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第一章 文献综述
1.1 八角茴香油与茴香酸概述
1.1.1 八角茴香
1.1.2 茴香油的主要成分
1.1.3 茴香脑的制备和用途
1.1.4 茴香酸的理化性质
1.1.5 茴香酸的用途
1.2 茴香酸制备方法的研究
1.2.1 茴香脑中度氧化法
1.2.2 间接电解法
1.2.3 化学合成法
1.2.4 生物转化法的进展
1.3 茴香酸的检测方法
1.3.1 薄层色谱法
1.3.2 气相色谱法
1.3.3 其他检测方法
1.4 研究背景与意义
1.4.1 广西是茴香油生产基地
1.4.2 传统生产方法的不足
1.4.3 生物转化方法的优势
1.5 研究的主要内容
1.5.1 菌株的筛选和鉴定
1.5.2 发酵的单因素研究
1.5.3 响应面优化及分析
1.5.4 研究技术路线
第二章 转化茴香脑生成茴香酸菌株的筛选和鉴定
2.1 引言
2.2 实验材料与试剂
2.2.1 菌种和载体
2.2.2 溶液和缓冲液配制
2.2.3 药品及仪器
2.2.4 培养基
2.3 实验步骤与方法
2.3.1 菌株筛选的培养条件
2.3.2 大肠杆菌培养条件
2.3.3 菌种保存与活化
2.3.4 发酵产物的检测方法
2.3.5 菌株的筛选
2.3.6 形态特征观察
2.3.7 理化特性鉴定
2.3.8 抗生素敏感性检测
2.3.9 分子生物学鉴定-16s rDNA序列的克隆和鉴定
2.4 结果与分析
2.4.1 富集培养
2.4.2 初筛-可耐受高浓度茴香脑作为唯一碳源的菌株筛选
2.4.3 复筛
2.4.4 形态学分析
2.4.5 生理生化特性的鉴定
2.4.6 分子生物学鉴定WGB31的16S rDNA
2.4.7 系统发育分析
2.5 小结
第三章 WGB31转化茴香脑生成茴香酸的发酵单因素研究
3.1 引言
3.2 实验材料与试剂
3.2.1 菌株
3.2.2 药品和仪器
3.2.3 培养基
3.2.4 茴香脑、茴香酸检测方法
3.3 实验步骤与方法
3.3.1 培养基配方的优化
3.3.2 发酵培养条件的优化
3.4 结果与分析
3.4.1 不同氮源对产茴香酸的影响
3.4.2 蛋白胨浓度对产茴香酸的影响
3.4.3 不同碳源对产茴香酸的影响
3.4.4 葡萄糖浓度对产茴香酸的影响
3.4.5 发酵液初始pH值对产茴香酸的影响
3.4.6 发酵液接种浓度对产茴香酸的影响
3.4.7 底物添加浓度对产茴香酸的影响
3.4.8 培养液转化时间对产茴香酸的影响
3.4.9 培养温度对产茴香酸的影响
3.4.10 摇床转速对产茴香酸的影响
3.4.11 溶解氧对产茴香酸的影响
3.5 小结
第四章 响应面法分析优化WGB31的发酵条件
4.1 引言
4.2 实验材料与试剂
4.2.1 菌株
4.2.2 药品和仪器
4.2.3 培养基
4.3 实验步骤与方法
4.3.1 Box-Behnken Design实验
4.3.2 建立模型
4.3.3 验证实验
4.4 结果与分析
4.4.1 响应面模型的建立和方差分析
4.4.2 关于茴香酸产量的响应面模型分析
4.5 小结
第五章 总结与展望
5.1 总结
5.2 前景展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文
