植物性食品中硒的形态分析方法的建立

摘要

硒是人体必需的微量营养元素之一,虽然其在环境和植物体中的含量很小,但它对人体有着巨大的生物功效。由于硒的生物有效性和致毒性都与其形态密切相关,现在常用总硒含量来评价其营养性和毒性存在较大不足,因此建立硒的分析方法并推广应用十分必要。本研究就是要以生物中最常见的四种硒形态为基础,建立用HPLC-HG-AFS联用测定植物性食品中硒形态的方法。本项研究的主要特点和成果有:
　　 1.研究对象具有很强的代表性。根据硒本身的营养性、毒性特点以及植物对硒的吸收特点等因素,将植物性食品按植物的科属分类,选择十字花科、百合科、豆科等植物性食品进行分析,并在条件允许的情况下对尽可能多的样品进行分析测定。
　　 2.确立了比较适宜的硒形态分析提取方法。通过对比测试分析,在沸水浴提取、高氯酸乙醇提取、甲醇水提取、酶提取四种前处理方法中,以甲醇水提取的提取效率较高。
　　 3.在本实验条件下,建立了仪器分析的最佳条件。对仪器分析中每一个参数进行了样品检测研究,提出仪器的最佳试验参数为:HPLC部分(流动相为60 mmol/L的(NH4)2HPO4,其pH为5.5),HG部分(还原剂为1.5％(m/v)的KBH4+0.5％KOH(m/v)+0.1％KI,载流为15％的盐酸),AFS部分(硒空心阴极灯灯电流为45 mA,光电倍增管负高压为300 V,载气流速为400 mL/min,屏蔽气流速为900 mL/min)。
　　 4.经可靠性分析认为提出的检测方法准确可靠。对所建立的方法进行了方法检出限、回收率、精密度等试验,四种形态硒的检出限分别为SeCys6.29-6.46μg/L,Se(Ⅳ)5.46-5.57μg/L,SeMet17.15-17.99μg/L,Se(Ⅵ)7.56-7.90μg/L；用某一浓度的混标连续进样7次,四种形态硒的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为:SeCys0.6％、2.6％,Se(Ⅳ)0.1％、2.6％,SeMet0.8％、2.5％,Se(Ⅵ)0.2％、4.7％；四种形态硒的峰面积和其浓度呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.999。
　　 5.开展了新方法的应用研究。将建立的方法对尽可能多的植物性食品中硒进行测试,结果表明,不同样品中不同形态硒的分离效果良好,部分号称富硒的食品名不符实,其硒含量是很低的。