毛郁金中等极性部位化学成分研究及倍半萜类化学成分的含量测定

摘要

目的:
　　研究毛郁金中等极性部位的化学成分;建立超高效液相色谱-质谱联用方法(UPLC-MS)测定毛郁金中倍半萜类化合物的含量。
　　方法:
　　毛郁金根茎粉碎为粗粉，70％乙醇回流提取，提取物混悬于水，依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和的正丁醇萃取。乙酸乙酯部位经硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、ODS柱色谱、PTLC、高效液相半制备、重结晶等方法分离纯化。根据化合物的理化性质、波谱数据及与文献数据进行比对分析的方法鉴定化合物的结构。
　　采用UPLC-MS法，测定毛郁金中莪术醇（CAW-2）、桂莪术内酯(CAW-3)、12-羟基莪术烯醇（CAW-6）、aromaticainA（CAL-1）、aerugidiol(CAW-7)5个倍半萜类化合物的含量。液相色谱条件为:Waters ACQUITY UPLC(R)HSS T3色谱柱（2.1mm×100mm ID，1.8μm），甲醇(A)-水(B)（水相中加5mmol/L甲酸铵）为流动相，进行梯度洗脱(0～5.5min，40％A;5.5～8.5min,40％A→65％A;8.5～12.5min,65％A;12.5～15.5min,65％A→80％A;15.5～18.5min,80％A→95％A)，流速为0.3mL/min,柱温为40℃，进样量为10μL。质谱条件为:ESI离子源，莪术醇（CAW-2），桂莪术内酯(CAW-3)，12-羟基莪术烯醇(CAW-6)、aromaticain A(CAL-1)在正离子模式下，aerugidiol(CAW-7)在负离子模式下，采用多反应离子监测(MRM)方式进行测定。
　　结果:
　　从毛郁金中等极性部位分离得到16个化合物，目前鉴定了其中的12个化合物，分别为β-谷甾醇(CAW-1)，莪术醇(CAW-2)，桂莪术内酯（CAW-3），methylzedoarondiol(CAW-5)，12-羟基莪术烯醇（CAW-6），aerugidiol(CAW-7)，2-羟基桂莪术内酯（CAW-8），zedoalactone B(CAW-11)，wenyujinepoxide A(CAW-12),zedoalactone A(CAW-13),zedoalactone C(CAW-14)，zedoarolide B(CAW-19)。其中化合物12-羟基莪术烯醇(CAW-6)，2-羟基桂莪术内酯(CAW-8)，zedoalactone B（CAW-11），wenyujinepoxide A(CAW-12),zedoalactone A(CAW-13),zedoalactone C(CAW-14)，zedoarolide B(CAW-19)7个化合物为首次从该植物中分离得到。
　　毛郁金倍半萜类化合物的含量测定，应用所建立的色谱条件:莪术醇(CAW-2)、桂莪术内酯(CAW-3)、12-羟基莪术烯醇(CAW-6)、aromaticain A(CAL-1)、aerugidiol(CAW-7)在18.5min内能够进行定量分析，日间精密度和日内精密度均符合同步测定的要求。莪术醇在60～6000ng/mL(r=0.9994)范围内，定量离子峰面积与其浓度呈良好的线性关系;桂莪术内酯在0.8～80ng/mL(r=0.9998)范围内，定量离子峰面积与其浓度呈良好的线性关系;12-羟基莪术烯醇在52～5200ng/mL(r=0.9997)范围内，定量离子峰面积与其浓度呈良好的线性关系;aromaticain A在340～17000ng/mL(r=0.9998)范围内，定量离子峰面积与其浓度呈良好的线性关系;aerugidiol在236～11800ng/mL(r=0.9997)范围内，定量离子峰面积与其浓度呈良好的线性关系。莪术醇高、中、低三个浓度的平均加样回收率分别为99.7％，100.1％，99.0％，相应的RSD分别为0.69％，0.34％，0.62％;桂莪术内酯高、中、低三个浓度的平均加样回收率分别为97.0％，96.8％，100.0％，相应的RSD分别为0.42％，0.77％，0.14％;12-羟基莪术烯醇高、中、低三个浓度的平均加样回收率分别为100.8％，97.9％，99.0％，相应的RSD分别为0.74％，2.71％，0.58％;aromaticain A高、中、低三个浓度的平均加样回收率分别为99.4％，99.9％，100.3％，相应的RSD分别为0.11％，0.36％，0.47％;aerugidiol高、中、低三个浓度的平均加样回收率分别为99.7％，100.5％，100.2％，相应的RSD分别为0.29％，0.83％，0.38％。莪术醇、桂莪术内酯、12-羟基莪术烯醇、aromaticainA、aerugidiol的检测限分别为0.04ng/mL，2.40pg/mL，0.37ng/mL，0.33ng/mL和0.50ng/mL;它们相对应的定量限分别为0.15ng/mL，0.01ng/mL，1.24ng/mL，1.09ng/mL和1.66ng/mL，说明该色谱方法可靠。
　　结论:
　　从毛郁金中等极性部位中共分离得到16个化合物，目前鉴定了其中的12个化合物，7个为首次从该植物中分离得到;所建立的方法快速、准确、灵敏，可用于毛郁金中倍半萜类化学成分的含量测定。

目录

声明

中英文缩略词表

摘要

前言

第一章 毛郁金中等极性部位化学成分研究

1 仪器与材料

2 药材

3 提取与分离

4 化合物的结构鉴定

5 结果与讨论

第二章 毛郁金倍半萜类化学成分的含量测定

第一节 含量测定方法的建立

1 仪器与试药

2 方法与结果

3 讨论

第二节 毛郁金倍半萜类化学成分的含量测定

1 含量测定

2 结果与讨论

参考文献

附图

综述

致谢

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