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两个桉树无性系组织培养与愈伤组织及植株再生的研究

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第一章 文献综述

1.1林木组织培养研究进展

1.1.1器官培养

1.1.2细胞培养及次生代谢产物培养

1.1.3原生质体培养

1.1.4体细胞杂交与细胞融合

1.1.5种质资源得到离体保存

1.1.6遗传转化

1.2桉树概况

1.3桉树组织培养研究进展

1.3.1胚培养

1.3.2芽培养及嫩茎培养

1.3.3木瘤培养

1.3.4愈伤组织培养

1.3.5花药培养

1.3.6悬浮培养

1.3.7原生质体培养

1.3.8胚状体培养与人工种子

1.3.9多倍体诱导

1.4本研究目的意义

第二章 材料与方法

2.1培养基

2.2培养条件

2.3培养基母液的配制

2.4培养基配置

2.5桉树快速繁殖体系的研究

2.5.1试验材料

2.5.2试验设计

2.6桉树愈伤组织培养研究

2.6.1试验材料

2.6.2试验设计

2.7试验结果观察与统计方法

2.7.1继代增殖试验的观察与统计方法

2.7.2生根试验中的观察与统计方法

2.7.3炼苗与移栽的观察与统计方法

2.7.4愈伤组织诱导与分化出不定芽试验中的观察与统计方法

2.7.5数据统计分析方法

第三章 结果与分析

3.1 桉树快速繁殖体系的研究

3.1.1无菌芽继代增殖培养影响

3.1.2无菌芽玻璃化影响因素

3.1.3生根培养

3.1.4炼苗与移栽

3.2桉树愈伤组织培养研究

3.2.1 2,4-D对愈伤组织诱导的影响

3.2.2 IBA对愈伤组织诱导的影响

3.2.3 NAA对愈伤组织诱导的影响

3.2.4愈伤组织分化出不定芽试验结果

第四章 结论与讨论

4.1无菌芽继代培养的影响因素

4.1.1植物生长调节物质对无菌苗增殖及玻璃化的影响

4.1.2蔗糖浓度对无菌芽玻璃化的影晌

4.1.3琼脂浓度对无菌芽玻璃化的影晌

4.1.4活性炭浓度对无菌芽玻璃化的影晌

4.1.5光照对无菌芽玻璃化的影响

4.1.6继代周期对无菌芽玻璃化的影晌

4.2无菌苗生根培养影响因素

4.3炼苗与移栽影响因素

4.4愈伤组织培养及不定芽分化影响因素

4.4.1愈伤组织诱导的影响

4.4.2愈伤组织分化出不定芽的影响

参考文献

附录

致 谢

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摘要

本文对桉树两个无性系3229和广林9号无菌苗的增殖、继代过程中玻璃化的影响因素、生根、炼苗移栽、叶片、叶柄、茎段愈伤组织的诱导及愈伤组织分化出不定芽进行了研究。试验结果如下:
   1、确定了A+6-BA0.3mg/L+NAA0.3 mg/L为较好的继代增殖培养基,该配方下,长势好,无菌苗健壮,从芽多,苗节间相对较长,没有玻璃化苗的出现。
   2、在无菌苗的继代增殖过程中,加入低浓度的赤霉素GA(0.2~0.5mg/L)可促进芽的伸长。
   3、蔗糖浓度对桉树无菌苗玻璃化现象有较大的影响,随着蔗糖浓度的升高,两个无性系无菌苗的玻璃化发生率均呈下降趋势。以30g/L的蔗糖浓度最为合适。
   4、琼脂浓度对桉树无菌苗玻璃化现象有较大的影响,随着琼脂浓度的升高,两个无性系无菌苗的玻璃化发生率均呈下降趋势。以5.0g/L的琼脂浓度最为合适。
   5、活性炭的加入可以明显地改善桉树无菌苗玻璃化现象,当培养基中的活性炭浓度达到2.0g/L时,两个无性系无菌苗的玻璃化发生率均降至0。
   6、光照强度对桉树无菌苗玻璃化现象有一定的影响,随着光照强度的增强,两个无性系无菌苗的玻璃化发生率均呈下降趋势,但同时愈伤化现象加重。
   7、随着继代周期的延长,两个无性系无菌苗玻璃化发生率呈上升趋势并出现褐化现象。以30天的继代周期最为合适。
   8、适宜无菌苗生根的最佳配方是1/2A+NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L+蔗糖30g/L。
   9、适宜桉树无菌苗移栽的基质是黄心土和泥炭一起配合使用(1:1、1:2、2:1的比例均可),移栽成活率可达80%以上。
   10、2,4-D对桉树愈伤组织诱导较为有利,与KT配合使用诱导出的愈伤组织容易生根,且褐变;而与6-BA配合使用诱导出的愈伤组织质量好,绿色,颗粒状,结构致密,长势旺盛。确定桉树愈伤组织诱导的较适培养基是A+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.2~0.6mg/L。
   11、适宜于桉树愈伤组织分化出不定芽的培养基是A+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+KT0~0.1mg/L。

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