声明
摘要
1前言
1．1研究的目的与意义
1．2番茄灰霉病的研究现状与进展
1．2．1灰霉病的危害与现状
1．2．2灰霉病的防治策略
1．2．3生防菌粉红粘帚霉的研究进展
1．3植物的抗病机制及诱导抗性研究进展
1．3．1植物的内生免疫抗病机制
1．3．2植物的获得性免疫诱导抗病机制
1．4植物对抗病原菌的信号传导
1．4．1 JA途径及相关信号的激活
1．4．2 ET途径及相关信号的激活
1．4．3 SA途径及相关信号的激活
1．4．4抗性转导通路中各路径的互作
1．4．5信号转导中的ROS及NO
1．4．6植物防御反应的启动
1．5研究内容与技术路线
1．5．1研究内容
1．5．2研究技术路线
2材料与方法
2．1试验材料
2．1．1试验菌株
2．1．2培养基
2．1．3试验植株
2．1．4主要试剂和仪器
2．2试验方法
2．2．1 C. rosea的复壮及鉴定
2．2．2 B. cinerea复壮及鉴定
2．2．3平板对峙试验
2．2．4孢子萌发}[pSzJ试验
2．2．5关键激素缺失时C. rosea抗灰霉病的广谱抗性试验
2．2．6台盼蓝染色
2．2．7不同处理下超微结构的透射电镜观测
2．2．8组织样本前处理
2．2．9总蛋白含量测定
2．2．10 PAL、PPO、CAT活性测定
2．2．12 RNA提取纯化
2．2．13反转录
2．2．14抗性相关基因引物设计
2．2．15实时荧光定量PCR
2．2．16扫描电镜样本前处理
2．2．17气孔变化测定分析
3结果与分析
3．1．1 C. rosea目标基因PCR及形态学鉴定
3．1．2 B. cinerea形态学确认及质谱鉴定
3．2 C. rosea与B. cinerea的体外拮抗分析
3．2．1平板对峙分析
3．2．2 C. rosea代谢产物对B. cinerea孢子萌发的抑制作用
3．3 JA、ET、SA、GA对不同处理下的广谱抗性的影响分析
3．3．1 JA对灰霉病广谱抗性的影响
3．3．2 ET对灰霉病广谱抗性的影响
3．3．3 SA和GA对灰霉病广谱抗性的影响
3．4不同处理下的植物病理分析
3．4．2 JA对C. rosea抗灰霉病叶片细胞及叶绿体超微结构的影响
3．5 C. rosea诱导抗性中激素与保护酶PAL、PPO、CAT调控关系
3．5．1 JA与保护酶系调控关系研究
3．5．2 ET与保护酶系调控关系研究
3．5．3 SA与保护酶系调控关系研究
3．5．4 GA与保护酶系调控关系研究
3．6 C. rosea诱导抗性中激素与第二信使H2O2、NO和O2-调控关系
3．6．1 JA与第二信使调控关系研究
3．6．2 ET与第二信使调控关系研究
3．6．3 SA与第二信使调控关系研究
3．6．4 GA与第二信使调控关系研究
3．7 JA与关键基因调控关系研究
3．7．1 JA与WRKY的调控关系研究
3．7．2 JA与MAPK的调控关系研究
3．7．3 JA与Lexyl2基因的调控关系研究
3．7．4 JA与atpA基因的调控关系研究
3．8不同处理下JA与气孔运动调控关系研究
4讨论
4．2．2 C. rosea诱导抗病的植物病理分析
4．3 C. rosea诱导抗性中关键激素与保护酶的调控机制探讨
4．3．1 JA、ET、SA与抗病信号转导
4．3．2 JA、ET、SA、GA与保护酶系的调控关系探讨
4．4 C. rosea诱导抗性中关键激素与第二信使调控机制探讨
4．4．1第二信使与抗病信号转导
4．4．2 JA、ET、SA、GA与第二信使的调控关系探讨
4．5 C. rosea诱导抗性中关键基因介导的JA通路分析
4．6不同处理下JA与气孔调控的关系
4．7本试验的创新点
4．8展望
5结论
致谢
参考文献
攻读博士学位期间发表的学术论文
