电泳

2.2.6数据统计与分析

3结果与分析

3.1芙蓉鲫与其原始亲本的形态学比较与聚类分析

3.1.1试验鱼取样情况

3.1.2试验鱼的可数性状均值、可量性状相对值均值与标准偏差

3.1.3卡方检验

3.1.4聚类分析

3.1.5对可量性状的判别分析

3.2芙蓉鲫、芙蓉鲤与其原始亲本的RAPD分析

3.2.1 DNA的检测结果

3.2.2 RAPD-PCR反应体系与条件优化实验结果

3.2.3 RAPD扩增结果

3.2.4各样本间的遗传相似性指数及遗传距离

3.2.5 UPGMA分析结果

4讨论与结论

4.1芙蓉鲫、芙蓉鲤与其各自亲本的性状比较

4.2关于芙蓉鲫性腺的败育性

4.3芙蓉鲫、芙蓉鲤与各自双亲的遗传相似率

4.4关于RAPD技术及反应体系

4.4.1关于RAPD-PCR反应体系与条件的优化

4.4.2关于RAPD分析中取样大小对统计结果的影响

4.5关于芙蓉鲫的遗传改良建议

4.6结论

参考文献

致谢

作者简介

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摘要

以芙蓉鲤为母本,红鲫为父本,获得杂交一代(简称芙蓉鲫),其主要性状如下:背鳍条Ⅲ,16-18;臀鳍条Ⅲ,5-6;侧线鳞32-35;侧线上鳞和侧线下鳞同为5-6;体长为体高的2.60±0.12倍,为头长的3.63±0.16倍,为体厚的5.26±0.33倍;头长为眼径的5.55±0.44倍,为眼间距的1.88±0.10倍,为吻长的2.86±0.50倍;尾柄长为尾柄高的1.00±0.10倍;全长为体长的1.20±0.02倍。 随机采集芙蓉鲫及其原始亲本各20~30尾,通过测定其形态和框架数据,用卡方分析、聚类分析、判别分析,比较了它们之间的形态异同。可数性状卡方分析表明,5组试验鱼可数性状无显著差异;形态和框架参数的聚类分析结果表明,除芙蓉鲤和红鲤之间无显著差异外,其它都有显著差异。从可量性状上看,芙蓉鲫(C1)与红鲫(A3)差异度较其与另3种原始亲本要低,亦即芙蓉鲫的外型与红鲫较为接近,而与另3种亲本外型差异较大。判别结果表明,判别效果较显著,判别准确率依次为芙蓉鲫100%,红鲫96%,红鲤87%,散鳞镜鲤81.3%,芙蓉鲤73.1%。 在优化RAPD检测条件的基础上,从20个随机引物中筛选出12个扩增较好的引物,对芙蓉鲫及其原始亲本红鲫、芙蓉鲤、散鳞镜鲤、红鲤相互间扩增DNA片段的异同性进行比较研究。结果显示,12个引物共产生961条带,单一引物扩增的DNA片段在0-7条之间,片段大小在60-1350bp之间。遗传相似率分析表明,芙蓉鲫与其原始母本芙蓉鲤的相似率为62.3896,与其原始父本红鲫的相似率为67.01%,说明芙蓉鲫接受原始父本红鲫的遗传物质要多一些;芙蓉鲤与其原始母本散鳞镜鲤的相似率为71.64%,与其原始父本红鲤的相似率为77.53%。红鲫与芙蓉鲤的相似率为63.95%,说明两者的基因组成有较大的相似性,从分子水平证实了红鲫和芙蓉鲤的远缘杂交具有较大的亲和性。 综合以往研究结果,可以推断,芙蓉鲫性腺败育、非整倍二倍体、偏父性遗传,三者紧密关联,可能的机理是,母本的遗传物质在融合中出现了部分排斥和丢失,子代中存在母本非整倍的遗传物质,父本的遗传物质在表达中占据一定优势。母本细胞质在子代稚鱼早期发育中发挥了一定的作用。

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