氧合血常温体外持续灌注对供肺保存效果的动物实验研究

摘要

目的：研究不使用呼吸机、氧合血常温经肺动脉持续灌注对离体猪肺的保护作用，并探讨肺缺血再灌注损伤与细胞凋亡的相关性。为临床较长时间保存供肺并可长途运输提供实验依据。
　　方法：采用健康纯种的广西巴马小香猪24只，随机分为两组，分别制备双肺离体温血灌注模型和冷缺血模型，即:实验组（不使用呼吸机、氧合血常温经肺动脉持续灌注8h保存供肺，n=12）和对照组（Celsior液经肺动脉灌注后于4℃深低温保存供肺8h，n=12。供肺保存8h后行左肺移植手术，术后机械通气24h。检测肺含水量、左下肺静脉血氧分压(LIPV-PC02)、肺通气阻力(LR)等指标评估肺功能;HE染色光镜下观察行肺组织水肿分级并计数肺泡细胞死亡率，评估肺组织损伤程度。通过TUNEL法结合透射电镜观察来阐述肺泡细胞凋亡水平、凋亡的肺泡细胞类型及凋亡趋势;
　　结果：1.肺功能检测:术后各时间点比较，实验组肺含水量、LR显著低于对照组，LIPV-PCO2显著高于对照组(P＜0.05)，实验组肺功能显著优于对照组;实验组术后24h肺含水量、LR反而显著低于术后12h，LIPV-PCO2显著高于术后12h(P＜0.05);2.HE染色观察:实验组各时间点肺组织损伤较对照组轻;对照组肺组织损伤术后24h最为严重，70％-80％肺泡腔出现不同程度水肿或出血，甚至大片间质出血、坏死。实验组于术后12h最为严重，20-30％肺泡腔出现水肿液，局部肺泡腔及肺间质出血，且于12h后有好转趋势。肺泡细胞死亡率:实验组各时间点显著低于对照组(P＜0.05);对照组肺泡细胞死亡率逐渐增加，术后24h达32.7±4.6％;实验组术后肺泡细胞死亡率于术后12h达最高15.8±2.1％。3.Tunel检测:实验组肺泡细胞凋亡率各时间点显著低于对照组(P＜0.05)，实验组术后6h达最高为8.2±1.5％，术后24h肺泡细胞凋亡率显著低于术后6h(P＜0.05);术后24h内肺泡细胞凋亡率与肺含水量、LR呈正显著相关(r分别为0.890、0.918，P＜0.05)，与LIPV-PCO2呈负显著相关（r为-0.784，P＜0.05）;4.透射电镜观察:凋亡肺泡细胞以AECⅡ为主，约占80％。实验组各时间肺泡细胞凋亡水平低于对照组，且凋亡上升趋势更早得到控制。
　　结论:1.氧合血常温经肺动脉持续灌注供肺保存方式能有效减轻LIRI，使猪肺移植术后肺功能得到改善，其供肺保存效果明显优于“低温静态保存”方式。
　　2.肺移植术后早期（24h内），肺泡细胞凋亡率与LIRI有着显著的相关性，凋亡水平越高，LIRI损伤程度越严重。且凋亡主要肺泡细胞类型为AECⅡ。
　　3.温血灌注保存方式可能通过降低肺泡细胞凋亡水平，减少LIRI，起到供肺的保护作用。

目录

声明

个人简历

缩略词

摘要

前言

研究对象和方法

1 实验动物及主要材料

2 实验方法

3 统计分析

结果

1 移植后肺功能检测

2．猪供肺组织HE染色观察

3 Tunel染色结果

4 透射电镜结果

5 肺泡细胞凋亡水平和移植后肺功能检测各指标的相关性分析

讨论

结论

参考文献

附图

综述 围手术期移植肺缺血再灌注损伤保护措施研究进展

致谢