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水稻部分骨干亲本的指纹图谱构建和遗传多样性分析

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摘要

缩略词表

1 前言

1.1 水稻概述

1.1.1 水稻的分类

1.1.2 杂交水稻的研究进展

1.2 水稻指纹图谱的研究进展

1.3 应用分子标记构建DNA指纹图谱的研究进展

1.3.1 形态标记

1.3.2 细胞学标记

1.3.3 生化标记

1.3.4 分子标记

1.4 水稻指纹图谱构建的目的

2 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 田间试验设计和农艺性状考察

2.3 不育系育性统计及不育类型鉴定

2.4 水稻DNA提取和SSR标记的选择

2.5 PCR扩增及产物检测

2.5.1 PCR扩增

2.5.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳

2.6 种子纯度鉴定

2.7 指纹图谱构建及数据分析

3 结果与分析

3.1 指纹图谱构建

3.2 多态性分析

3.3 杂交种纯度鉴定

3.4 不育系花粉不育类型结果

3.5 亲本资源的SSR遗传多样性分析

3.5.1 恢复系农艺性状统计分析

3.5.2 亲本资源的SSR遗传多样性分析

3.5.3 供试水稻亲本材料的遗传多样性分析

4 讨论

参考文献

附录

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致谢

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摘要

水稻(Oryza sativa L)是我国乃至世界的主要粮食作物,是世界近一半人口的主要热量来源。这些年来我国在品种选育方面取得了喜人成果,为了提高育种家的积极性,保证育种成果的合法推广,构建水稻品种的指纹图谱,研究其遗传多样性对今后品种保护和水稻研究工作至关重要。本研究利用56对微卫星标记对60份水稻主要亲本材料进行了DNA指纹图谱构建和遗传多样性分析研究,主要结果如下:
  1.从72对SSR引物中筛选出56对稳定性好、杂带少、多态性丰富并且在水稻12条染色体上分布均匀的SSR引物为核心引物进行研究分析。56对SSR引物在60份水稻材料中一共扩增出217个多态性片段,每个SSR位点可检测出2-9个等位基因不等,平均每对引物可检测出3.88个等位基因。56对引物的平均多态性频率为0.49,平均多态信息含量为0.48,平均基因多样性为0.52,平均有效等位基因数为2.22。在一定程度上反映了试验微卫星标记多态性比较丰富,对这60份亲本材料的区分能力较强,但试验材料的异质程度不高,遗传多样性不够丰富。
  2.利用筛选出的56对SSR引物,构建了60份水稻亲本材料的DNA身份证,即指纹图谱,并利用此图谱对杂交组合广占63-4S/9311、培矮64S/9311和C815S/蜀恢527的杂交种进行了纯度鉴定,利用SSR分子标记得到的纯度与田间鉴定的纯度结果基本一致。利用DNA指纹图谱进行种子纯度鉴定具有一定的代表性和可信度,也是解决今后杂交水稻纯度鉴定的有效途径。
  3.对本试验的60份亲本材料进行SSR聚类分析,60份亲本材料的遗传相似系数范围为0.56-0.98,以遗传相似系数为0.56处为阈值,可将籼稻和粳稻分开为两个群,说明彼此亲缘关系相对较远。以遗传相似系数为0.73为阈值,可将籼稻群分为3个亚群,两系不育系主要划归入第1、2亚群,三系不育系主要划归入第2亚群,恢复系主要划归入第3亚群。以上基于分子标记的遗传分析有效地鉴定了各材料间的亲缘关系,对今后的水稻育种工作上具有一定科学意义。

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