VCAM-1、VLA-4及相关细胞因子在多发性骨髓瘤中的作用研究

摘要

多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)，是一种恶性肿瘤，其特点是:骨髓内的浆细胞会出现异常增生的情况，属于成熟B细胞肿瘤。到目前为止，治愈率仍旧较低。MM患者会出现单克隆浆细胞的增生，同时还会产生单克隆免疫球蛋白，而骨髓中过度增生的单克隆浆细胞侵犯骨髓，又会引起如:贫血、高钙血症、骨痛或骨折、肾功能不全等症状。近年来的一些研究表明，多发性骨髓瘤的发生可能是与某些癌基因的激活，某些细胞因子的升高，以及黏附分子的异常表达相互关联。
　　目的:
　　本实验通过流式细胞术、酶联免疫吸附试验两种方法，检测多发性骨髓瘤患者与正常人骨髓、外周血中的黏附分子VCAM-1(CD106)、VLA-4(CD49d)，以及相关细胞因子的表达水平，分析其表达差异及相关性;并进一步探讨其在多发性骨髓瘤的ISS不同分期中表达的差异及相关性，旨在深入研究多发性骨髓瘤的发病机制，从而为多发性骨髓瘤的诊断与治疗提供有力的实验数据支持。
　　方法:
　　1、流式细胞术(flow cytometry，FCM)
　　研究对象主要来源于2013年10月-2017年4月到郑州市中心医院就诊的多发性骨髓瘤患者37例，均经临床诊断为多发性骨髓瘤，且符合国际卫生组织(WHO)诊断多发性骨髓瘤的标准（2001年）。并在郑州市中心医院找出21例非血液病患者作为正常对照组，分别取骨髓标本。用流式细胞仪检测实验组与对照组VCAM-1(CD106)、VLA-4(CD49d)、CD38以及CD138抗原的表达情况，分析不同抗原在多发性骨髓瘤ISS不同分期中的的表达特点，进一步分析其相关性及临床意义。
　　2、运用酶联免疫吸附试验(ELISA)
　　ELISA法研究对象来源于流式细胞术实验组（37例多发性骨髓瘤患者），为同一批患者，正常对照组来源于到郑州市中心医院健康体检的20例成人，分别取血清标本。用ELISA法检测实验组与对照组血清中VCAM-1、IL-2、IL-6、TNF-α的浓度水平，分析其在多发性骨髓瘤ISS不同分期中的的表达特点，进一步分析其相关性及临床意义。
　　结果:
　　1、流式细胞术
　　CD38、CD138、VLA-4三种抗原在实验组与对照组中的阳性率无显著统计学差异（P＞0.05）;VACM-1抗原，实验组与对照组的阳性率比较，有显著的统计学差异（P＜0.05）。
　　CD38、CD138、VLA-4三种抗原在实验组与对照组中的抗原表达率无显著统计学差异(P＞0.05);VACM-1抗原，实验组与对照组的抗原表达率比较,有显著统计学差异(P＜0.01)。
　　CD38、CD138两种抗原，初诊组，缓解组，未缓解组之间两两比较，均无显著统计学差异（P＞0.05）。VLA-4抗原与VCAM-1抗原，初诊组与缓解组比较，缓解组与未缓解组比较，均有显著统计学差异（P＜0.05），而初诊组与未缓解组比较，无显著统计学差异(P＞0.05)。
　　CD38、CD138两种抗原，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期，三组之间两两比较，无显著统计学差异（P＞0.05）。VLA-4抗原与VACM-1抗原，Ⅰ期与Ⅱ期比较，Ⅰ期与Ⅲ期比较，均有显著统计学差异（P＜0.05），而Ⅱ期与Ⅲ期比较，无显著差异（P＞0.05）。
　　2、酶联免疫吸附试验(ELISA)
　　实验组血清VCAM-1的浓度明显高于正常对照组，有显著的统计学差异（P＜0.01）。VCAM-1在实验组ISS不同分期中的浓度比较，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期三组之间两两比较，均有显著的统计学差异(P＜0.01)。
　　实验组血清IL-2的浓度与正常对照组相比较，无显著统计学差异(P＞0.05)。血清IL-2在实验组ISS不同分期中的浓度比较，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期三组之间两两比较，均无显著的统计学差异(P＞0.05)。
　　实验组血清IL-6的浓度明显高于正常对照组，有显著的统计学差异(P＜0.01)。血清IL-6在实验组ISS不同分期中的浓度比较，Ⅰ期与Ⅱ期相比较，有显著的统计学差异(P＜0.05);Ⅰ期与Ⅲ期相比，有显著的统计学差异(P＜0.01);Ⅱ期与Ⅲ期相比较，有显著的统计学差异（P＜0.05）。
　　实验组血清TNF-α的浓度明显高于正常对照组，有显著的统计学差异(P＜0.01)。TNF-α在实验组ISS不同分期中的浓度比较，Ⅰ期与Ⅱ期相比较，有显著的统计学差异（P＜0.05）;Ⅰ期与Ⅲ期相比，有显著的统计学差异（P＜0.01）;Ⅱ期与Ⅲ期相比较，有显著的统计学差异（P＜0.05）。
　　结论:
　　多发性骨髓瘤患者存在黏附分子VCAM-1、VLA-4和细胞因子IL-6、TNF-α的表达异常，且与ISS分期有关。研究这些黏附分子和细胞因子在多发性骨髓瘤患者体内的表达对于阐明多发性骨髓瘤的发病机制，指导临床诊断和治疗具有重要的意义。

目录

声明

摘要

中英文缩略词对照表

1 前言

2 研究材料与方法

2．1 研究对象

2．2 多发性骨髓瘤的诊断标准及分期标准

2．3 所用仪器设备以及试剂耗材

2．4 实验方法

3 实验结果

3．1 流式细胞术实验结果

3．2 酶联免疫吸附试验结果

4 讨论

5 结论

参考文献

综述 黏附分子及相关细胞因子与多发性骨髓瘤的研究进展

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致谢