珍稀濒危植物钻天柳的种子萌发和组织培养特性研究

摘要

钻天柳(Chosenia arbutifolia(Pall.)A.Skv)作为国家Ⅱ级珍稀濒危保护植物，其种群天然更新目前已受到严重干扰，由于该树种主要依靠实生苗进行繁殖，因此需加强对其种子萌发特性的研究，为其物种扩大繁殖提供基础。本研究对钻天柳种子萌发特性作了简要分析，通过试验研究了储存时间、三种环境因子（光照、温度和水分）对钻天柳种子萌发的影响，最终根据种子萌发率和初始萌发时间得出了最适宜其种子萌发的各项条件，储存时间:4℃下保存3周;光照:70％光照强度;温度:25℃温度;水分:水淹2mm。
　　为建立更有效的钻天柳组培繁育技术，进而为该树种的迁地保护提供理论依据，本研究首次以温室内扦插成活健康苗为试验材料，选取其带腋芽茎段作为外植体，对最佳的消毒方法、诱导培养基和分化培养基进行优化筛选。材料消毒方法采用L9(32)正交试验设计，2因素（70％酒精和0.1％氯化汞），3水平（两种消毒剂的处理时间），研究不同消毒方式对钻天柳茎段腋芽诱导的影响，通过比较各处理的褐化率、污染率和萌发率，确定最佳消毒组合。研究结果表明，钻天柳腋芽的最佳消毒灭菌组合:70％酒精10s+0.1％的氯化汞8min，此时污染率最低，萌发率最高，且污染开始时间最晚。极差分析结果得出:酒精是诱导钻天柳腋芽萌发的主要因素，氯化汞则是影响外植体消毒效果的主要因素。
　　采用5种基本培养基(WPM、DCR、MS、N-68、ACM)对钻天柳茎段腋芽进行诱导，通过比较腋芽萌发率及其生长状况，确定最佳诱导培养基。研究结果表明，在WPM培养基中钻天柳茎段腋芽诱导效果最好:萌发率最高，腋芽生长状况最好，叶片伸展、颜色深绿、嫩茎粗壮。茎段腋芽诱导结束后，以4种基本培养基(WPM、MS、ACM、DCR)、3种激素(IBA、6-BA、GA3)为因素和4个浓度水平，采用L16(44)正交试验设计对钻天柳腋芽进行分化培养，结果表明:适合其腋芽分化的最优培养基组合为DCR+6-BA0.30 mg/L+IBA0.30mg/L+ GA30.50mg/L与DCR+6-BA0.40mg/L+IBA0.30mg/L+GA30.40mg/L两种，且基本培养基和GA3是影响腋芽分化的主要因素，IBA和6-BA为次要因素。腋芽分化培养后，继续进行不定芽的增殖培养，得出适合钻天柳不定芽增殖的最佳培养组合为DCR+6-BA0.30mg/L+IBA0.30mg/L+GA30.50mg/L，此时不定芽增殖系数最高，当继代周期35d时，增殖系数达到最高，且此时芽苗生长状况最好。
　　本研究对钻天柳种子萌发特性和组培快繁技术进行了探索，为高效保存和扩繁钻天柳种质资源奠定了基础，也为其它濒危植物的保护生物学研究提供了资料。

目录

摘要

1 绪论

1．1 濒危植物迁地保护现状

1．1．1 树种的天然更新

1．2 种子萌发

1．2．1 环境对钻天柳种子萌发的影响

1．3 钻天柳研究现状

1．4 组织培养研究现状

1．5 本研究的目的、意义和内容

2 钻天柳的种子萌发特性

2．1 研究地概况

2．2 种子形态测定

2．3 种子千粒重测定

2．4 种子萌发测定

2．4．1 储藏日期

2．4．2 光照

2．4．3 温度

2．4．4 水分

2．5 数据记录与统计

2．6 实验结果与分析

2．6．1 种子形态特征

2．6．2 种子千粒重

2．6．3 储藏日期对钻天柳种子萌发率及初始萌发时间的影响

2．6．4 光照强度对钻天柳种子萌发率及初始萌发时间的影响

2．6．5 温度对钻天柳种子萌发率及初始萌发时间的影响

2．6．6 水分对钻天柳种子萌发率及初始萌发时问的影响

2．7 本章小结

3 钻天柳茎段腋芽诱导消毒方法与培养基的筛选

3．1 实验材料及预处理

3．2 实验方法和培养条件

3．2．1 消毒方法的筛选

3．2．2 基本培养基对钻天柳茎段芽诱导的影响

3．3 指标计算与数据统计分析

3．4 结果分析

3．4．1 不同消毒灭菌方法对钻天柳茎段腋芽诱导的影响

3．4．2 不同培养基种类对钻天柳茎段腋芽萌发率的影响

3．4．3 不同培养基种类对钻天柳茎段腋芽生长状况的影响

3．5 本章小结

4 钻天柳茎段腋芽分化培养基的筛选

4．1 实验材料和方法

4．1．1 分化培养和不定芽的增殖培养

4．2 指标测定与数据分析处理

4．3 实验结果分析

4．3．1 不同基本培养基和激素浓度组合对钻天柳不定芽分化率的影响

4．3．2 不同基本培养基和激素的方差分析和多重比较

4．3．3 不同基本培养基和激素组合对钻天柳不定芽增殖系数的影响

4．3．4 不同继代周期对钻天柳不定芽增殖的影响

4．4 本章小结

讨论

结论

参考文献

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

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