远志药材中远志皂苷B的含量分析及药代动力学研究

摘要

远志为远志科植物远志(Polygala tenuifolia willd)或卵叶远志(polygalasibirica L.)的根，具有安神益智、祛痰、消肿的功能，临床多复方配伍用于治疗心悸，失眠，健忘等症。近年来，许多学者发现，远志作为单品也有较强的镇静催眠作用，其主要有效成分为远志总皂苷。目前，从远志根中已经分离得到远志皂苷（Onjisaponin）A、B、C、D、E、F、G等多种皂苷成分。近年来临床上发现远志常规用量可引起不良反应，如轻度恶心、呕吐等，通过现代研究分析初步认为皂苷类活性成分可能为远志中主要的毒性成分。本课题组前期研究结果显示，远志皂苷B为远志镇静催眠的主要活性成分之一，同时也是其产生毒性的成分之一。现版《中国药典》（2010版）远志药材项下，其皂苷类成分是以远志皂苷的水解产物——细叶远志皂苷为质控指标，而细叶远志皂苷在远志药材中未见有被检出的报道，因而以其为质控指标不能全面控制远志药材的质量。远志皂苷B既是有效成分，又是有毒成分，探讨其在体内的药代动力学特性对指导该药材的临床应用具有重要意义。本论文以远志皂苷B为研究对象，进行远志药材中远志皂苷B的含量分析及药代动力学研究，为进一步完善远志药材的质量标准、诠释远志炮制减毒作用及指导临床应用提供科学依据。本论文完成的主要研究工作有:
　　(1)建立了HPLC测定远志中远志皂苷B的含量的方法，为完善远志药材的质量控制标准提供了科学依据。实验结果显示，测定的5个不同产地6批市售远志药材中远志皂苷B的含量介于1.62％～2.26％之间，其中产自河北的远志药材远志皂苷B的含量最高，而其他4个产地药材的含量差别不大。
　　(2)考察了常用的4种不同炮制方法对远志饮片中远志皂苷B含量的影响。实验结果显示，远志采用蜜制后远志皂苷B的含量明显下降，推测远志皂苷B含量下降可能是导致蜜远志较生远志毒性低的原因之一;其他几种炮制方法对远志皂苷B含量影响不大，但对远志所含的其他皂苷成分是否产生影响有待进一步研究。
　　(3)探讨了远志皂苷B在大鼠体内的代谢特性。选择雄性SD大鼠为受试动物，分为高、低2个剂量(80mg/kg、40mg/kg)进行远志皂苷B的药代动力学研究。采用单次灌胃给药方法，测定不同时间点血浆中远志皂苷B的浓度;采用LC/MS/MS对血浆样品进行高灵敏度、高特异性的检测;以DAS软件处理拟合数据，计算其相关药代动力学参数。结果显示，单次灌胃给药后，高剂量组主要动力学参数为:Cmax为67.081 ug·L-1，Tmax为240min，AUC(0-t)为38513.44ug·L-1·min， AUMC(0-t)为18980972.28，t1/2z为441.02min;低剂量组主要动力学参数为:Cmax为43.834 ug·L-1，Tmax为360min，AUC(0-t)为26270.73ug·L-1·min，AUMC(0-t)为12807100.76，t1/2z为391.695min。结果表明高剂量的远志皂苷B在胃肠道中吸收和代谢更快。
　　(4)初步分析了远志皂苷B在SD大鼠体内的代谢产物。采用LC/MS方法检测含药血浆，以理论推测与实验结果相结合及含药血浆与空白血浆相对照的方法，初步进行了SD大鼠口服灌胃给药远志皂苷B后在SD大鼠体内的代谢产物研究。结果显示，远志皂苷B在大鼠体内代谢后，容易脱去末端的部分糖基，至少产生了可能的3种代谢产物。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

第一章 文献综述

1 中医药抗焦虑的研究概况

2 远志的研究概况

3 中药药代动力学的研究概况

第二章 远志及其炮制品中远志皂苷B的含量测定

1 仪器与试药

1．1 仪器

1．2 试药

2 方法与结果

2．1 远志不同炮制品的制备

2．2 溶液的制备

2．3 色谱条件

2．4 线性关系考察

2．5 精密度试验

2．6 重复性试验

2．7 稳定性试验

2．8 加样回收试验

2．9 样品含量测定

3 讨论

第三章 远志皂苷B的药代动力学研究

1 仪器与材料

1．1 试剂与药品

1．2 实验仪器

1．3 试验动物

2 方法与结果

2．1 液相色谱条件

2．2 质谱条件

2．3 远志皂苷B标准溶液和三七皂苷内标溶液的制备

2．4 给药方案与血浆样品采集

2．5 方法学考察

2．6 远志皂苷B的药代动力学试验

3 讨论

第四章 远志皂苷B在大鼠体内代谢产物初步研究

1 仪器与材料

1．1 试剂与药品

1．2 实验仪器

1．3 试验动物

2 方法与结果

2．1 液相色谱条件

2．2 质谱条件

2．3 远志皂苷B大鼠体内代谢产物样品溶液的制备

2．4 SD大鼠灌胃给药远志皂苷B后的代谢产物研究

2．5 结果分析

结语与创新

发表论文

参考文献

附录

致谢