色钉菇多糖的单糖组分与东莨菪碱抗运动病效果的比较研究

摘要

人在乘坐车、船、飞机、航天器等交通运载工具时，经常会产生加速度刺激，当变速刺激强度和刺激时间达到一定程度，会出现眩晕、恶心、呕吐、面色苍白、冷汗等一系列植物性神经紊乱症状，即运动病。实验动物，如大鼠，在接受模拟器刺激时也会患运动病，出现自主活动减少、走路不稳、立毛、震颤、排尿排便增多等症状。运动病发生时除了表现出一系列行为症状，外周血液中相关激素的分泌和神经递质的释放也会相应出现变化。完整的前庭系统是运动病发生的必要条件。运动病发病率较高，约有20％～30％的人曾患严重运动病，约有90％的人都经历过不同程度的运动病。运动病对人们的日常生活影响较大，尤其对于乘船乘机作战的战士或是航天员来说，运动病大大削弱他们的战斗力及应变能力。所以找到有效的针对运动病的对策是医学、军事、航天的研究热点之一。目前最有效的治疗和预防运动病的方法是适应性训练和抗运动病药物。常用的抗运动病药物主要有抗胆碱药、抗组胺药、拟交感药、胃动力药等，但是这些药在使用后都可能会产生或多或少的副作用，不适宜长期服用。因此研制一种高效安全无毒副作用的抗运动病药物是军事、医学、航天事业急需解决的难题之一。本实验室以往的研究发现，色钉菇粗多糖和精多糖对接受旋转刺激的大鼠有非常显著的抗运动病效果，且优于国际公认的东莨菪碱，并未发现毒副作用，有开发成为抗运动病药物的前景。但是色钉菇多糖的提取工艺复杂，生产成本较高，不适宜大量生产。如果能找到色钉菇多糖中有效的抗运动病的单糖组分，那么会给色钉菇多糖用作抗运动病药物的生产带来极大便利。所以本篇论文的目的主要是确定色钉菇多糖的单糖组分，以及验证色钉菇多糖的单糖组分是否具有抗运动病效果。
　　本研究分为三个部分：第一部分，确定色钉菇多糖的单糖组分。通过气相色谱的方法对比标准单糖和色钉菇多糖水解后单糖的气相色谱图，确定组成色钉菇多糖的单糖组分种类及含量。第二部分，比较色钉菇多糖的单糖组分和东莨菪碱对于改善运动病大鼠行为的作用。实验设置5个组别，分别是空白对照组、实验对照组、色钉菇多糖组、单糖组分组和东莨菪碱组。其中空白对照组大鼠不接受旋转刺激，只是胃内给予10ml/kg的蒸馏水。实验对照组、色钉菇多糖组、单糖组分组和东莨菪碱组大鼠接受2h旋转刺激，并在旋转刺激前分别胃内给予蒸馏水(10 ml/kg)、色钉菇多糖(10 ml/kg溶液;剂量为200 mg/kg)、将分析所得的色钉菇多糖中的各种单糖按原有比例混合在一起的单糖组分（10 ml/kg溶液;各单糖组分的剂量分别为:阿拉伯糖1.50 mg/kg、甘露糖2.18 mg/kg、半乳糖7.32 mg/kg、葡萄糖53.34 mg/kg)和东莨菪碱(10 ml/kg溶液;剂量为1.00mg/kg)。旋转刺激参数见方法部分。检测方法为MS指数检测和旷场实验（旷场实验积分、修饰时间、修饰次数和停留时间）。第三部分，比较色钉菇多糖的单糖组分和东莨菪碱对于运动病大鼠血液中激素和神经递质的作用。实验分组及处理方法同第二部分实验。各组大鼠在旋转刺激结束后立即麻醉取血，静置，离心取血清。ELISA试剂盒检测血清中5-HT、乙酰胆碱、促肾上腺皮质激素和抗利尿激素的含量。所得实验数据用SPSS13.0进行单因素方差分析，P＜0.05为差异显著性标准。
　　本研究表明：⑴气相色谱实验结果表明色钉菇多糖的单糖组成为:阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖，这几种单糖在多糖中所占比例分别为0.75％、1.09％、26.67％和3.66％。⑵实验对照组大鼠在经过旋转刺激后，较空白对照组，出现自主活动减少、立毛、震颤、排尿排便增多等运动病行为症状。⑶色钉菇多糖组和东莨菪碱组大鼠的MS指数均极显著低于实验对照组(P＜0.01);单糖组分组大鼠MS指数较实验对照组无显著性差异(P＞0.05)。⑷色钉菇多糖组大鼠的旷场实验积分高于实验对照组;修饰时间显著低于实验对照组（P＜0.05）。单糖组分组大鼠的旷场实验积分与实验对照组无显著性差异(P＞0.05);修饰时间和修饰次数均显著低于实验对照组(P＜0.05)。东莨菪碱组大鼠的旷场实验积分高于实验对照组;修饰时间和停留时间与实验对照组无显著性差异(P＞0.05);修饰次数与空白对照组无显著性差异(P＞0.05)。⑸旋转刺激后实验对照组大鼠与空白对照组相比，血清中5-HT、乙酰胆碱、促肾上腺皮质激素和抗利尿激素的水平均有极显著上升（P＜0.01）。色钉菇多糖组与实验对照组相比，5-HT水平显著降低(P＜0.05);乙酰胆碱水平极显著降低（P＜0.01）。单糖组分组大鼠的5-HT、乙酰胆碱和促肾上腺皮质激素水平较实验对照组极显著升高(P＜0.01);抗利尿激素与实验对照组相比无显著性差异(P＞0.05)。东莨菪碱组大鼠的5-HT水平较实验对照组极显著降低(P＜0.01);乙酰胆碱水平较实验对照组极显著上升(P＜0.01);促肾上腺皮质激素和抗利尿激素水平较实验对照组无显著性差异(P＞0.05)。⑹色钉菇多糖中阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖的含量分别为0.75％、1.09％、26.67％和3.66％。⑺色钉菇多糖在改善运动病大鼠行为症状方面的效果优于东莨菪碱，东莨菪碱对于运动病大鼠存在一定程度的中枢抑制作用。色钉菇多糖的单糖组分对运动病大鼠的行为症状并无显著改善作用。⑻色钉菇多糖能够稳定运动病大鼠血清中5-HT和乙酰胆碱的水平;色钉菇多糖的单糖组分不能稳定运动病大鼠血清5-HT、乙酰胆碱、促肾上腺皮质激素和抗利尿激素的水平;东莨菪碱可以抑制运动病过程中血清5-HT水平的升高。

目录

声明

摘要

引言

1 综述运动病及其防治

1．1 诱发运动病的主要因素

1．2 运动病发生机制

1．2．1 感觉冲突理论

1．2．2 内分泌异常学说

1．2．3 耳石质量不对称学说

1．2．4 体液转移学说

1．3 运动病发生过程中相关体液因子的变化

1．3．1 5-HT

1．3．2 乙酰胆碱

1．3．3 去甲肾上腺素

1．3．4 抗利尿激素

1．3．5 促肾上腺皮质激素和皮质醇

1．4 运动病的预防和治疗

1．4．1 抗运动病药物

1．4．2 非药物措施

1．5 展望

2 实验一 色钉菇多糖的提取及其单糖组分分析

2．1 实验仪器与药品

2．1．1 主要实验仪器设备

2．1．2 主要药品与试剂

2．2 实验方法与步骤

2．2．1 色钉菇多糖的提取

2．2．2 色钉菇多糖的单糖组分分析

2．3 实验结果

3 实验二 色钉菇单糖组分与东莨菪碱抗运动病效果比较

3．1 实验动物与仪器

3．1．1 实验动物及分组

3．1．2 仪器和药品

3．2 实验方法与步骤

3．2．1 运动病模型的复制

3．2．2 行为学检测

3．3 实验结果

3．3．1 旷场实验结果

3．3．2 MS指数检测实验结果

4 实验三 色钉菇多糖的单糖组分对运动病大鼠血液中相关神经递质和激素水平的影响

4．1 实验动物与仪器

4．1．1 实验动物及分组

4．1．2 仪器和药品

4．2 实验方法和步骤

4．2．1 运动病模型的复制和采血

4．2．2 试剂盒检测

4．3 实验结果

4．3．1 5-HT测定结果

4．3．2 乙酰胆碱测定结果

4．3．3 促肾上腺皮质激素测定结果

4．3．4 抗利尿激素测定结果

5 讨论

5．1 色钉菇多糖的单糖组分对运动病大鼠行为的影响

5．2 色钉菇多糖的单糖组分对运动病大鼠体液因子的影响

结论

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间参加研究的课题