长期服用赤丸方水煎液对大鼠肾脏功能和肾脏组织形态学的慢性影响

摘要

目的:本实验是以《金匮要略·腹满寒疝宿食病脉证第十》中的赤丸方为基础、参考现代药理研究结论、结合导师临床体会、从动物实验入手,观察、研究赤丸方中的药物,在经过60min的煎煮减毒处理后,是否仍会对Wister大鼠的肾脏产生慢性毒性以及其慢性毒性的程度;采集可靠的实验依据、提供可靠的实验结果,为临床选方用药提供参考,并为进一步揭示其肾脏毒性机制、避免其肾脏毒性反应打下基础。
　　方法:清洁级纯系Wister大鼠80只,体重200±10克,雌雄各半,分别用随机区组法分为4组(空白对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组),每组20只,雌雄各半;给各组大鼠称量体重并对体重值做统计学处理,在统计学结果显示各组大鼠体重的差值无统计学意义后,将各组大鼠按各自组别适应性喂养一周;适应性喂养结束后再次称量大鼠体重、计算各组大鼠一周的体重变化值,并分别作统计学处理;在统计结果仍无显著性差异的情况下,用剪尾采血法剪尾,采集各组大鼠的血液送检其血液一般情况。于第二周开始,依据给药标准、根据大鼠体重、按照赤丸方中各药的比例称取各药物;以水为溶剂、按照重浸提法的要求提取所称量药物的成份,用700W的额定功率对浸渍液进行60min的煮沸减毒处理[事先测定该加热功率下60min的蒸发量,准确控制溶剂容量以保证加热60min后所得溶液的浓度恰为200％(2g生药/ml)];用煎煮所得的汤剂,按照等浓度不等容积的方法,以拟临床用量60、30、10倍的药量,分别给高、中、低剂量组大鼠按相应剂量灌胃给药并观察其灌胃后反应(空白组用凉开水);每天定时灌胃1次,每周连续灌胃6次、测量体重1次、并随体重变化调整给药量,持续灌胃3个月;在末次灌胃结束24h后再次测量各组大鼠体重变化,用剪尾采血法采集各大鼠的血液标本送检其血液学一般情况;用心脏采血法,采集各组半数大鼠的血液标本送检其与肾功能相关的生化指标;剖取大鼠肾脏组织、制作组织标本,在光镜下观察其肾脏组织形态学的改变。各组剩余大鼠继续喂养3周,为观察其可逆性情况和可能存在的迟发性毒性反应做准备;对各标本的相关指标值进行统计分析。
　　结果:1.实验药物对各组大鼠体重增长所造成的影响有统计学意义:与空白组组相比:高剂量组体重表现出显著性差异(P<0.01);与高剂量组体重变化相比:各组体重均有统计学意义(P<0.01,P<0.05,P<0.01);与中剂量组体重相比:高剂量组体重有统计学意义(P<0.05);与低剂量体重相比:高剂量组体重有统计学意义(P<0.01);2.实验药物对各组大鼠的血红蛋白含量所造成的影响无统计学意义(P>0.05);3.实验药物对各组大鼠的红细胞数值所造成的影响无统计学意义(P>0.05);4.实验药物对各组大鼠的肾功能所造成的影响为:1)对尿素氮排泄的影响无统计学意义(P>0.05);2)对肌酐排泄的影响无统计学意义(P>0.05);3)对尿酸排泄的影响无统计学意义(P>0.05);4.对各组大鼠肾脏的组织形态学未造成异常影响;5.不存在迟发性的肾脏毒性反应。
　　结论:将赤丸方中各味药物的水浸渍液进行60min的煎煮减毒处理后所制成的浓度为200%(2g生药/ml)的汤剂,以最大用量为拟临床用量60倍的药量给Wister大鼠持续灌胃3个月,对大鼠的体重增长产生了显著性影响(表现为与空白组相比:低剂量组大鼠的体重增长幅度未见减缓,中剂量组略有减缓,高剂量组的减缓幅度较中剂量组更为明显),未对大鼠的红细胞数目和血红蛋白数量产生显著性影响,未对大鼠的肾脏功能和肾脏组织形态学产生显著性毒性。

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中文摘要

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前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

结果

1 对大鼠的一般情况和体重变化的影响

2 对各组大鼠血红蛋白、红细胞的影响

3 对各组大鼠肾功能的影响

4 对各组大鼠肾脏组织形态学的影响

理论探讨

1 古代医家和现代试验研究结论中对赤丸的肾脏慢性毒性的认识

2 导师学术思想见解：

3 赤丸方水煎液对Wister 大鼠肾脏的慢性影响

4 研究中存在的问题

结论

致谢

参考文献

附录1 大鼠肾脏组织切片

附录2 文献综述

附录3 在校期间论文论著和科研情况