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石楠和红叶石楠组织培养与扦插繁殖研究

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1前言

1.1石楠和红叶石楠的应用价值

1.1.1园林应用价值

1.1.2石楠药用价值

1.2石楠属植物繁殖栽培研究进展

1.2.1国内石楠属植物研究进展

1.2.2国外石楠属植物研究进展

1.3本研究的目的与意义

2材料与方法

2.1实验材料

2.1.1石楠

2.1.2红叶石楠

2.2组织培养

2.2.1培养条件

2.2.2材料的清洗、消毒

2.2.3顶芽和腋芽的诱导

2.2.4不定芽直接再生

2.2.5不定芽间接发生

2.2.6继代增殖培养

2.2.7生根培养

2.2.8炼苗移栽

2.2.9评价指标

2.3扦插繁殖

2.4数据分析

3结果与分析

3.1 NaClO浓度及消毒时间对叶片叶柄和茎段消毒的影响

3.2激素对顶芽和腋芽启动的影响

3.2.1 BA和NAA对顶芽启动的影响

3.2.2 BA和NAA对腋芽启动的影响

3.3激素与暗培养时间对不定芽直接再生的影响

3.3.1不同激素配比对无菌叶片叶柄诱导不定芽的影响

3.3.2 BA、NAA不同浓度及暗培养时间对无菌叶片诱导不定芽的影响

3.3.3 BA、NAA对子叶、下胚轴诱导不定芽的影响

3.4不同外植体、激素和暗培养时间对石楠愈伤组织诱导的影响

3.4.1外植体种类和BA、2,4-D不同浓度组合对愈伤组织诱导的影响

3.4.2 NAA不同浓度对石楠叶片、叶柄愈伤组织诱导的影响

3.4.3暗培养时间对愈伤组织诱导的影响

3.4.4室外采集叶片和无菌叶片的愈伤组织诱导

3.5 BA和NAA不同浓度组合对石楠愈伤组织继代的影响

3.6激素对红叶石楠愈伤组织的诱导和继代的影响

3.7 BA和NAA对不定芽分化的影响

3.8激素对试管苗继代增殖的影响

3.8.1 BA浓度对试管苗增殖的影响

3.8.2 KT、GA3对石楠试管苗壮苗的影响

3.9生长素、蔗糖浓度和暗培养时间对试管苗生根的影响

3.9.1.生长素、蔗糖浓度对石楠生根的影响

3.9.2.生长素和暗培养时间对石楠生根的影响

3.9.3.生长素对石楠和红叶石楠生根的影响

3.10不同栽培基质对试管苗移栽的影响

3.11石楠和红叶石楠扦插生根类型

3.12生根剂对扦插繁殖的影响

3.12.1生根剂种类和浓度对石楠扦插繁殖的影响

3.12.2不同生根剂处理对红叶石楠扦插繁殖的影响

4讨论

4.1离体器官发生方式

4.2不同外植体对器官分化的影响

4.3暗培养时间对不定芽再生的影响

4.4TDZ对不定芽直接再生的影响

4.5生根剂对插穗生根速率的影响

4.6组培和扦插两种繁殖方法的优劣

参考文献

致谢

图版

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摘要

石楠(Photiniaserrulata)和红叶石楠(Photinia×fraseria)是优良的园林绿化树种,石楠叶还是常用的中药材。本研究的目的是从组织培养和扦插繁殖两个方面探索石楠和红叶石楠高效繁殖体系。组织培养过程中选用顶芽、茎段、叶片、叶柄、子叶、下胚轴为外植体,从直接器官发生和间接器官发生两种途径,建立组培再生体系,重点研究组培各阶段的培养基配方和培养条件。扦插繁殖的实验材料为石楠和红叶石楠当年生嫩枝,实验分别于春秋两季进行,主要探讨生根剂种类和浓度对插穗生根的影响。主要研究结果如下: (1)外植体消毒选用NaClO为消毒剂。叶片以0.5%NaClO消毒25min为宜;叶柄和茎段分别以1%NaClO消毒30min和2%NaClO消毒20min效果最佳。 (2)顶芽、腋芽启动过程中,石楠萌芽率较红叶石楠稍高。最佳的培养基配方分别是MS和MS+0.5mg/LBA。 (3)BA、NAA对叶柄分化不定芽有重要影响,石楠诱导不定芽时最适宜的培养基是MS+1.5mg/LBA+0.2mg/LNAA。红叶石楠在MS+2.0mg/LBA+0.2mg/LNAA培养基中,不定芽诱导率和再生芽数都达到最高。 (4)TDZ能显著提高石楠叶柄再生不定芽的个数,在MS+3.0mg/LTDZ+0.1mg/LNAA培养基中,平均再生不定芽为5.2个。 (5)石楠和红叶石楠叶片切口处能够产生不定芽。前期暗培养12d能够提高不定芽的诱导率和再生芽数。BA对不定芽诱导有显著影响,当培养基中BA浓度增加为2.0mg/L~3.0mg/L时,石楠和红叶石楠不定芽诱导率随之升高。 (6)与子叶相比,下胚轴直接再生不定芽的效果较好,在MS+2.0mg/LBA+0.1mg/LNAA培养基中,下胚轴的不定芽诱导率达到69.2%,平均再生芽数为1.9个。 (7)在愈伤组织诱导时,以无菌叶片为外植体取材方便,操作简单,出愈率高。石楠和红叶石楠无菌叶片在MS+0.5mg/LBA+0.5mg/L2,4-D培养基中先暗培养8d~12d,再光照培养,30d后出愈率达到98%以上。愈伤组织继代时最佳的培养基配方是MS+3.0mg/LBA+0.2mg/LNAA。愈伤组织分化不定芽时,石楠所需的细胞分裂素和生长素的量比红叶石楠要高,应分别选用MS+3.0mg/LBA+0.2mg/LNAA和MS+2.0mg/LBA+0.1mg/LNAA。 (8)石楠和红叶石楠在增殖过程中的最佳培养基配方分别为MS+2.0mg/LBA+0.1mg/LNAA和MS+0.5mg/LBA+0.1mg/LNAA。GA3用于石楠组培苗的壮苗效果较KT明显。 (9)同种激素条件下红叶石楠的生根率明显高于石楠,先期暗培养8d能够促进根的分化,在1/2MS+0.5mg/LIBA+0.5mg/LNAA+20g/L蔗糖培养基中生根率最高,分别达到72.3%和91.7%。 (10)石楠和红叶石楠组培苗炼苗移栽时,可选用林下土:珍珠岩=2:1作为栽培基质,移栽成活率分别达到77.7%和94.7%。 (11)石楠和红叶石楠扦插繁殖过程中,插穗生根速度缓慢,繁殖周期长。生根剂在一定程度上能够加快生根进程、促进根的发育。扦插时选用400mg/LNAA或IBA,浸蘸5s,能显著提高生根率和生根数。石楠和红叶石楠的生根率最高分别达到80%和86.7%。

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