颞叶癫痫大鼠海马齿状回神经干/前体细胞的增殖过程研究

摘要

目的:
　　研究氯化锂-匹鲁卡品诱导大鼠癫痫持续状态后海马齿状回颗粒细胞下区神经干/前体细胞增殖过程趋势,从而探讨神经发生在癫痫病因学的潜在作用。
　　方法:
　　成年雄性S-D大鼠随机分成两大组,即实验组和对照组,实验组包括癫痫SE后第3天组、第7天组、第14天组、第28天组,对照组也包括相应天数组,每组各6只。利用氯化锂、东莨菪碱及匹鲁卡品腹腔注射诱导癫痫持续状态模型,根据Racine癫痫发作级别选择Ⅳ和Ⅴ级的大鼠纳入实验组。对照组接受生理盐水腹腔注射。利用BrdU作为细胞增殖标记物,分别在既定实验分组的前2天开始接受BrdU连续3天的腹腔注射(50mg/kg),每天注射2针,间隔12小时,末次注射后的24h处死大鼠。免疫荧光染色方法,使用BrdU单克隆抗体,观察实验组及对照组不同时间点海马齿状回颗粒细胞下区新生的神经干/前体细胞的表达。
　　结果:
　　在正常对照组,海马齿状回颗粒细胞下区存在少量稀疏的BrdU阳性细胞的表达,但各组间无显著性差异。与对照组相比,实验组中可以很明显的观察到海马齿状回颗粒细胞下区BrdU阳性细胞数表达明显增多,从第3天开始逐渐增加,至第14天增殖达到高峰,后逐渐下降,第28天回到基线水平但仍高于对照组,再经SNK-q检验对实验组进行两两比较得出BrdU+14d>BrdU+7d>BrdU+28d>BrdU+3d,说明在实验组内第7天BrdU表达量高于第28天,第3天BrdU表达量相对最少,但仍高于对照组。
　　结论:
　　氯化锂-匹鲁卡品诱导大鼠癫痫持续状态后海马齿状回颗粒细胞下区神经发生明显增加并迁移至颗粒细胞层及门区,以第7-14天增殖明显;同时伴随CA1、CA3和门区神经元丢失;神经干/前体细胞增殖和迁移是否与CA1、CA3和门区神经元明显死亡具有相关性及其机制有待进一步研究。

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前言

中文摘要

英文摘要

引言

材料与方法

1 动物及材料

2 模型制作及分组

3 BrdU标记方法

4 组织固定及石蜡包埋切片

5 BrdU免疫荧光染色及荧光显微镜观察

6 NeuN免疫组织化学染色

7 细胞计数及统计学分析

结果

1 行为学观察结果

2 BrdU免疫荧光染色结果

3 NeuN免疫组织化学染色研究

讨论

结论

参考文献

附表

附图

综述

参考文献

致谢