广西特色药材喜树果HPLC指纹图谱和喜树碱含量测定的研究

摘要

本文采用HPLC（高效液相色谱法）和TLCS（薄层扫描法）对喜树果药材中喜树碱含量测定方法进行了研究，经过实验建立了相应的含量测定方法。我们运用上述两种方法测定了广西、贵州等六省（区、市）不同产地40批喜树果药材和广西六个不同产地36批不同时期采集喜树果药材中喜树碱的含量。HPLC测定结果表明，40批不同产地喜树果药材喜树碱含量在0.0315％～0.2424％（以药材干燥品计算，余下同），不同产地喜树碱含量有较大差异。其中广西柳江县产喜树果药材喜树碱含量最高，为0.2424％；云南昆明市产含量最低，为0.0315％。对广西六个产地不同采收期喜树果喜树碱动态积累的研究结果表明，7月份采收的喜树果药材中喜树碱含量最低，8月或9月份采收的样品含量最高，往后含量则有所下降。TLCS法测定结果与HPLC相似，但所得数据较HPLC测定整体偏高。
　　 在含量测定研究的基础上，我们对喜树果药材进行了色谱指纹图谱方面的研究，建立了喜树果药材PHLC指纹图谱的测定方法。并对广西15批不同产地喜树果药材和广西四个不同产地24批不同时期喜树果药材进行指纹图谱测定。建立了喜树果药材标准指纹图谱，以喜树碱峰作为内参照峰，确定15个共有峰作为整体指纹特征。利用中药色谱指纹图谱相似度计算软件对喜树果药材指纹图谱进行相似度评价，并计算确定了共有峰中的六强峰排列顺序和相对总面积值等重要技术参数。结果，15批不同产地药材指纹图谱与对照指纹图谱的相似度为0.920～0.998；4个产地同一植株、不同时期（7～12月）采集的样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度为0.823～0.997，相似度均较高。这表明广西不同产地喜树果样品之间以及同一植株、不同时期喜树果的指纹图谱具有较好的一致性。
　　 经方法学考察证实，本实验确定的含量测定方法及指纹图谱检测方法均具有良好的精密度、稳定性、重复性，可以用于喜树果药材的质量控制。
　　 最终，对上述研究结果进行分析评价，阐明了喜树果不同产地的药材质量和药材最佳采收期；并对现有喜树果药材质量标准进行修订（草案），增加了[指纹图谱]和[含量测定]项，提高了喜树果药材标准的技术含量。这为将来喜树果药材的修订提高提供了试验依据，对于控制喜树果药材质量，确保临床用药安全有效和生产投料的质量，进一步开发利用喜树果药材具有重要的学术意义和实用价值。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章 绪论

1.1喜树中的主要化学成分

1.2喜树碱的研究进展

1.2.1喜树碱的理化性质

1.2.2喜树碱的抗肿瘤作用机制

1.2.3喜树碱的提取方法

1.2.4喜树碱的含量测定方法

1.2.5喜树碱应用前景展望

1.3喜树碱衍生物的研究进展

1.4中药指纹图谱研究进展

1.4.1中药指纹图谱的定义及原则

1.4.2中药指纹图谱的研究方法及应用

1.4.3建立中药指纹图谱的意义与应用前景

1.5本课题研究的目的与内容

第二章 HPLC法测定喜树果药材中喜树碱的含量

2.1仪器与材料

2.1.1仪器

2.1.2材料

2.2方法与结果

2.2.1色谱条件选择

2.2.2喜树碱对照品纯度检查

2.2.3对照品溶液制备

2.2.4阴性对照品溶液制备

2.2.5供试品溶液制备

2.2.6专属性试验

2.2.7方法学考察

2.2.8样品含量测定

2.3讨论与小结

2.3.1讨论

2.3.2小结

第三章 TLCS法测定喜树果药材中喜树碱的含量

3.1仪器与材料

3.1.1仪器

3.1.2材料

3.2方法与结果

3.2.1对照品溶液制备

3.2.2供试品溶液制备

3.2.3层析条件的摸索

3.2.4测定方法和仪器条件的选择

3.2.5方法学考察

3.2.6样品含量测定

3.3小结

第四章 喜树果药材HPLC色谱指纹图谱研究

4.1仪器与材料

4.1.1仪器

4.1.2材料

4.2方法与结果

4.2.1色谱条件的选择

4.2.2供试品溶液制备

4.2.3参照峰的选择

4.2.4参照物溶液制备

4.2.5阴性对照溶液制备

4.2.6 2h色谱图的记录

4.2.7样品指纹图谱测定及分析

4.3讨论与小结

4.3.1讨论

4.3.2小结

第五章 喜树果药材质量标准的修订

5.1原喜树果质量标准

5.2新的喜树果质量标准(草案)

第六章 结论、创新之处及前景展望

6.1结论

6.2创新之处

6.3应用前景展望

参考文献

致谢

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