小麦种质贵农775抗条锈病基因标记的相关片段克隆及荧光原位杂交

摘要

小麦抗病种质贵农775是原贵州大学张庆勤教授利用远缘杂交育成的著名抗源材料，在抗病育种和生产上具有重要的应用价值。本研究利用分子标记和荧光原位杂交技术对其进行了研究，研究取得的主要结果如下： 1.将贵农775中与YrGA连锁的标记片段克隆并转为更稳定的SCAR标记，用SCAR标记同时验证条中32号小种接种鉴定的西农97148×贵农775杂交种F2代的群体，根据验证结果统计分析表明YrGA基因的遗传符合3R∶1S。估算这2个标记位点与相应的抗条锈病基因各自的遗传距离；RAPD引物S2018标记位点与抗条锈病基因YrGA之间的遗传距离为： 2.378±0.0064cM；SCAR引物SCARs2018RL-140标记位点与抗条锈病基因YrGA之间的遗传距离为：0.355±0.001cM；同时用SCARs2018R与SCARS2018L引物组合和Pm21C与Pm21D引物组合检测贵农775、簇毛麦和扬麦5号，结果表明Pm21C与Pm21D引物组合不能在贵农775中扩增出1.4kb特异带，而SCARs2018R与SCARS2018L引物组合同时能在贵农775、簇毛麦和扬麦5号中扩增出140bp的特异带；证明贵农775簇毛麦易位系不同于刘大钧等的研究结果。 2.用荧光原位杂交技术鉴定贵农775为簇毛麦的新的易位系，用特异引物S2018扩增探针作杂交进一步证明了与YrGA基因的连锁标记也是来自簇毛麦。在用荧光原位杂交时，针对性优化了荧光原位杂交过程中的一些参数，染色体制片中用了α-溴萘，2％的果胶酶和纤维素酶、杂交混合液中封阻DNA与探针的比例为50～100∶1，效果较理想。

目录

摘要

第一章 前言（文献综述）

第二章实验材料、方法与实验过程

第三章结果与分析

第四章结论与讨论

本研究的创新之处

致谢

参考文献

附录

原创性声明及关于学位论文使用授权的声明