芪苈强心胶囊对急性心肾综合征大鼠心肾功能的影响

摘要

目的：本课题通过创建大鼠急性心肾综合征（cardiorenal syndrome,CRS）动物模型，观察芪苈强心胶囊对急性CRS大鼠心肾功能相关指标的影响，评价芪苈强心胶囊对急性CRS大鼠的治疗效果，为中医药防治急性CRS提供新的理论基础，进一步为临床应用芪苈强心胶囊治疗急性CRS提供相关实验数据。
　　方法：
　　1.采用SD大鼠（均为雄性，SPF级）共80只，体重200±20g。
　　2.造模前所有大鼠均行心脏超声检查，随机（随机数字表法）分为假手术组与造模组两组，其中假手术组8只，造模组72只。所有大鼠称重后均以10％水合氯醛3ml/kg的用量，通过腹腔注射的方式进行麻醉，造模组行右侧单肾切除术(unilateral nephrectomy,UNX)，假手术组单纯在背部切口，仅暴露肾脏，不切除，然后缝合；肾脏摘除后一周，采用结扎大鼠冠脉前降支的方法创建大鼠心肌梗死（myocardial infarction,MI）模型，假手术组术中在相同位置只挂线，不结扎。术后大鼠均应用青霉素钠24万U/kg·d，腹腔注射治疗，一共3天，以防止感染。
　　3.造模成功后，将合格的存活大鼠随机分为芪苈强心胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组及模型组。在药物灌胃前为方便药物的吸收，使动物处于空腹状态，各组大鼠均应禁食6h。各给药组大鼠分别按1.2g/kg·d、0.6g/kg·d、0.3g/kg·d的剂量给药，用3ml蒸馏水配制成药液进行灌胃，在手术后第二天开始，每天上午定时灌胃1次，持续四周。其余组给予等体积生理盐水灌胃，方法相同。所有大鼠均给予常规饲料和水喂养。
　　4.所有大鼠于MI造模后24h及药物治疗后4周行心脏超声心动图检查，测量左心室收缩末期内径（left ventricular end-systolic diameter,LVDs）、左心室舒张末期内径（left ventricular end-diastolic diameter,LVDd）、每分输出量（cardiac output,CO）、左心室收缩末期容积（left ventricular end-systolic volume,LVESV）、计算左心室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）及左心室短轴缩短率（left ventricular fractional shortening,LVFS）。然后化验血清脑钠肽（brain natriuretic peptide,BNP）、血肌酐（serum creatinine,Scr）、尿素氮（urine urea nitrogen,BUN）、中性粒细胞明胶酶相关性脂质转运蛋白（neutrophil gelatinase associated lipocalin,NGAL）。之后麻醉处死所有大鼠，并剪取心脏非梗死区的心肌组织，采用Masson三色染色的方法进行病理形态学检测，以查看心肌纤维的情况。
　　结果：
　　1.造模过程及术后灌喂给药期间共有42只大鼠死亡。
　　2.一般情况比较：各组造模大鼠进食量减少，反应性差，活动量减少，抓取时反抗较弱。假手术组大鼠，饮食、活动正常。
　　3.心脏超声检查相关指标：○1术前各组大鼠行心脏超声检查，手术组与假手术组LVDs、LVDd、LVESV、LVEF、LVFS及CO比较，差别没有统计学意义（P＞0.05）；○2术后四周，与假手术组相比，模型组及芪苈强心胶囊各剂量组大鼠的LVDs、LVDd及 LVESV都有所增大，而 LVEF、LVFS及CO明显降低，差异有统计学意义（P<0.05）；○3与模型组相比，各剂量组大鼠的LVDs、LVDd及LVESV均缩小，而LVEF、LVFS及CO提高，差异均有统计学意义（P<0.05）；○4各剂量组之间变化不大，差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　4.大鼠心肌组织光镜下病理形态学观察结果：○1假手术组心肌组织形态正常、排列整齐；○2模型组心肌细胞排列紊乱、肥大，梗死和非梗死区心肌相互参杂，可见大量心肌细胞被绿色胶原纤维代替，胶原纤维网络结构松散、凌乱；○3各给药组心肌细胞肥大，较少部分被绿色胶原纤维代替，胶原纤维与心肌细胞相间排列，程度比模型组轻，但明显多于假手术组。
　　5.血清相关生化指标结果：MI术后24h：与假手术组相比，各手术组存活大鼠血清NGAL水平都明显升高，具有显著的统计学意义（P<0.05），说明造模已对肾脏造成急性损害。干预四周：○1与假手术组相比，其余各组血清Scr、BUN、NGAL及BNP水平均升高，差异均有统计学意义（P<0.05），说明造模已造成肾脏及心脏损害；○2与模型组相比，芪苈强心胶囊高、中剂量组大鼠血NGAL、Scr和BUN水平有所降低，差异有统计学意义（P<0.05），而低剂量组无明显变化，差异无统计学意义（P＞0.05），高、中剂量组之间无显著性差异，无统计学意义（P＞0.05）；而芪苈强心胶囊各剂量组大鼠血清 BNP浓度均降低，差异均有统计学意义（P<0.05），各剂量组之间以高剂量组下降显著，差异具有统计学意义（P<0.05）；中、低剂量组之间无明显统计学意义。
　　结论：
　　1.给予大鼠UNX+MI可以成功制备急性CRS大鼠模型。
　　2.芪苈强心胶囊能增加急性CRS大鼠心脏的收缩能力，改善其心功能。
　　3.芪苈强心胶囊能降低急性CRS大鼠血清Cr、BUN及 NGAL的水平，改善其肾功能。
　　4.芪苈强心胶囊对急性CRS大鼠心肌组织形态方面有改善作用。

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中英文缩略词对照表

中文摘要

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前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计学处理

结果

1 造模情况

2 各项指标检测结果

讨论

1 关于本实验急性CRS大鼠模型的建立情况

2 现代医学对急性CRS的认识及相关研究

3 祖国医学对CRS的认识

4 芪苈强心胶囊的药效作用及本研究假说的提出

5 本实验的研究讨论

6 本实验中遇到的困难及研究的局限性

7 本研究课题总结

结论

致谢

参考文献

附录1 附图1技术路线图

附录2 文献综述: 急性心肾综合征的研究现状

附录3 在校期间论文论著和科研情况