苦瓜根降糖物质基础、质量分析及提取工艺研究

摘要

第一部分苦瓜根的生药学研究
　　 目的:对苦瓜根进行生药学鉴定,为苦瓜根的开发利用和质量标准的制订提供科学依据。方法:分别从原植物性状、显微鉴别、理化鉴别等方面对苦瓜根进行生药学研究。结果:苦瓜根在原植物性状、显微、理化等方面具有专属性的特征。结论:本研究可为制订苦瓜根药材质量标准、开发和利用该药资源提供理论依据。
　　 第二部分苦瓜根提取物对α-葡萄糖苷酶抑制作用研究
　　 目的:通过α-葡萄糖苷酶抑制剂的体外筛选模型研究苦瓜根提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,筛选其活性部位。方法:采用乙醇回流提取,有机溶剂萃取,得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等不同萃取部位,检测醇提取物和各萃取部位对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。结果:苦瓜根醇提物不同萃取部位对α-葡萄糖苷酶均有一定的抑制作用,与空白对照组对比,差异具有显著性(P＜0.01);其中水部位的抑制作用最强,当浓度为100ug.ml-1时,抑制率达到61％。结论:苦瓜根醇提物不同萃取部位对α-葡萄糖苷酶均有抑制作用,其中水部位的抑制作用最强。第三部分苦瓜根皂苷苷元成分研究与降糖活性部位筛选日的:研究葫芦科苦瓜属植物苦瓜Momordica charantia.L根的化学成分与筛选苦瓜根降糖活性部位。方法:采用70%乙醇回流提取苦瓜根,减压浓缩得浸膏,水悬浮后用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇逐级萃取得到苦瓜根提取物的各个不同极性部位。采用硅胶柱色谱和制备薄层色谱从乙酸乙酯部位分离单体化合物,并采用颈部皮下注射400μg.kg-1盐酸肾上腺素注射液复制小鼠高血糖模型进行苦瓜根中降糖活性部位的筛选。结果:从苦瓜根乙酸乙酯部位共分得3个化合物,化学结构分别为β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅰ),5,25-豆甾二烯醇(5,25-stigmastadien-3-ol,Ⅱ)、(23E)-5β,19-epoxycucurbita-6,23-diene-3β,25-diol和Cucurbita-5,24-diene--3,7,23-trione。降糖活性筛选结果表明苦瓜根不同极性萃取部位及苦瓜苷元对肾上腺素性高血糖均有一定的降血糖效果,正丁醇部位和水部位的降血糖作用最为显著。结论:分离得到的苦瓜苷元具有一定的降糖活性,但正丁醇部位和水部位对肾上腺素高血糖小鼠模型的降血糖作用更为显著。
　　 第四部分 HPLC测定不同产地苦瓜根中苦瓜皂苷的含量
　　 日的:测定不同产地苦瓜根中苦瓜皂苷的含量。方法:采用HPLC法对主要指针性成分进行定量检测,色谱条件为色谱柱:Gemini C18柱(250×4.6 mm,5μm),流动相:水.甲醇(45:55),流速:1.0 mL·min-1波长:205 nm,进样量:10μL。结果:苦瓜皂苷对照品在0.051～1.02 mg·mL-1范围内呈良好的线性关系,Y=1.7504X-0.3545(r=0.9998),平均回收率为99.38%(RSD=1.99%)。结论:不同产地苦瓜根中苦瓜皂苷的含量有较大差别,可用此法较好的评价该品种的质量。
　　 第五部分正交试验法优选苦瓜根总皂苷提取工艺
　　 目的:优选苦瓜根中苦瓜总皂苷的最佳提取工艺。方法:以提取液中苦瓜总皂苷含量为考察指标,分光光度法测定其含量,采用L9(34)正交试验法优选苦瓜根总皂苷的提取工艺。结果:较优的提取工艺为提取2次,每次2h,乙醇浓度60%,乙醇用量8倍,提取温度80℃。结论:优选得到的提取工艺稳定、可行、重现性好,可为苦瓜根总皂苷的提取提供参考。