电针敏化穴位对炎症性肠病模型小鼠肠道腺苷受体表达的影响

摘要

目的：观察电针后炎症性肠病(Inflammatory Bowel Diseases,IBD）模型小鼠单位时间排便次数、小肠推进率以及结肠长度和不同腺苷受体在结肠组织表达的水平，评估电针敏化穴位对炎症性肠病模型小鼠肠运动的影响、探讨其中可能存在的机制，为电针临床治疗炎症性肠病提供理论依据。 方法：选用SPF级雄性C57小鼠48只，随机分为四组，空白组、模型组、电针敏化穴位组和电针非敏化穴位组，每组12只。通过TNBS（2,4,6三硝基苯磺酸）-乙醇法建立炎症性肠病模型，电针敏化穴位组、电针非敏化穴位组分别予以电针双侧大肠俞（敏化穴位）、双侧心俞（非敏化穴位）处理。电针治疗时间30分钟，连续处理7天。空白组、模型组不予电针处理。观察造模后IBD模型小鼠疾病活动指数、单位时间排便次数，测算小肠推进率以及结肠长度的变化，并使用免疫印迹法（Western blot,WB）检测IBD模型小鼠结肠组织内腺苷A1、A3受体的表达。 结果： 1.造模后实验动物的一般情况:造模后小鼠除空白组外体重均有不同程度下降、懒动、皮毛松耸等改变。 2.DAI评分比较：造模前，四组DAI评分没有差异，具有可比性（P>0.05）。与空白组比较，模型组、电针非敏化穴位组在造模后第1、4、7天DAI评分均显著增加（*P＜0.05）、电针敏化穴位组在造模后第1、4天DAI评分均显著增加（*P＜0.05），在造模后第7天DAI评分与空白组比较，无显著性差异（P>0.05）。与模型组比较，电针敏化穴位组在造模后第7天DAI评分、差异具有统计学意义（#P＜0.05），而电针非敏化穴位组无显著性差异（P>0.05）。 3.单位时间排便次数比较：造模前，四组排便次数没有差异，具有可比性（P>0.05）。与空白组比较，模型组造模后第1、4、7天排便次数均显著增加（*P＜0.05）；电针敏化组造模后的排便次数只有第1天显著增加（*P＜0.05）；而电针非敏化组在造模后第1天、第4天均显著增加（*P＜0.05）。与模型组比较，电针敏化组在造模后第4天、第7天均有显著性差异（#P＜0.05）；电针非敏化组在第7天才有显著性差异（#P＜0.05）。与电针敏化穴位组相比，电针非敏化穴位组在第4天有显著性差异（△P＜0.05），在第7天无显著性差异（P>0.05）； 4.小肠推进率比较：与空白组比较，模型组、电针非敏化穴位组的小肠推进率差异具有统计学意义（*P＜0.05）；与模型组比较，电针敏化穴位组的小肠推进率差异具有统计学意义（#P＜0.05）；电针非敏化穴位组与电针敏化穴位组比较，无显著性差异（P>0.05）。 5.结肠长度比较：与空白组比较，模型组、电针非敏化穴位组的结肠长度差异具有统计学意义（*P＜0.05）；与模型组比较，电针敏化穴位组的结肠长度差异具有统计学意义（#P＜0.05）；电针非敏化穴位组与电针敏化穴位组比较，无显著性差异（P>0.05）。 6.腺苷A1、A3受体在结肠内的表达：图5结果显示，治疗结束后，与正常组比较，电针敏化穴位组A1R的表达差异具有统计学意义（*P＜0.05）；与模型组比较，电针敏化穴位组A1R结果具有统计学意义（#P＜0.05）；电针敏化穴位组结肠内A1R对比电针非敏化穴位组，差异具有统计学意义（+P＜0.05）。图6结果显示，治疗结束后，与正常组比较，电针敏化穴位组A3R的表达差异具有统计学意义（*P＜0.05）；与模型组比较，电针敏化穴位组、电针非敏化穴位组A3R结果具有统计学意义（#P＜0.05）；与电针敏化穴位组相比，模型组与电针非敏化穴位组A3R的蛋白表达差异具有统计学意义（+P＜0.05）。 结论： 1.通过TNBS（2,4,6三硝基苯磺酸）-乙醇法可以有效复制炎症性肠病模型肠运动症状； 2.电针可以通过改善炎症性肠病模型小鼠肠运动，治疗IBD模型小鼠胃肠功能亢进的症状，且电针敏化穴位对比电针非敏化穴位疗效更加显著; 3.电针敏化穴位可能是通过增加结肠内A1R、A3R受体的含量，从而抑制IBD模型肠肌运动，从而改善IBD模型小鼠肠运动亢进的症状; 4.电针敏化穴位对IBD模型小鼠肠运动紊乱的疗效优于电非敏化穴位,电针治疗IBD安全有效，对于IBD模型小鼠的肠运动功能紊乱有良好的改善作用，值得临床借鉴参考。

目录

声明

英文缩略词语表

前言

1 实验材料

1.1 实验动物

1.2 主要仪器设备及厂家

1.3 药品与试剂

1.4主要试剂配制

2 实验方法

2.1 炎症性肠病小鼠模型

2.2 电针选穴及针刺方法

2.3 检测指标

2.4 小鼠结肠A1R、A3R的测定

2.5 统计方法

3 研究结果

3.1 造模后实验动物的一般情况

3.2 电针敏化穴位对小鼠疾病活动指数的影响

3.3 电针对小鼠单位时间排便次数的影响[15]，

3.4 电针7d后各组小鼠小肠推进率的比较[16]

3.5 电针敏化穴位7d后各组小鼠结肠长度的比较

3.6 腺苷A1、A3受体在结肠内的表达

讨论

1实验研究方案的选择依据

2本研究的结果分析

3本实验研究存在的不足与展望

结语

参考文献

附录

附录1 综述：炎症性肠病的中西医治疗近况

附录2 伊文氏蓝在大鼠背部的“敏化”点

附录3 大鼠的骨骼及穴位图

致谢