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【6h】

颅脑损伤早期外周血中性粒细胞氧化爆发和吞噬功能的研究

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前言

实验材料

1、主要仪器

2、主要试剂

实验方法

1、样本选择

2、氧化爆发检测

3、吞噬功能检测

4、自由基检测

5、iNOS、COX-2及gp91phox western blotting检测

6、血细胞涂片NF-kB、iNOS、COX-2及gp91phox 免疫组化检测

7、细胞因子检测

8、C反应蛋白检测

9、统计分析

实验结果

1、外周血白细胞计数

2、流式细胞检测

3、中性粒细胞氧化爆发及吞噬功能测定

4、自由基测定

5、胞浆氧化酶类测定

6、NF-kB及氧化酶类的空间表达

7、细胞因子及C反应蛋白测定

讨论

参考文献

综述

参考文献

附录:

致谢

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摘要

目的:研究颅脑损伤患者早期外周血中性粒细胞的氧化爆发及吞噬功能变化。
  方法:选择12例颅脑损伤患者(颅脑损伤组,TBI),12例骨折患者(创伤控制组,TC)及10例健康者(健康对照组,U),采用流式细胞术、Westernblot等方法分别于伤后6h、12h、24h、48h、72h、1w及2w检测外周血中性粒细胞氧化爆发强度,吞噬率,自由基,NF-kB,gp91phox,COX-2,iNOS,及血浆TNF-α,IL-6和CRP的变化情况。
  结果:TBI组较U组在各时间点中性粒细胞氧化爆发明显增强(P<0.05),且高于TC组;TBI组中性粒细胞的吞噬率在各时间点均明显降低,而TC组在24h-72h降低(P<0.05),TC组中吞噬率在伤后1w可恢复正常范围,TBI则在伤后2w仍处低水平吞噬活性状态;除外TC组在2w时,其余时间点TC和TBI组中性粒细胞自由基均明显增加(P<0.05),且颅脑损伤越重,增加越明显;伤后24hTBI组和TC组中gp91phox,COX-2和iNOS的表达均增加(P<0.05),且TBI组较TC组增加更显著,而NF-kB的增加则两者相似;细胞因子TNF-α,IL-6以及CRP在TC组1w后可趋于正常,而在TBI后2w内仍处于高水平(P<0.01)。
  结论:颅脑损伤早期外周血中性粒细胞氧化爆发作用增强,而吞噬功能下降。

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