水牛奶中体细胞变化规律和夏季应用褪黑素对奶中体细胞数及同期发情的作用

摘要

为探究影响水牛奶中体细胞数(SCC)的因素和外源褪黑素对杂交水牛卵泡发育及奶中体细胞数降低的作用，本研究根据DHI记录，分析月份和胎次对水牛奶中体细胞的影响，并对乳中体细胞数较高的杂交水牛用不同浓度的褪黑素处理，分析血液中各种生理生化指标和乳中体细胞数，检测卵泡发育情况等，旨在为开发降低夏季水牛奶中体细胞数、提高杂交奶水牛繁殖性能的新技术奠定基础。
　　1.月份和胎次对水牛奶中体细胞数的影响
　　收集2012～2017年奶水牛的DHI数据，分析胎次和泌乳月份对水牛奶中体细胞数的影响。由于体细胞数的分布频率呈偏态性，因此将体细胞数换算成体细胞评分(SCS)进行分析。
　　结果表明:泌乳月份对SCS具有显著影响(p＜0.05)。SCS值表现为8月份最高、5月份最低。此外，SCC＞40万个/mL的牛群占总体样本量的比例，6～8月最多，其次是冬季。乳中SCS值在胎次（1～3胎）间也有显著差异(p＜0.05)，随着胎次的升高，奶中体细胞数升高。
　　2.皮下注射褪黑素对奶中体细胞评分和血中抗氧化及免疫指标的影响
　　选择水牛奶中体细胞数高于50万个/mL的泌乳奶水牛20头，随机分为两组（各10头）。低和高剂量组分别连续4天注射4.68mg和20mg褪黑素，并检测奶样中体细胞数和血浆中抗氧化及免疫指标。
　　结果表明:皮下注射褪黑素后，高剂量组奶中体细胞评分显著性低于注射前体细胞评分(p＜0.05)，但是两种剂量组之间没有显著性差异(p＞0.05)。此外，通过观察治疗后第11天的治愈奶水牛数，发现高剂量组恢复亚健康(SCC≤50万个/ml)的杂交奶水牛数比低剂量组高10％。褪黑素处理后能够显著提高血液中MT、SOD和IgM含量(p＜0.05)。因此，夏季连续4天皮下注射褪黑素能够显著降低奶中体细胞数，作用机制是通过提高血液中SOD和IgM浓度来增强奶水牛免疫和抗氧化能力。
　　3.皮下注射褪黑素对奶水牛卵泡发育的影响
　　选择30头奶水牛分成3组，每组10头。T1组每天皮下注射60mg/500kg褪黑素，连续注射3天;T2组一次性皮下注射180mg/500kg褪黑素，对照组注射生理盐水。以第1次注射褪黑素当天为第0天，在第4天注射促性腺激素释放激素(GnRH)200μg，第11天注射氯前列腺素(PGF2α)0.5mg，第13天再次注射促性腺激素释放激素(GnRH)200μg，分别于第二次注射GnRH后进行人工授精。一天两次用B超检测记录卵泡发育情况，且于配种后45天进行妊娠诊断。
　　结果表明:在注射褪黑素后，处理组血液中SOD、MT和IgM浓度显著高于对照组(p＜0.05)。在注射PGF2α以后，皮下注射褪黑素组的优势卵泡半数生存期（有且只有50％的优势卵泡存活的时间）、卵泡平均发育速率（1.Smm/d和0.7mm/d）大卵泡直径显著大于对照组(p＜0.05)。此外，单次注射褪黑素组的排卵卵泡直径、排卵率、大卵泡数量以及受胎率都显著性高于其他组(p＜0.05)。因此，用褪黑素皮下注射经产水牛后，均能够产生较高的SOD和IgM水平，两组处理方式结合Ovsynch同期发情方案(GPG)均能促进卵泡的发育和排卵，但单次注射组更能显著性增加排卵卵泡的数量和直径，且提高杂交奶水牛在非繁殖季节的发情、排卵和受胎比例。

目录

论文说明

声明

摘要

缩略语表(Abbreviation)

第一部分 文献综述

1 褪黑素对奶中体细胞数的作用研究进展

1．1 奶中体细胞数升高的危害及其影响因素

1．2 褪黑素对奶中体细胞数的作用研究进展

2 水牛同期发情的理论和技术研究进展

2．1 水牛发情周期的特征

2．2 影响水牛发情周期的因素

2．3 水牛同期发情技术研究进展

2．4 褪黑素对动物繁殖的作用研究进展

第二部分 实验研究

目的与意义

试验一、水牛奶中体细胞变化规律

2 试验材料与方法

3 试验内容与方法

4 结果与分析

5 讨论

6 本节总结

1 前言

2 试验材料与方法

3 试验内容与方法

4 结果与分析

5 讨论

6 本节总结

实验三、夏季应用褪黑素对杂交奶水牛卵泡发育的研究

2 试验材料与方法

3 试验内容与方法

4 结果与分析

5 讨论

6 本节总结

创新与不足

创新之处

不足之处

参考文献

致谢