IL-4和IL-13对支气管上皮细胞上CXC趋化因子受体CXCR4表达的影响

摘要

研究背景:
　　CXCR4存在于机体多种细胞表面,是趋化因子SDF-1α的特异性受体,在细胞的增殖和迁移中起着重要作用。有研究证实CXCR4及其配体SDF-1α参与了哮喘的气道炎症和气道高反应,在哮喘中发挥重要作用。Th2细胞因子IL-4和IL-13在哮喘的发病机制过程中扮演了重要角色,嗜酸性粒细胞表面CXCR4的表达在IL-4和IL-13的影响下有所改变。而哮喘中支气管上皮细胞是否表达CXCR4以及其表达是否受Th2细胞因子IL-4和IL-13的影响,目前尚未有研究报道。
　　目的:
　　探讨支气管上皮细胞在Th2细胞因子环境下是否表达CXCR4以及其表达是否受IL-4和IL-13的影响。
　　方法:
　　本实验通过用六孔板培养人支气管上皮细胞系,饥饿16h,然后用IL-4(20ng/ml)和IL-13(20ng/ml)分别及联合刺激支气管上皮细胞24h,形成Th2细胞因子环境,以体外模拟哮喘环境。通过提取蛋白,电泳,把丙烯酰胺凝胶中的蛋白转移到PVDF膜上,封闭1h,CXCR4单克隆抗体抗体孵育过夜,洗涤后加入二抗孵育1h,洗涤,ECL显色、曝光。
　　结果:
　　正常组HBEsCXCR4蛋白表达灰度比值为(0.54±0.07),而IL-4刺激组CXCR4蛋白表达灰度比值为(0.91±0.07),明显高于正常组(P<0.05),具有统计学差异。IL-13刺激组CXCR4蛋白表达灰度比值为(1.11±0.11),与正常组比较,也明显增高(P<0.05),差异具有统计学意义。IL-4+IL-13联合刺激组CXCR4蛋白表达灰度比值(1.19±0.18),明显高于正常组(P<0.05),具有统计学差异。
　　结论:
　　该实验结果表明哮喘环境中支气管上皮细胞表面CXCR4蛋白表达上调,Th2细胞因子IL-4和IL-13均可使支气管上皮细胞表面CXCR4表达增高,说明其表达受到Th2细胞因子的调控。

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前言

材料与方法

一、材料、试剂与仪器

二、人支气管上皮细胞（HBEs）的培养及传代

三、细胞分组及刺激实验

四、各组CXCR4蛋白表达的检测

七、统计学方法

结果

一．正常人支气管上皮细胞表达CXCR4，IL-4、IL-13刺激后可使人支气管上皮细胞CXCR4受体蛋白水平表达增多

二. 根据ImageJ图像处理软件分析灰度值及统计学软件分析：

讨论

结论

参考文献

综述

参考文献

致谢