不同苦瓜品种(系)多糖的提取工艺优化和构效差异分析

摘要

苦瓜（Momordica charantia）是葫芦科（Cucurbitaceae）苦瓜属(Momordica)苦瓜的果实，它是一种药用价值很高的蔬菜。近年来研究发现苦瓜果实中含有大量的活性成分，如苦瓜多糖、苦瓜皂甙、苦瓜素、苦瓜蛋白以及其它活性物质，这些活性物质具有降血压、降血脂、抗肿瘤、抗氧化等生理功能。
　　 本实验首先在同一环境条件下把5份苦瓜材料（4个苦瓜自交系和1个市场品种“翠妃”）种植于田间，然后采收瓜龄(15-20)天的嫩瓜，对其进行品质（硬度、可溶性固形物含量、维生素C含量）测验，在此基础上，进一步研究苦瓜多糖最适提取工艺条件，并比较了苦瓜水溶性粗多糖及苦瓜中性多糖的单糖组成和基本结构，最后对苦瓜中性多糖的抗氧化活性（清除羟基自由基能力和清除超氧阴离子自由基能力）进行测定，主要结果如下：
　　 1、热水浸提乙醇沉淀方法提取苦瓜粗多糖的最适条件为：提取温度为90℃；提取时间为3h；提取水料比25:1；提取次数为1次；乙醇浓度为95％。
　　 2、3份苦瓜水溶性粗多糖材料在单糖组成上存在差异，其粗多糖主要由阿拉伯糖(Ara)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glu)和半乳糖(Gal)四种单糖组成，其中3号和7号自交系水溶性多糖还含少量的鼠李糖(Rha)、木糖(Xyl)。而5份苦瓜中性多糖材料主要是由半乳糖组成，其中7号自交系还含有少量的鼠李糖。
　　 3、红外光谱分析苦瓜水溶性多糖和中性多糖发现，在官能团区(4000～1300)cm-1和指纹区(＜1300cm-1)两次结果的特征吸收峰基本是一致的，都出现多糖类物质的典型特征吸收峰，并且证明存在a型和β型吡喃糖环。
　　 4、苦瓜中性多糖在清除羟基自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2·)时，存在剂量效应，并呈现一定线性关系，同一材料在一定浓度范围内，浓度越高，清除能力越强；不同材料在同一浓度上，清除能力也存在差异。
　　 在清除羟基自由基能力上，不同材料在不同浓度间的差异不明显，只在1800ug/ml时，清除能力由大到小顺序依次为7号＞23号＞翠妃＞5号＞3号；在清除超氧阴离子自由基能力上，不同浓度，清除超氧阴离子自由基作用大小顺序是一致的，都表现为23号＞3号＞翠妃＞7号＞5号。
　　 另外，同一材料，清除超氧阴离子自由基能力要远大于清除羟基自由基能力。通过显著性分析表明，清除超氧阴离子自由基能力在材料和浓度间都存在极显著性差异，而在清除羟基自由基能力上，只在浓度间存在显著性差异，在材料间并不存在显著性差异。

目录

文摘

英文文摘

1 文献综述

1.1 多糖的概念、来源以及分类

1.1.1 多糖的概念

1.1.2 多糖来源的多样化

1.2 多糖的生物活性和结构

1.2.1 多糖的生物活性

1.2.2 多糖的结构以及结构和活性关系

1.3 多糖的提取流程以及纯化方法

1.3.1 多糖的提取

1.3.2 多糖的纯化

1.4 苦瓜多糖的研究现状

1.5 本课题研究的目的意义以及主要内容

2 材料与方法

2.1 实验材料与试剂

2.1.1 试验材料

2.1.2 试验试剂

2.2 试验仪器与设备

2.3 实验方法与步骤

2.3.1 不同苦瓜品种（系）种植、采收

2.3.2 不同苦瓜品种（系）品质性状测定

2.3.3 苦瓜多糖提取工艺流程

2.3.4 苦瓜多糖提取工艺优化

2.3.5 苦瓜粗多糖的提取与简单纯化

2.3.6 不同苦瓜品种（系）多糖提取率及其纯度初步鉴定

2.3.7 苦瓜粗多糖气相色谱和红外光谱分析

2.3.8 苦瓜多糖的进一步纯化

2.3.9 苦瓜粗多糖抗氧化活性分析

2.3.10 苦瓜中性多糖液相色谱和红外光谱分析

3 结果分析

3.1 不同苦瓜品种（系）品质性状测定

3.2 苦瓜多糖提取流程单因素实验

3.2.1 提取温度对苦瓜多糖提取率的影响

3.2.2 水料比对苦瓜多糖提取率的影响

3.2.3 提取时间对苦瓜多糖提取率的影响

3.2.4 浸提次数对苦瓜多糖提取率的影响

3.2.5 乙醇浓度对苦瓜多糖提取率的影响

3.3 碘-碘化钾反应

3.4 紫外扫描分析

3.5 5份苦瓜多糖材料多糖提取率、中性糖含量以及糖醛酸含量

3.6 三个自交系苦瓜多糖气相色谱图

3.7 三个苦瓜自交系多糖红外光谱图分析

3.8 不同材料苦瓜多糖的DEAE-52纤维素层析

3.9 不同材料苦瓜中性多糖的结构分析

3.9.1 红外光谱分析图

3.9.2 液相色谱分析

3.10 5份苦瓜中性糖材料抗氧化活性分析

3.10.1 苦瓜多糖清除超氧阴离子自由基(O2·)能力

3.10.2 5份苦瓜中性糖材料清除超氧阴离子自由基(O2.)能力比较

3.10.3 苦瓜多糖清除羟基自由基(·OH)能力

3.10.4 5份苦瓜中性多糖材料清除羟基自由基(·OH)能力比较

4 讨论

5 结论

5.1 多糖最适提取条件

5.2 单糖组成分析

5.3 抗氧化分析

参考文献

致谢

硕士期间发表论文情况