无敌药酒与无敌丹胶囊质量控制方法研究

摘要

无敌药酒由黄芪、当归、熟地黄、赤芍、龙血竭、人参、川芎、肉苁蓉等39味药组成，收载于卫生部药品标准第19册，标准仅收载桂皮醛、川芎薄层鉴别和检查项，无含量测定项;无敌丹胶囊由黄芪、杜仲、肉苁蓉、川芎、龙血竭、三七等20味药组成，收载于卫生部药品标准第20册，标准仅收载性状、鉴别与检查项。无敌药酒与无敌丹胶囊，有气血双补、滋肝补肾、强筋健骨、止痛消肿、祛风除湿等功效，主要用于肝肾不足引起的骨性关节炎，急、慢性扭挫伤，老年体虚，腰酸腿痛等。目前关于无敌药酒与无敌丹胶囊质量控制方法的研究较少，因此建立对其的质量控制方法至关重要。龙血竭为无敌药酒和无敌丹胶囊中的主要药味，系百合科龙血树属植物剑叶龙血树Dracaena cochinchinensi s(Lour.)S.C.Chen的含脂木材经提取得到的树脂，有散瘀活血、敛疮生肌等功效。作为进口血竭的代用品，自20世纪90年代正式定名后应用广泛，自然资源日益匮乏，龙血树已被国家列入二级珍稀濒危保护植物。龙血竭中含有多种化学成分，如酚类，酯类，黄酮类，皂苷类等，其中二氢查耳酮类成分是其活血化瘀的主要有效成分，代表化合物为龙血素A、龙血素B。本研究建立了无敌药酒中黄芪、赤芍、人参的薄层鉴别方法和高效液相色谱法测定龙血竭中龙血素A、龙血素B的含量测定方法;建立了无敌丹胶囊中三七的薄层鉴别方法，龙血竭中龙血素A、龙血素B的高效液相色谱含量测定方法及龙血竭的特征图谱研究方法，并针对近年来市场上的三七掺伪现象特别是用三七茎叶替代三七投料情况，建立了考察胶囊中三七质量的超高效液相色谱-串联质谱研究方法，重点考察了三七中是否非法添加三七茎叶情况。为此两种中成药的质量控制提供了科学依据。
　　第一部分 无敌药酒质量控制方法研究
　　目的:建立无敌药酒的质量控制方法。
　　方法:薄层色谱法鉴别无敌药酒中的黄芪、赤芍、人参;高效液相色谱法测定龙血竭中龙血素A和龙血素B的含量，色谱柱为Boston GreenODS C18(4.6×250mm;5μm)，乙腈-0.1％磷酸溶液梯度洗脱，流速为1.0mL·min-1，检测波长为278 nm，柱温为30℃。
　　结果:薄层色谱鉴别，在与黄芪对照药材、黄芪甲苷对照品、赤芍对照药材、芍药苷对照品、人参对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。含量测定研究中，龙血素A在0.02168～2.1680μg范围内，线性关系良好，回归方程为Y=76.7149X+0.3893，R2=0.9999，龙血素B在0.01038～1.0380μg/mL范围内，线性关系良好，回归方程为Y=55.0714X+0.1357，R2=0.9998，方法重复性、精密度、稳定性、耐用性良好，回收率在99～101％，RSD＜2％。
　　结论:本研究中建立的方法专属性良好，能较好地控制本品的质量。
　　第二部分 无敌丹胶囊质量控制方法研究
　　目的:建立无敌丹胶囊的质量控制方法。
　　方法:薄层色谱法鉴别无敌丹胶囊中的三七;高效液相色谱法测定龙血竭中龙血素A和龙血素B的含量，色谱柱为Boston Green ODS C18(4.6×250mm;5μm)，乙腈-0.1％磷酸溶液等度洗脱，流速为1.0mL·min-1，检测波长为278nm，柱温为30℃。高效液相色谱法进行无敌丹胶囊特征图谱研究，色谱柱为Thermo AcclaimTM120 C18(4.6×250mm;5μm)，乙腈-0.1％磷酸溶液梯度洗脱，流速为1.0mL·min-1，检测波长为278 nm，柱温为40℃。超高效液相色谱-串联质谱法对三七中非法添加三七茎叶情况进行研究，色谱柱为Waters BEH C18（1.7μm，2.1×100 mm），乙腈-水梯度洗脱，流速为0.5mL·min-1，柱温为40℃;质谱条件离子源为电喷雾离子源（ESI源），监测模式为负离子多反应监测模式，脱溶剂气温度为500℃，毛细管电压:3.10kV，锥孔电压:60V。
　　结果:薄层色谱鉴别，在与三七皂苷R1对照品、三七对照药材相应的位置上，显相同颜色的斑点。龙血素A在2.17～216.80μg/mL范围内，线性关系良好，回归方程为Y=0.7671X+0.3893，R2=0.9999，龙血素B在1.04～103.80μg/mL范围内，线性关系良好，回归方程为Y=0.5507X+0.1357，R2=0.9998，方法重复性、精密度、稳定性、耐用性良好，回收率在98～101％，RSD＜2％。建立了无敌丹胶囊中龙血竭的特征图谱，共有8个特征峰，相似度在0.9以上。建立了三七中非法添加三七茎叶情况的UPLC-MS测定方法，经检测，无敌胶囊中三七未发现非法添加三七茎叶情况。
　　结论:本研究中建立的方法快捷高效，专属性良好，能较好地控制本品的质量。

目录

声明

摘要

英文缩写

引言

第一部分 无敌药酒质量控制方法研究

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

第二部分 无敌丹胶囊质量控制方法研究

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

结论

综述 龙血竭的研究进展

致谢

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