几种毛皮动物病毒性传染病病原核酸及血清抗体的检测

摘要

犬瘟热、细小病毒性肠炎是毛皮动物人工养殖中经常发生的两种最为重要的病毒性传染病,狐狸脑炎则是主要发生于狐的一种病毒性传染病.这三种传染病在中国人工养殖毛皮动物种群中的流行已有数十年,历史上几乎所有饲养毛皮动物的地区或养殖场都曾经发生过.三种传染病均发生发展快,一旦流行,将出现很高的发病率和死亡率.每年的大批发病和死亡,不但给毛皮动物养殖场(户)造成了严重的经济损失,而且严重地影响和制约着整个产业的快速发展.近些年来通过疫苗接种免疫,这几种传染病得到了比较好的预防和控制,但因各种原因,每年仍有暴发、流行的情况出现.为了做到有效地、充分地预防和控制传染病的发生,就要求在诊断上做到快速、特异、准确、简便,及时了解疫病的发生和流行趋势.该研究中,(1)从山东、黑龙江等地养殖规模在3千只以上的某些养殖场中,对已进行常规疫苗免疫接种毛皮动物群中进行采样;(2)对用于检测诊断的PCR方法进行了优化,同时对采集于疫苗免疫动物群的样品中犬瘟热病毒和狐狸脑炎病毒的核酸进行了特异性检测;(3)应用免疫酶测定方法检测分析了毛皮动物的犬瘟热病毒、狐狸脑炎病毒血清抗体效价,应用HA和HI试验检测分析大连、黑龙江等地养殖场的毛皮动物的细小病毒血清抗体效价.(4)进行保护性抗体水平分析,了解疫苗免疫保护效果,分析免疫失败原因;将近几年这几种传染病的流行情况与以往流行病史相结合,分析三种传染病的发生、发展、流行的原因和趋势.

目录

文摘

英文文摘

1.前言

1.1狐狸脑炎(CAV-1)病毒研究进展

1.1.1腺病毒Ⅰ型病原特性

1.1.2临床症状及病理变化

1.1.3诊断

1.1.4免疫

1.2犬瘟热病毒CDV研究进展

1.2.1犬瘟热病毒病原特性

1.2.2流行特征

1.2.3诊断

1.2.4免疫

1.3犬细小病毒病原特性的研究概况

1.3.1 CPV的血凝特性

1.3.2 CPV血凝活性的丧失

1.3.3抗原性变异

1.3.4 CPV与FPLV、MEV的亲缘关系

1.3.5血清学关系

1.3.6基因结构

1.3.7病原

1.3.8流行特征

1.3.9实验室检疫

1.4三种传染病的历史流行状况和现阶段流行状况

1.4.1 80年代的流行状况

1.4.2 90年代中后期流行状况

1.4.3现阶段三种传染病流行状况

1.5研究的目的和必要性

2.材料和方法

2.1试剂与仪器

2.2检测狐狸脑炎研究的材料和方法

2.2.1标准毒株来源

2.2.2尿液样本的来源

2.2.3狐尿液总DNA抽提及扩增方案的优化过程

2.3检测犬瘟热病毒的材料和方法

2.3.1犬瘟热病毒标准毒株来源

2.3.2脏器样本来源

2.3.3组织总RNA的提取

2.3.4 RT-PCR

PCR

2.4利用玻片免疫酶测定法分析狐狸脑炎和犬瘟热疫苗免疫保护效果

2.4.1血清样本及检测玻片来源

2.4.2免疫酶技术

2.4.3免疫酶技术原理

2.4.4应用免疫酶测定法检测CDV和CAV-1抗体效价操作方法

2.5应用HA和HI试验检测貂细小病毒性肠炎抗体

2.5.1血凝试验

2.5.2血凝抑制试验

3.结果

3.1 CAV-1检测结果

3.2 CDV检测结果

3.2.1比较分析狐各脏器犬瘟热病毒分布

3.2.2各样本采集地狐貉CDV检测结果

3.3免疫酶测定法检测血清抗体效价结果

3.4 HI试验检测细小病毒抗体结果

4.分析与讨论

4.1 三种传染病保护性抗体水平分析

4.2用PCR方法检测CAV-1尿样的可行性分析

4.3用免疫酶测定法检测血清CAV-1抗体时产生背景染色非特异的原因

4.4毛皮动物犬瘟热在部分地区流行的主要原因

4.5免疫失败原因分析

5.结论

参考文献

附录1

致谢