涩柿品种甜柿化遗传改良技术体系的建立

摘要

近年在湖北、河南和安徽三省调查发现了一些原产中国PCNA品种，具有自然脱涩性状受显性基因控制的特点。利用中国原产PCNA品种可克服近交衰退，并为柿育种提供新的策略，具有推动加速培育新PCNA品种的潜力。本研究以‘恭城水柿’，‘鄂柿1号’(Diospyros kaki Thunb.)为母本，以完全雄性种质雄株10号(D.kakiThunb.)为父本，利用人工杂交授粉及胚挽救技术获得F1代，通过组织培养、炼苗移栽、嫩枝嫁接等技术保存获得新种质；进一步应用柿中开发的SSR和IRAP分子标记对获得的Fi群体材料进行杂种鉴定，并利用RO2-SCAR标记对其进行非涩性状的早期辅助选育。
　　 主要研究结果：
　　 1、杂交试验表明，父本雄株10号花粉具有正常的萌发能力，萌发率为29.9%，与‘恭城水柿’，‘鄂柿1号’柱头亲和力较好，两个组合座果率分别为66.7%，40.0%。利用胚抢救技术获得以‘恭城水柿’，‘鄂柿1号’为母本，以雄株10号为父本的2个杂交组合的F1代试管苗251株，成苗率分别为94.7%、95.8%。包括：‘恭城水柿’×雄株10号(162株)，‘鄂柿1号’×雄株10号(89株)。
　　 2、通过组织培养、炼苗移栽、嫩枝嫁接等技术保存了348份获得的新种质，试管苗保存237份，炼苗移栽保存108份，嫁接保存3份。夏季胚抢救获得胚培苗，秋季通过顶端嫩枝嫁接技术将其转移至田间保存。
　　 3、利用SSR标记，对杂交F1代群体进行种质鉴定分析，筛选出2对SSR引物用于‘华柿1号’×雄株10号F1代群体(6份)杂种鉴别，筛选出1对用于‘华柿1号’ב罗田甜柿’F1代群体(32份)杂种鉴别；利用IRAP标记对‘华柿1号’×雄株10号F1代群体(6份)进行亲缘关系鉴定分析，结果表明，早期开花(5份)的材料来自同一个胚培苗。利用RO2-SCAR标记筛选得到46份‘鄂柿1号’×雄株10号为候选PCNA类型的F1代。

目录

文摘

英文文摘

缩略词表

1 前言

1.1 课题的提出

1.2 前人的研究进展

1.2.1 柿属亲缘关系研究

1.2.2 柿育种与生物技术研究进展

1.3 研究目的和意义

1.4 研究内容

2 甜柿化遗传改良涩柿品种新种质的获得与保存

2.1 主栽柿品种与中国柿完全雄性种质杂交获得新种质

2.2 柿新种质的保存

2.2.1 柿胚培苗炼苗、移栽和柿试管苗保存

2.2.2 柿无根试管苗的嫁接

2.3 结果与分析

2.3.1 花粉萌发数据统计

2.3.2 主栽柿品种的杂交试验

2.3.3 新种质的保存

2.4 讨论

3 利用分子标记鉴定柿新种质和辅助甜柿化育种

3.1 主要试剂及仪器

3.2 基因组DNA提取与质量检测

3.2.1 基因组总DNA的提取

3.2.2 DNA质量的检测

3.3 利用SSR分子标记进行杂种鉴定

3.3.1 材料与方法

3.3.2 结果与分析

3.3.3 讨论

3.4 利用IRAP分子标记鉴别单株间的差异

3.4.1 材料与方法

3.4.2 结果与分析

3.4.3 讨论

3.5 利用RO2-SCAR标记对杂交F1代非涩性状早期辅助选育

3.5.1 材料与方法

3.5.2 结果与分析

3.5.3 讨论

4 中国涩柿品种甜柿化遗传改良技术体系的建立

4.1 涩柿甜柿化遗传改良技术体系

4.2 问题与展望

参考文献

附录

图版

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