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肠浒苔多糖益生菌增殖及水解物的抗氧化活性研究

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第一部分 综述

1.1浒苔概况

1.1.1浒苔简述

1.1.2 浒苔的营养价值

1.1.3浒苔多糖的生物活性

1.2海藻多糖活性的影响因素

1.3多糖降解的研究进展

1.4益生元的研究概况及发展趋势

1.5益生元的研究现状与发展趋势

第二部分 研究内容和方法

2.1仪器与材料

2.1.1实验材料

2.1.2实验仪器

2.1.3实验试剂

2.1.4培养基

2.1.5菌种的活化

2.2实验方法

2.2.1肠浒苔粗多糖的提取

2.2.2标准曲线的制作

2.2.3肠浒苔粗多糖的抗消化性

2.2.4肠浒苔粗多糖对益生菌的增殖作用

2.2.5肠浒苔粗多糖对益生菌培养基pH值的影响

2.2.6肠浒苔粗多糖对益生菌的生长速率的影响

2.2.7肠浒苔粗多糖的水解

2.2.8肠浒苔粗多糖水解产物样品的制备

2.2.9肠浒苔粗多糖水解产物的分子量测定

2.2.10肠浒苔粗多糖水解产物的抗氧化活性测定

第三部分 研究结果与讨论

3.1肠浒苔粗多糖的抗消化性

3.1.1肠浒苔粗多糖对模拟胃液的抗消化性

3.1.2肠浒苔粗多糖对α-淀粉酶的消化性

3.2肠浒苔粗多糖的益生菌增殖作用

3.3肠浒苔粗多糖对益生菌培养基pH值的影响

3.4肠浒苔粗多糖对益生菌生长速率的影响

3.5肠浒苔粗多糖水解产物的分子量测定

3.6肠浒苔粗多糖水解产物的抗氧化活性测定

3.6.1 DPPH自由基清除能力测定

3.6.2还原能力测定

3.6.3羟自由基清除能力测定

3.6.4超氧根离子清除能力测定

第四部分 结论与展望

4.1主要结论

4.2展望

参考文献

个人简历

致谢

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摘要

本文研究了肠浒苔水提粗多糖WE和碱提粗多糖AE的体外益生菌增殖作用和水解产物的抗氧化活性变化。分别通过热水浸提和碱提法获得WE和AE样品,探究WE和AE对模拟胃液和α-淀粉酶的抗消化性,以及对植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus bulgaricus subsp)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)的体外增殖作用。研究了在不同的三氟乙酸(TFA)浓度、水解时间、水解温度和料液比条件下WE和AE水解产物的分子量和抗氧化活性。围绕WE和AE的具体研究内容和结果如下:
  1.WE和AE对模拟胃液和α-淀粉酶抗消化性质研究。分析并考察了WE和AE在模拟胃液和α-淀粉酶中的水解度,以低聚果糖(FOS)为对照,评价WE和AE的抗消化性。结果表明,WE和AE在模拟胃酸中的最大水解度分别为5.22%和5.12%;在α-淀粉酶中的最大水解度分别为5.02%和6.72%,WE和AE的抗消化性与已知的益生元FOS没有明显区别,说明WE和AE均可以完整的通过人体的上消化道,具有良好的益生元潜力。
  2. WE和AE对益生菌的体外增殖作用研究。考察了WE和AE对三种益生菌的体外增殖作用。以空白和FOS为对照,在基础培养基中分别加入不同浓度的WE和AE(0、0.1%、0.5%、1.0%、2.0%、3.0%,w/v),按比例分别接种三种益生菌进行体外培养。实验结果表明,WE和AE对三种益生菌菌株均有明显增殖作用。在培养48 h后,培养基细菌数量明显增长,且培养基pH值下降,说明WE和AE均可以被三种益生菌所利用,促进益生菌的生长繁殖,并产生酸性的代谢产物。在实验中发现,AE的增殖效果要优于WE,且多糖的浓度会影响其作用。WE对德氏乳杆菌保加利亚亚种增殖作用的最适浓度为1.0%,对植物乳杆菌和嗜热链球菌的增殖作用的最适浓度为2.0%;AE对三种益生菌的最佳促进作用的浓度均为1.0%。本实验表明了WE和AE均能够促进益生菌增殖,有一定的益生元前景。
  3.WE和AE的水解及抗氧化活性研究。分析了在不同的TFA浓度、水解温度、水解时间和液料比水解条件下的WE和AE水解产物的分子量和抗氧化活性。经测定,水解后的WE和AE样品的DPPH自由基清除能力和还原能力增幅比较大。其中,在料液比为1:150,TFA浓度为0.1 mol/L,80℃下反应4 h时,WE和AE的DPPH自由基清除效果分别增加了67%和96%,近于Vc(88%)效果的86%和88%,还原能力分别能达到Vc效果的48%和41%。

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