磷脂酶A2的应用及一种新的他汀类物质萃取方法的建立

摘要

本论文包括两个方面的内容:
　　1.链霉菌高产磷脂酶A2的发酵及磷脂酶A2在油脂脱胶和浓缩磷脂改性中的应用;
　　2.一种新的测定他汀类物质的液相萃取方法的建立。
　　1.在50 L发酵罐中,优化了链霉菌发酵生产磷脂酶A2的条件。研究结果表明,通气量0.28 vvm,前16h转速300 r/min,16 h后调整转速为50 r/min,发酵周期36h,酶活达到最高,且与摇瓶发酵相比,周期缩短12 h。利用单因素和正交实验研究了磷脂酶进行菜籽油脱胶的最佳工艺,结果表明:0.065％的柠檬酸加入含磷量为145 mg/kg的菜籽油中,80℃500 r/min处理0.5 h,再按90μL/kg加入磷脂酶,在pH6.0,含水量2％,反应温度40℃的条件下反应时间3h,最终菜籽油中的磷含量小于10mg/kg,达到理想的脱胶效果。在此基础上进行中试,菜籽油通过酶处理、脱色和脱臭,达到一级食用油标准。
　　用大豆浓缩磷脂为底物进行了酶法改性研究,结果显示:大豆浓缩磷脂的最佳水解工艺条件为:底物浓度为10％,反应温度40℃,起始pH值7.0,Ca2+浓度5 mM,反应时间20 h。在最佳反应条件下,释放的脂肪酸为134.7μmol/g磷脂。酶解后溶血磷脂乳化能力,乳化稳定性显著强于未改性浓缩磷脂。
　　2.本文建立了高效液相色谱-超声波辅助的离子液体分散液相微萃取测定环境水体中微生物次级代谢药物洛伐他汀和半合成药物辛伐他汀的含量。离子液体:1-己基-3-甲基咪唑基六氟磷酸盐([C6MIM][PF6])作为萃取剂,优化了影响萃取的因素例如:起始温度,pH,盐度和冷却时间。通过液相色谱-紫外检测器测定,洛伐他汀和辛伐他汀的线性范围1-100 ng/ml,检测线分别为0.17,0.29ng/ml,精确度(RSDs,n=9)分别为:4.12％,4.52％。
　　该方法成功的应用在测定环境水体中,在洛伐他汀和辛伐他汀在实际水样中的加标回收率分别为90.0-102.2％,80.5-112.0％。结果显示超声波辅助的离子液体分散液相微萃取在样品前处理方面提供了一种新的极具潜力的思路。

目录

摘要

Abstract

第一章 磷脂酶A_2的发酵及其应用

1.前言

1.1 磷脂酶的来源及分类

1.2 磷脂酶A_2的应用

1.3 本研究目的和意义

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

3 结果与分析

3.1 发酵罐发酵工艺条件的优化

3.2 磷脂酶A_2用于油脂脱胶的优化

3.3 磷脂酶A_2改性大豆浓缩磷脂

3.4 改性磷脂相对乳化能力和乳化稳定性研究

4 讨论

4.1 磷脂酶A_2发酵过程

4.2 脱胶过程

4.3 磷脂酶A_2用于大豆浓缩磷脂改性

第二章 一种新的液相微萃取在测定他汀类物质中的应用

1 前言

1.1 洛伐他汀

1.2 辛伐他汀

1.3 他汀类药物的不良反应

1.4 测定他汀类物质的方法

1.5 本实验的研究目的和意义

2 材料和方法

2.1 仪器

2.2 药品与试剂

2.3 样品制备

2.4 超声萃取过程

3 结果和讨论

3.1 起始温度对超声萃取的影响

3.2 离子液体的体积对萃取的影响

3.3 冷却时间对萃取的影响

3.4 盐浓度对萃取的影响

3.5 pH值对萃取效率的影响

3.6 分析性能

3.7 实际水样的分析

4 结论

参考文献

硕士再读期间发表论文

致谢