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【6h】

番茄细菌性斑点病抗性鉴定方法研究及抗源的初步筛选

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摘要

1 前言

1.1 番茄细菌性斑点病

1.1.1 症状

1.1.2 病原菌

1.1.3 病害循环

1.1.4 发病条件

1.2 抗病品种在番茄综合防治技术体系中的作用和地位

1.3 番茄细菌性斑点病抗性品种鉴定研究进展

1.4 接种的影响因素

1.4.1 病原菌

1.4.2 接种方法

1.4.3 作物类型

1.4.4 环境因素

1.4.5 病情分级标准

1.5 研究思路和研究意义

2 病原菌的分离鉴定与病情分级标准比较

2.1 材料与方法

2.1.1 病原菌的分离鉴定

2.1.2 不同病情分级标准下的病情指数比较

2.2 结果与分析

2.2.1 病原菌的分离鉴定

2.2.2 不同分级标准下的病情指数的比较

2.3 讨论

2.3.1 病原菌鉴定

2.3.2 不同分级标准下的病情指数

3 番茄细菌性斑点病苗期接种方法的研究

3.1 材料与方法

3.1.1 不同接种方法对苗期发病情况的影响

3.1.2 不同接种浓度对发病情况的影响

3.1.3 不同生长期接种对发病情况的影响

3.1.4 不同接种后调查时间对发病情况的影响

3.1.5 不同温度和保湿时间对发病情况的影响

3.2 结果与分析

3.2.1 不同接种方法对苗期植株发病情况的影响

3.2.2 不同接种浓度菌液对发病情况的影响

3.2.3 不同生长阶段接种对发病情况的影响

3.2.4 不同接种调查时间对发病情况的影响

3.2.5 不同温度和保湿时间对发病情况的影响

3.3 讨论

3.3.1 不同接种方法对苗期植株发病情况的影响

3.3.2 不同接种浓度菌液对发病情况的影响

3.3.3 不同生长阶段接种对发病情况的影响

3.3.4 不同接种调查时间对发病情况的影响

3.3.5 不同温度和保湿时间对发病情况的影响

4 番茄细菌性斑点病种子接种法的研究

4.1 材料与方法

4.1.1 浸种接种法对番茄细菌性斑点病病情指数的影响

4.1.2 浸种接种法的病情指数随时间和浓度的变化

4.2 结果与分析

4.2.1 浸种接种法对番茄细菌性斑点病病情指数的影响

4.2.2 浸种接种法的统计时间和接种浓度的确定

4.3 讨论

5 番茄细菌性斑点病抗源初步筛选

5.1 试验材料与方法

5.2 结果与分析

5.2.1 采用两种接种方法对番茄种质进行抗性鉴定

5.2.2 番茄种质的聚类分析

5.3 讨论

结论

参考文献

附录

致谢

攻读硕士学位期间发表论文情况

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摘要

近年来,我国秋冬番茄主产区右江河谷地区的番茄细菌性斑点病发病普遍,且日趋严重,给种植户造成较大的经济损失。此病在我国分布范围广,发病严重,俨然已成为番茄的重要病害之一。番茄种植过程中选用抗病品种是降低病害发生的有效手段,国内外对此病的抗性育种研究较少,市场上缺少能进行推广种植的抗细菌性斑点病的番茄品种。对番茄采用人工接种进行抗性鉴定是番茄抗病育种的基础工作。番茄对细菌性斑点病的抗性表现受到番茄品种、病原菌以及环境条件的影响,本试验通过对苗期植株、种子进行接种条件的研究,根据各接种方法的特点,对主要影响条件进行优化,并利用优化后的苗期人工接种方法和种子接种方法对74份番茄种质进行抗性鉴定,实现抗源的初步筛选,为番茄细菌性斑点病的抗性育种奠定基础,结果如下:
  (1)从田阳县那坡镇发病的番茄植株上分离获得的菌株,经科赫氏法则验证为致病菌,经培养特性、菌体形态观察、16s rDNA序列分析等鉴定方法,认定该病原菌为丁香假单胞杆菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.tomato)。
  (2)对前人采用的4种病情指数分级标准进行对比研究,结果表明:不同分级标准下的病情指数之间呈线性或幂函数关系,试验建立了不同标准之间的回归方程,经过检验,说明函数模型可靠,可实现不同标准下的数据相互转化。
  (3)对人工苗期接种条件进行优化:最佳的接种方法为茎干接种法和针刺叶片接种法,接种苗期为3~5叶期,接种浓度采用1×108cfu/ml,保湿时间在60h以上、温度在19.5~26.7℃,接种后14±2天进行病情指数统计。
  (4)对病原菌接种于种子的可行性进行了验证,并对种子接种条件进行优化,建立了浸种法最适宜接种浓度为1×109cfu/ml,接种后病情调查时间在接种后25~30天,接种后环境温度维持在23℃~26.7℃。
  (5)利用优化的条件,对74份番茄种质进行苗期和种子的抗性鉴定,鉴定结果表明:在两种接种方法下,26份番茄种质资源的鉴定结果一致,占鉴定材料的35.14%。苗期茎干接种法中无免疫品种,抗病品种9份,占12.32%,耐病品种22份,占30.13%,感病品种40份,53.42%,高感品种14份,占18.91%;种子浸种接种法中抗病品种13份,17.8%,耐病品种37份,占50.07%,感病品种10份,占13.70%,高感品种14份,占18.91%。

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