大肠癌腹腔内游离癌细胞的联合检测及NF-κB、MMPs表达在大肠癌腹腔微转移中的意义

摘要

目的：本研究通过联合检测大肠癌患者腹腔游离癌细胞(Intraperitoneal free cancer cells，IFCCs)相关肿瘤标志物的表达，探讨大肠癌腹腔内微转移情况，为临床上诊断大肠癌腹腔微转移寻找敏感特异的方法，并分析大肠癌腹腔微转移与临床病理参数之间的关系。进一步探讨核转录因子vd3(Nuclear Factor kappa B，NF-kB)、金属基质蛋白酶(Matrixmetalloproteinase，MMPs)的表达在大肠癌腹腔微转移中的作用及意义。 方法：选取河北医科大学第四医院外二科2006年6-12月间手术治疗的大肠癌(包括结肠癌与腹膜返折以上的直肠癌)患者80例，另选10例妇产科子宫肌瘤手术病例做对照组。取腹腔冲洗液，行常规腹腔冲洗液细胞学检测(Peritoneallavage cyctology,PLC)和CEA、CK20的免疫细胞化学染色(Immunocytochemistry,ICC)，检测腹腔冲洗液游离癌细胞情况。并采用免疫组织化学方法(Immunohisto-chemicalteghuiques，IHC)检测肿瘤原发灶组织的NF-kB、MMP-9、MMP-10、MMP-11的蛋白表达，分析这些蛋白表达与腹腔微转移的关系。利用扫描电镜(Scanning electronmicroscopy,SEM)与透射电镜(Transmission electron micros-copN TEM)，观察MMP-9表达阳性且有腹腔微转移的大肠癌组织细胞的连接特点。 结果： 1、腹腔冲洗液细胞学检测癌细胞阳性率为8.7％(7/80)；CEA、CK20检测的阳性率分别为28％(23/80)和22％(18/80)，两者与PLC比较均有统计学差异(P<0.05)；CEA、CK20联合检测的阳性率为35％(28/80)，与PLC比较亦有统计学差异(P<0.05)，明显提高了检出率。与CEA、CK20单独检测无统计学差异，但联合检测可以降低漏检率。 2、大肠癌腹腔微转移率与患者性别、年龄、侵及肠腔周径大小以及有无肝转移无关(P>0.05)。肿瘤侵及浆膜与未侵及浆膜患者的腹腔微转移率分别为45.3％(24/53)和14.8％(4/27)，两者比较有统计学差异(P<0.05)。淋巴结转移患者的腹腔微转移率为51.2％(22/43)，无淋巴结转移组为16.2％(6/37)，两者比较亦有统计学差异(P<0.05)。低分化患者腹腔微转移率为71.4％(5/7)，中分化为32.7％(18/55)，高分化为16.7％(3/18)，两两比较均有统计学差异(P<0.05)。大体类型中隆起型患者腹腔微转移率15.4％(4/26)，溃疡型为35.6％(16/45)，浸润型为66.7％(6/9)，两两比较有统计学差异(P<0.05)。 3、大肠癌组织中NF-kB蛋白表达总阳性率为73.8％(59/80)。其中强阳性率为40％，弱阳性率为33.8％。NF-KB强阳性表达患者中的腹腔转移率为56.3％(18/32)，阴性表达与弱阳性表达中腹腔微转移率分别为19.0％(4/21)、22.2％(6/27)。强阳性组与后两组比较有统计学差异(P<0.05)，而后两组之间无统计学意义(P>0.05)。 4、大肠癌组织中MMP-9蛋白表达阳性率为82.5％(66/80)。其中强阳性50％，弱阳性32.5％。强阳性组中的腹腔微转移率为50.0％(20/40)，且占所有检出的微转移患者的71.4％ (20/28)。弱阳性组与阴性组分别为30.0％、14.3％。强阳性组与后两组比较有统计学差异(P<0.05)，而后两组之间无统计学意义(P>0.05)。 5、MMP-10、MMP-11在大肠癌组织中的表达率分别为35％(28/80)和42.5％(34/80)，两者表达与大肠癌腹腔微转移之间差异无统计学意义。 6、大肠癌组织中NF-κB、MMP-9的强表达的患者腹腔微转移率明显升高。NF-κB、MMP-9进行x<'2>线性趋势分析，总变异X<'2>=21.407，P<0.05线性回归分量X<'2>=16.940，P<0.05偏离线性回归分量无统计学意义。说明NF-κB与MMP-9之间不仅存在相关关系且为线性关系。 7、扫描电镜下，MMP-9表达阳性的腹腔微转移患者肿瘤组织中细胞成份多而细胞间质成分少，组织结构松散，可见到带有伪足的肿瘤细胞；透射电镜观察，细胞间连接仅以简单连接、接触连接为主，而缺乏连接最为牢固的桥粒连接。 结论： 1、联合检测CEA、CK20可以提高大肠癌腹腔微转移的检出率，是一种敏感特异的检测方法。 2、大肠癌腹腔微转移与肿瘤浆膜受侵、淋巴结转移、分化程度、大体类型等病理参数有关。 3、NF-κB可能通过上调MMP-9表达，降解细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)，从而影响细胞连接，导致癌细胞易于脱落至腹腔，形成微转移。NF-κB(B、MMP-9高表达对预测大肠癌腹腔微转移具有重要意义。 4、MMP-10、MMP-11蛋白与腹腔微转移无关。

目录

摘要

引言

第一部分大肠癌腹腔内游离癌细胞的检测及其与临床病理参数的关系

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

第二部分NF-κB、MMPs表达在大肠癌腹腔微转移中的意义

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

结论

综述：大肠癌腹腔游离癌细胞检测的研究进展

致谢

个人简历