应用UPLC-MS/MS研究林可霉素-庆大霉素注射剂在猪体内的残留

摘要

林可霉素-庆大霉素注射剂是自行研制的防治猪链球菌病的复方药物,其中林可霉素是林可胺类抗生素,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌具有很高的杀灭作用。日本肯定列表规定林可霉素在肉制品中的最高残留限量为0.2mg/kg。庆大霉素,又名吉他霉素,属于氨基糖苷类抗生素,对革兰阳性和阴性菌均有抗菌活性,日本肯定列表在可食性组织中的最高残留限量均为0.1mg/kg。
　　 为了保证该复方药物在猪场的规范使用,保护人类的身体健康以及畜牧业的健康发展,故应建立残留监控体系并确定其休药期。
　　 本实验建立了猪可食性组织(心脏、肝脏、肺脏、肾脏、肌肉和脂肪)中同时检查林可霉素和庆大霉素的超高效液相色谱-电喷雾串联质谱的测定方法。经2％三氯乙酸溶液提取,C18固相萃取柱净化。采用ACQUITYUPLCTMBEHC18(2.1mm×50mm.,1.7μm)色谱柱,10mM七氟丁酸水溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,超高效液相色谱分离,电喷雾质谱电离,正离子多反应监测模式进行定性和定量分析。2种药物分别在0.01～2mg/kg浓度范围内线性良好,相关系数R2均大于0.999;以高、中、低三个浓度水平进行添加回收率实验,样品的平均回收率在76％～89.4％之间,相对标准偏差为8.1％～11.4％,方法检出限(LOD)林可霉素和庆大霉素分别为0.005mg/kg、0.018mg/kg。
　　 分析复方林可霉素庆大霉素注射剂在猪可食性组织中的残留消除规律发现,32头断奶后40天猪,按0.35ml/kg体重肌肉注射给药后,于停止给药后的第4、10、20、30、40、50、60天屠宰,取肌肉、肝脏、肾脏、心脏和肺脏检测。第4天时药物浓度达到最高,依次是肾脏＞肝脏＞肺脏＞心脏＞肌肉,林可霉素和庆大霉素在肾脏中的含量分别为0.098mg/kg、490.000mg/kg,肝脏中的含量分别为0.030mg/kg、22.700mg/kg,肌肉中的浓度为0.006mg/kg、1.100mg/kg,心脏中的含量为0.008mg/kg、2.170mg/kg,肺脏中的含量为0.115mg/kg、7.200mg/kg。第60天,林可霉素和庆大霉素的残留量均低于中国和日本制定的最高残留限量。根据WT1.4软件数据处理后的计算,注射剂的休药期为76天。