咪唑类物质KK-42对日本沼虾表皮结构的影响

摘要

日本沼虾（Macrobrachiumnipponense）是我国重要的淡水养殖经济虾类。我们实验室首次研究发现用咪唑类物质KK-42处理日本沼虾的幼虾，可以显著促进其生长，缩短蜕皮周期，但作用机制尚未弄清。新旧表皮的更替是蜕皮的重要事件，本文从组织学水平研究了幼虾头胸甲和腹部表皮的外骨骼结构以及KK-42的影响;用紫外吸收法，定量分析了日本沼虾体内参与蜕皮的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)在KK-42处理后不同时间的活力。
　　将体长为3.5-5.0cm的日本沼虾随机分为2组，即处理组和对照组。处理组用1.95×10-4mol/L的KK-42溶液浸泡处理1min，对照组用不含有KK-42的溶液处理，常规饲养。选取处于蜕皮前晚期(D3)的虾于处理后1、3、5、7、9d做头胸甲和腹部外骨骼的组织学观察，测量外骨骼各层的厚度;选取处于蜕皮前期(D0-4)的日本沼虾，取其肝胰腺测定NAGase在处理后0、6、12、24h的活力;选取处于各个时期未经处理的日本沼虾做头胸甲的组织学观察，实验均设置3个重复。结果如下:
　　日本沼虾表皮自外而内分为两层，即外骨骼和上皮细胞层。蜕皮间期日本沼虾头胸甲外骨骼自外而内分为3层:上表皮、外表皮和内表皮。PAS和苏木精染色显示:上表皮最薄，约占外骨骼厚度的1/9-1/10，为红色匀质结构;外表皮较厚，约占整个外骨骼厚度的2/5-1/2，为紫红色的层状结构;内表皮最厚，约占整个外骨骼厚度的1/2-3/5，为粉红色的疏松结构。并且上表皮和外表皮在蜕皮前期形成，内表皮在蜕皮后形成。日本沼虾上皮细胞的高度在蜕皮周期也是不断变化的:蜕皮间期的细胞高度最低;蜕皮前期细胞高度最高，尤其是D2期细胞达最高;而在蜕皮后期的A和B期，高度次之。
　　KK-42处理后第1天，头胸甲外表皮厚度与对照组相比显著增长，提高了42.83％(P＜0.05);第3天和第9天，头胸甲内表皮的厚度比对照组提高了70.72％(P＜0.01)、77.27％(P＜0.01)，同时，整个头胸甲的厚度比对照组增加了38.69％(P＜0.01)、52.23％(P＜0.01)。腹部外骨骼的厚度变化不是很明显:处理后第1天，其外表皮厚度比对照组增加了21.26％(P＜0.05);在第9天，其总厚度比对照组提高了14.59％(P＜0.05)。KK-42处理后第3天，上皮细胞的高度比对照组提高了31.69％(P＜0.05)。
　　对照组肝胰腺NAGase活性呈波动性变化，其活力在6、12、24h与0h相比明显降低。KK-42处理后6、12和24h，NAGase活力显著增高，分别比相应的对照组提高了48.33％(P＜0.01)、53.78％(P＜0.01)、90.28％(P＜0.01)。
　　结论:KK-42对日本沼虾的头胸甲和腹部表皮的厚度有显著的促进作用，尤其是头胸甲的内表皮厚度;并显著提高肝胰腺NAGase活力。

目录

摘要

缩略语

1 前言

1．1 甲壳动物外骨骼结构及其在蜕皮周期中的变化

1．1．1 外骨骼的结构

1．1．2 外骨骼的化学组成

1．1．3 蜕皮周期中外骨骼结构和成分的变化

1．2 几丁质酶系的研究概况

1．2．1 几丁质与几丁质酶系简介

1．2．2 甲壳动物NAGase的研究现状

1．3 本研究的目的和意义

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．1．1 实验动物

2．1．2 主要试剂

2．1．3 主要仪器

2．2 实验方法

2．2．1 日本沼虾外骨骼组织形态的观察

2．2．2 酶活力的测定和比活力的计算

3 结果

3．1 日本沼虾在蜕皮周期A、B、C、D时期表皮的组织学观察

3．1．1 蜕皮间期头胸甲的结构

3．1．2 蜕皮周期中头胸甲外骨骼结构的变化

3．2 KK-42对D3期日本沼虾头胸甲结构的影响

3．2．1 KK-42对头胸甲外表皮厚度的影响

3．2．2 KK-42对头胸甲内表皮厚度的影响

3．2．3 KK-42对头胸甲总厚度的影响

3．3 KK-42对D3期日本沼虾腹部外骨骼结构的影响

3．3．1 KK-42对腹部外骨骼外表皮厚度的影响

3．3．2 KK-42对腹部外骨骼内表皮厚度的影响

3．3．3 KK-42对腹部外骨骼总厚度的影响

3．4 KK-42对D3期日本沼虾上皮细胞结构的影响

3．5 KK-42对日本沼虾肝胰腺NAGase活力的影响

4 讨论

5 结论

6 创新性

参考文献

附录1

附录2

致谢

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