西藏绵头雪兔子和大花红景天对果蝇肠道免疫功能的影响

摘要

肠道免疫是果蝇天然免疫系统的重要组成部分。为了研究绵头雪兔子提取物对果蝇肠道免疫功能的影响，用含或不含绵头雪兔子提取物的病原微生物、致炎离子和金属离子等处理果蝇，观察绵头雪兔子提取物对果蝇生存率、肠道上皮细胞死亡、黑色素瘤的产生和肠道形态学变化等的影响。实验结果表明，喂食绵头雪兔子提取物可以抵抗真菌Beauveria bassiana对肠道的感染，缓解SDS、NaCl和KAl(SO4)2诱发的炎症损伤，主要表现为提高果蝇的生存率、减少肠道上皮细胞的死亡和对肠道壁的保护作用等。这说明绵头雪兔子提取物对真菌感染和炎症损伤具有一定的抵御能力。
　　大花红景天作为一种传统的民族药物，具有多种生理作用，如抗氧化活性、抗高原疾病、神经保护作用等。为了研究大花红景天提取物对果蝇肠道免疫功能的影响，将在标准玉米粉-酵母培养基中培养的果蝇作为对照组，在标准培养基中添加了2.5％大花红景天提取物的培养基中培养的果蝇作为实验组，观察大花红景天提取物对病原微生物和有毒化学物质处理后果蝇生存率的影响;二氢乙啶（dihydroethidium，DHE）染色检测肠道上皮细胞中活性氧的水平;7-氨基放线菌素（7-amino-actinomycin D，7-AAD）染色观察肠道上皮细胞的死亡情况;RT-PCR检测肠道内抗菌肽的表达量;显微镜观察肠道形态变化情况。结果表明，大花红景天提取物可提高病原微生物和有毒化学物质处理后果蝇的生存率，降低肠道上皮细胞的死亡和肠道上皮细胞内活性氧(reactive oxygenspecies，ROS)含量，提高果蝇肠道内抗菌肽的表达量，保护和维持肠道的基本形态。此外，西藏产大花红景天药理作用比四川产地的效果更佳。这表明，西藏产大花红景天提取物可提高果蝇的肠道免疫功能。

目录

摘要

1 绪论

1．1 果蝇作为模式生物的优势

1．2 果蝇的肠道免疫功能

1．2．1 IMD信号通路

1．2．2 DUOX通路

1．3 雪兔子

1．3．1 雪兔子亚属概况

1．3．2 雪兔子的化学成分

1．3．3 雪兔子的药理作用

1．4 红景天

1．4．1 红景天的化学成分

1．4．2 红景天的药理作用

1．4．3 红景天的开发应用

1．5 本研究的目的和意义

2 材料和方法

2．1 实验材料

2．1．1 实验动物与菌种

2．1．2 实验药材

2．1．3 实验试剂

2．1．4 实验仪器

2．2 实验方法

2．2．1 绵头雪兔子和大花红景天提取液的制备

2．2．2 培养基的配制

2．2．3 试剂的配制

2．2．4 菌液的配制

2．2．5 HPLC分析

2．2．6 果蝇生存率的统计

2．2．7 果蝇肠道7-AAD染色观察

2．2．8 果蝇肠道DHE染色观察

2．2．9 果蝇肠道形态变化观察

2．2．10 果蝇肠道抗菌肽基因表达量分析

3 结果与分析

3．1 绵头雪兔子对果蝇肠道免疫功能的影响

3．1．1 绵头雪兔子对果蝇生存率的影响

3．1．2 绵头雪兔子对果蝇肠道上皮细胞的影响

3．1．3 绵头雪兔子对果蝇肠道形态变化的影响

3．2 大花红景天对果蝇肠道免疫功能的影响

3．2．1 红景天苷HPLC分析

3．2．2 大花红景天对果蝇生存率的影响

3．2．3 大花红景天对果蝇肠道上皮细胞的影响

3．2．4 大花红景天对果蝇肠道上皮细胞内ROS水平的影响

3．2．5 大花红景天对果蝇肠道形态变化的影响

3．2．6 大花红景天对果蝇肠道抗菌肽基因表达量的影响

4 讨论

4．1 绵头雪兔子对果蝇肠道免疫功能的影响

4．2 大花红景天对果蝇肠道免疫功能的影响

结论

参考文献

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

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