A2B腺苷受体在哮喘小鼠气道炎症及气道重塑中的作用

摘要

目的：哮喘是一种气道慢性炎症性疾病，以持续的气道炎症和肺脏微细结构改变为特征，最终导致气道功能下降，其发病机制十分复杂，目前多数专家认为是由于多种炎症细胞聚集在气道黏膜表面，释放多种可溶性的炎症介质及细胞因子，引起黏膜充血、水肿，黏液分泌亢进，诱发气道高反应性，导致气道平滑肌痉挛；炎症持续存在，导致气道结构发生改变，即气道重塑，是造成哮喘反复发作、迁延不愈的主要原因。目前研究发现腺苷在支气管哮喘等气道炎症性疾病中水平增高，对支气管痉挛和收缩起着重要的作用，腺苷是一种嘌呤核苷，由ATP在ATP激酶和核苷酸酶的作用下降解去磷酸化而产生，在缺氧缺血或内毒素血症时产生增加，产生后腺苷作为一种强大的细胞内信号传导分子，通过特定的细胞膜G蛋白与相应受体偶联，产生多种效应，在慢性肺脏疾病哮喘，腺苷在前炎症因子及组织破坏方面发挥其作用，哮喘时气道重塑的机制还不完全明了，但是越来越多的证据显示体内腺苷水平增加与气道重塑有关。目前证实有四种腺苷受体，它们与腺苷的亲和力各不相同，分别为A1、A2A、A2B和A3腺苷受体,这些受体在体内广泛分布，通过多种信号途径产生多种效应，许多研究提示A2B腺苷受体在哮喘发生发展中的作用尤为重要，本研究旨在探讨A2B腺苷受体在实验性哮喘小鼠气道炎症及气道重塑中的作用，以进一步探讨支气管哮喘的发病机制。 方法：选取清洁级健康雄性BALB/C小鼠30只，鼠龄6周，适应性饲养7天后，按随机分成3组：正常对照组10只、哮喘模型组10只、氨茶碱治疗组10只。正常对照组小鼠分别于第1天，第13天，第19天腹腔注射生理盐水0.8ml和氢氧化铝干粉15mg混合液，第20天起置于5L密闭容器中，以生理盐水溶液超声雾化，每次40分钟，每天1次，连续雾化25天，每天雾化前腹腔注射生理盐水0.8ml。哮喘组及氨茶碱组动物处理：小鼠分别于第1天，第13天，第19天腹腔注射0.8ml致敏液(含OVA20μg，氢氧化铝干粉15mg)，第20天起置于5L密闭容器中，以1％OVA溶液超声雾化激发，每次40分钟，每天1次，连续雾化25天，哮喘组每天第一次雾化前腹腔注射生理盐水0.8ml，氨茶碱组每天第一次雾化前腹腔注射安茶碱0.8ml(含氨茶碱20μg/kg)。各组小鼠分别于最后一次雾化后24小时眼球放血处死，取出双侧肺组织，采用HE染色、免疫组织化学法结合计算机病理图象分析系统测定各组支气管壁厚度和气道平滑肌厚度，以及肺组织表达A2B腺苷受体的阳性面积光密度值和灰度值，并采用双抗体夹心ELISA法测定血清中IL-8的水平，通过观察哮喘小鼠气道重塑相关数值、血清中IL-8的水平及A2B腺苷受体表达的变化，以探讨A2B腺苷受体在哮喘小鼠气道炎症及气道重塑中的作用。所得数据均用SPSS11.5软件进行统计学处理，统计方法为单因素方差分析(one-wayANOVA)，最小显著差异法(LSD法)进行不同组别之间的两两比较，两变量间的相关分析采用线性相关分析(Bivariate过程)，以P＜0.05作为显著界限。 结论： 1.哮喘小鼠支气管管壁及平滑肌增厚，气道不同程度狭窄变形，肺间质大量炎症细胞浸润，血清IL-8水平明显增高，提示哮喘时多种炎症细胞在气道聚集，通过分泌释放多种炎症介质，参与哮喘时气道炎症及气道重塑的发生发展。 2.哮喘小鼠气道上皮细胞中A2B腺苷受体表达明显增多，且与血清中炎症介质IL-8的含量增加呈直线相关，表明哮喘时多种因素诱导A2B腺苷受体表达增加，通过促进IL-8释放，造成哮喘小鼠气道炎症、气道高反应性及气道重塑这些病理改变。 3.氨茶碱治疗后的哮喘小鼠，其气道上皮细胞中A2B腺苷受体表达较哮喘组小鼠明显减少，同时血清中炎症介质IL-8的含量也减少，表明腺苷受体拮抗剂氨茶碱可通过阻滞气道上皮细胞A2B腺苷受体的表达，减少炎症因子IL-8的释放，抑制气道炎症，抑制气道壁胶原沉积和平滑肌增生，减轻气道重塑，提示专一性的A2B腺苷受体拮抗剂有望成为新型的抗哮喘药物。

目录

摘要

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述A2B腺苷受体：哮喘治疗的新机制

致谢

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