顶空固相微萃取技术应用于厚朴气相色谱指纹图谱及挥发性成分的研究

摘要

厚朴是我国的传统中药，为木兰科植物厚朴Magnolia officinalisRehd.et Wils，或凹叶厚朴Magnolia officinalisRehd.etWils.var.bilobaRehd.etwils的干燥干皮、根皮及枝皮。厚朴有燥湿消痰，下气除满的作用。用于湿滞伤中，痞脘吐泻，食积气滞，腹胀便秘，痰饮咳喘。 厚朴为国家二级珍稀濒危保护植物和保护野生中药材。调查发现厚朴野生资源几近灭绝，因此，加强对厚朴这一传统珍贵中药材的保护，加强对道地优质厚朴的品质研究，建立道地药材的指纹图谱显得尤为重要。 本文通过对厚朴的生产基地湖北施和神农架的实地考察，采集厚朴干皮和枝皮标本，并结合近年来的厚朴的研究进展，对湖北施和神农架产厚朴的干皮和枝皮有效成分及挥发性成分进行了研究。 首先采用甲醇超声提取—高效液相色谱法(USE—HPLC)测量11种不同来源或不同用药部位的厚朴药材的主要有效成分(厚朴酚与和厚朴酚)的含量。结果表明，湖北施和神农架产的厚朴药材质量最好，与湖北施道地药材紫油厚朴为优质厚朴药材品种相吻合。 其次通过比较3种不同萃取头即85μm聚丙烯酸酯(PA)萃取头、65μm聚二甲基硅烷—二乙烯基苯(PDMS/DVB)萃取头、100μm聚二甲基硅烷(PDMS)萃取头在试验中的差异，优化了厚朴的顶空固相微萃取的萃取条件，为HS—SPME应用于厚朴的研究打下了良好的基础。 结合中药色谱指纹图谱相似度评价系统对11批厚朴药材进行研究，以施厚朴干皮为对照药材，建立了指纹图谱的共有模式，标定了25个共有峰，首次建立了厚朴的顶空—固相微萃取—气相色谱(HS—SPME—GC)指纹图谱，方法所需样品量小、简便、准确、快速、重现性好，为系统的科学评价及鉴定厚朴的质量提供了一种更好的手段。通过相似度计算，结果符合指纹图谱的要求，说明HS—SPME—GC指纹图谱可用于厚朴药材的鉴定和质量控制。 最后，首次采用顶空固相微萃取—气相色谱法—质谱(HS—SPME—GC—MS)方法对厚朴挥发性成分进行研究。分别采用85μm聚丙烯酸酯(PA)、65μm聚二甲基硅烷—二乙烯基苯(PDMS/DVB)、100μm聚二甲基硅烷(PDMS)萃取头对施厚朴干皮和枝皮中的挥发性成分进行HS—SPME—GC—MS分析，共分离出148种化合物，为其资源品质的评价提供了科学依据。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一章 综述

1厚朴的研究概况

1.1厚朴的形态分类及资源状况

1.2药材鉴别

1.3厚朴化学成分的研究

1.4厚朴的药理作用

2固相微萃取技术的研究概况

2.1固相微萃取技术发展

2.2 SPME技术的影响因素

2.3 SPME技术的应用

3中药指纹图谱的概念和研究现状

3.1中药指纹图谱的概念

3.2 中药指纹图谱的研究现状

3.3指纹图谱的检测标准

3.4指纹图谱的技术参数

3.5气相色谱指纹图谱及应用现状

第二章 高效液相色谱法(HPLC)测定厚朴酚与和厚朴酚的含量

1仪器、试剂与对照品

2样品收集和预处理

3厚朴中厚朴酚与和厚朴酚含量同时测定

3.1色谱条件

3.2检测波长的选择

3.3系统适用性试验

3.4供试品溶液的制备

3.5对照品的制备

4测定方法

5结果与讨论

5.1结果

5.2讨论

第三章顶空固相微萃取萃取条件的优化

1仪器和试剂

2色谱条件

3萃取条件的优化

3.1样品量的优化

3.2萃取温度的优化

3.3萃取时间的优化

3.4解析时间的优化

3.5萃取头的优化

4结果与讨论

第四章厚朴指纹图谱的建立

1样品的收集及预处理

2水蒸气蒸馏提取法指纹图谱的建立

2.1仪器和试剂

2.2厚朴供试品的制备

2.3色谱条件

2.4测定方法

2.5方法学考察

2.6指纹图谱特征峰的标定

2.7共有特征峰的确定

2.8讨论

3顶空固相微萃取气相色谱指纹图谱的建立

3.1仪器和试剂

3.2色谱条件

3.3测定方法

3.4方法学考察

3.5厚朴药材指纹图谱共有模式的建立和结果

3.6指纹图谱特征峰的标定

3.7共有特征峰的确定

3.8 11种厚朴药材的相似度

3.9讨论

第五章顶空固相微萃取技术结合气质联用色谱对厚朴挥发性成分的研究

1仪器和设备

2色谱条件

3质谱条件

4测定方法

5结果与讨论

6结论

7结语语

参考文献

附图

致谢