八角茴香药渣黄酮的提取、纯化及抗氧化活性研究

摘要

作为广西重要的大宗种植作物，八角茴香开发所带来的社会经济效益使其逐渐成为广西支柱产业之一。随着我国人民生活水平和环保意识的日益提高，如何可持续性的开发广西八角茴香资源成为当下研究的热点。本文以八角茴香药渣中黄酮成分为主要研究对象，从八角茴香中黄酮类成分的生物活性着手，以期为八角茴香可持续性开发利用做研究前瞻。
　　通过黄酮类化合物特征显色反应及NaNO2-Al(NO3)3-NaOH紫外显色体系，初步鉴定八角茴香药渣黄酮成分类别并建立了定量测定八角茴香渣黄酮的方法。
　　通过单因素实验结合相应面分析法研究了纤维素酶解辅助提取八角茴香药渣黄酮的工艺，确定了乙醇浓度、液固比、酶解pH为提取过程中主要的影响因素，本试验中最优提取工艺为乙醇浓度为51.14％，液固比为20.52mL/g，酶解pH为5.303，其余提取因素水平为超声时间60 min，酶解温度45℃，加酶量70 mg/g，酶解时间2h，粉碎目数为24-50目，最优提取率为14.76％，相对直接超声提取工艺，纤维素酶解辅助法提取率提高了45.42％。
　　通过聚酰胺树脂静态解吸附试验筛选出30-60目聚酰胺树脂为最适八角茴香药渣纯化的树脂目数;通过单因素结合正交试验确定了聚酰胺树脂动态吸附与解析过程的最优工艺参数:上柱液浓度为0.05 g/mL(生药量)，上柱液pH为5，层析柱高度与内径的比值为12∶1，上柱液流速为1-2 BV/h，饱和吸附量为150.06 mg/g;待聚酰胺树脂饱和吸附后，用蒸馏水冲洗树脂柱至Molish反应呈阴性，4 BV体积的90％乙醇冲洗树脂柱，解析率为70.77％，提取液经聚酰胺树脂纯化后，60℃下减压回收乙醇至无醇味，干物质中黄酮纯度达87.5％。
　　采用清除超氧阴离子自由基、羟基自由基和总抗氧化力试剂盒测定了八角茴香药渣黄酮体外抗氧化活性，试验结果显示，八角茴香药渣黄酮具有良好的清除体外自由基和总抗氧化力，但在同等浓度下，其抗氧化活性弱于维生素C，这与其提取纯化效果有一定关系。
　　采用饲养动物试验考察了八角茴香药渣黄酮体内拮抗氧化应激衰老的生物活性，试验结果表明八角茴香药渣黄酮能有效的拮抗氧化损伤带来的实验小鼠体重下降和器官萎缩，改善试验小鼠生活状态，提高D-半乳糖致衰老小鼠血清、肝脏与脑组织中SOD、GSH-Px的活性。

目录

声明

摘要

第一章 前言

1．1 八角茴香化学成分的研究进展

1．1．1 挥发性成分

1．1．2 黄酮类成分

1．1．3 有机酸

1．1．4 倍半萜内酯及其衍生物

1．1．5 其它成分

1．2 黄酮类化合物的研究进展

1．2．1 概述

1．2．2 基本结构分类及理化性质

1．2．3 天然植物黄酮类化合物提取方法研究进展

1．2．4 黄酮类化合物的生物活性

1．3 本课题研究的意义和内容

1．3．1 研究意义

1．3．2 研究内容

第二章 纤维素酶辅助超声提取八角茴香药渣黄酮工艺研究

2．1 实验材料及仪器

2．1．1 实验材料

2．1．2 实验试剂

2．1．3 实验仪器

2．2 实验方法

2．2．1 原料预处理

2．2．2 八角药渣黄酮定性分析

2．2．3 八角药渣黄酮定量分析

2．2．4 纤维素酶辅助超声提取八角药渣黄酮的工艺流程

2．2．5 纤维素酶辅助超声提取单因素实验

2．2．6 响应面优化试验设计

2．2．7 实验数据处理

2．3 实验结果与分析

2．3．1 八角药渣黄酮定性分析与定量测定

2．3．2 酶解辅助超声提取八角药渣黄酮单因素实验

2．3．3 响应面试验设计及结果分析

2．4 小结

第三章 聚酰胺树脂纯化八角药渣黄酮工艺研究

3．1 实验材料及仪器

3．1．1 实验材料

3．1．2 实验试剂

3．1．3 实验仪器

3．2 实验方法

3．2．1 原料预处理

3．2．2 八角药渣黄酮的测定

3．2．3 八角药渣黄酮提取液的制备

3．2．4 聚酰胺树脂的预处理

3．2．5 静态解吸附试验

3．2．6 动态吸附试验

3．2．7 动态解析实验

3．2．8 实验数据处理

3．3 结果与分析

3．3．1 八角药渣黄酮的测定

3．3．2 静态吸附试验结果

3．3．3 动态吸附试验结果

3．3．4 动态解析实验结果

3．4 小结

第四章 八角药渣黄酮抗氧化生物活性研究

4．1 实验材料及仪器

4．1．1 实验材料

4．1．2 实验动物

4．1．3 实验仪器

4．2 实验方法

4．2．1 八角药渣黄酮体外抗氧化实验

4．2．2 八角药渣黄酮体内抗氧化实验

4．2．3 数据处理及分析

4．3 实验结果与分析

4．3．1 八角茴香药渣黄酮对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除率

4．3．2 八角茴香药渣黄酮总抗氧化力(T-AOC)的测定

4．3．3 八角茴香药渣黄酮对衰老小鼠体重及脏器指数的影响

4．3．4 八角茴香药渣黄酮对衰老小鼠体内超氧化物歧化酶(SOD)的影响

4．3．5 八角茴香药渣黄酮对衰老小鼠体内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响

4．4 小结

第五章 总结与展望

5．1 总结

5．2 展望

参考文献

附录

致谢

攻读硕士学位期间发表论文情况