烟草内源性抗烟草花叶病毒(TMV)活性成分研究

摘要

植物病毒是农业上非常严重的病害，往往给农作物的产量造成巨大的损失。近年来，植物源抗病毒物质以其特有的优势成为抗病毒药剂筛选中的一个热点。本研究以心叶烟（Nicotiana glutinosa）和K326(Nicotiana tabacum CV，K326）为寄主材料，以烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus， TMV）为供试毒源，采用活性跟踪法和现代的分离技术手段，对烟草内源性抗TMV的活性成分进行了研究，主要的研究结果如下：
　　（1）利用半叶枯斑法及叶圆片悬浮筛选法对云烟203，心叶烟，K326三个品种烤烟的全株、根、茎、叶、烟杈甲醇提取物进行抗TMV活性测定。研究结果显示：三种烤烟的全株、根、茎、叶和烟杈甲醇提取物对TMV体外钝化、保护和治疗均具有一定的抑制活性，根的活性最好，相对于全株对TMV的抑制率提升较多；茎次之，叶和杈较差。三个品种烟草根部提取物经普通烟草K326活体验证，表现出明显的剂量效应。
　　（2）利用半叶枯斑法对云烟203，心叶烟，K326三个品种烤烟根部不同极性溶剂的提取物进行抗TMV的活性研究，发现三个品种烤烟根部乙酸乙酯部分对TMV的钝化作用、保护作用以及治疗作用较强。
　　（3）对K326根部的乙酸乙酯萃取物用硅胶划段后，二氯甲烷：甲醇9:1(Fr.2)部分活性进一步增强，对TMV侵染的钝化、保护及治疗作用的抑制率分别达到93.06％、85.03%、71.54%；对Fr.2部分进一步划段分成三部分后，三部分对TMV侵染均表现出较强的活性。经过对根部各提取物进一步活性验证，Fr.2、Fr.2-1、Fr.2-2、Fr.2-3表现出与宁南霉素相近的活性。
　　（4）利用多种现代分离技术（silsca gel、Sephadex LH-20、ODS、HPLC、MCI）对K326根部的进行成分分离；利用MS、NMR、IR、UV等光谱技术对分离得到的化合物进行结构鉴定。从K326的根部分离得到化合物40个，鉴定了17个化合物。结构类型包括木质素（1-2）、黄酮（17）、香豆素（4-12）和苯环衍生物（3，13-16）等，其中2个新化合物(1-2)。它们分别是：Spondlakin A(1)，SpondlakinB(2)，1-β-D-glucopyranosyl-2,6-dimethoxy-4-Propenylphenol(3)，Micromelin(4)，Acetylhydromicromelin A(5),DihydromicromelinA(6)，DihydromicromelinB(8)，Hopeyhopin(8)， Nodakenin(9)，Scopoletin(10)，Scopolin(11)，Magnolioside(12),2-Methoxy-4-(2-propenyl)phenylβ-D-glucopyranoside(13)，Benzyl-β-D-glucopyranoside(14)，Dictamnoside A(15)，2-(4-Ethylphenyl)ethanol(16)，5,7-Dihydroxyl-3,8,4'-trimethoxylflovone（17）。

目录

声明

K326根部分离鉴定的化合物

英文缩略语

前言

第一章 文献综述

1微生物源抗TMV物质

2植物源类抗TMV物质

3动物源以及海藻类抗TMV物质

4 小结

第二章三个品种烤烟的全株、根、茎、叶以及烟杈的甲醇粗提取物抗TMV活性筛选

1.供试材料

2试验方法

3 结果与分析

4小结

第三章 三种烤烟根部不同极性溶液提取物抗TMV活性筛选

1. 供试材料

2试验方法

3结果与分析

4小结

第四章K326根部化学成分研究以及活性检测

1. K326根部的提取与分离

2.各段抗(TMV)的活性检测

3化合物结构鉴定

4化合物的结构解析

5 化合物的理化常数和波普数据

第五章结语与创新

参考文献

已发表论文

附录

致谢