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摘要
文中关键缩略词中英文对照
第一章综述
1 2型糖尿病简介
2 T2DM实验动物模型的研究进展
2.1自发型T2DM动物模型的应用
2.2诱导型T2DM动物模型的应用
3 STZ与T2DM动物模型
3.1 STZ的结构特点
3.2 STZ给药途径和应用剂量的研究
3.3 STZ的分解和代谢
3.4 STZ在动物模型中的实际应用
3.5高脂高糖饮食联合低剂量STZ诱导T2DM动物模型的优点
4肝脏与T2DM的关系
4.1肝脏中的糖代谢
4.2肝脏与胰岛素抵抗
5转录组学和蛋白质组学技术在糖尿病研究领域的应用
5.1转录组学在糖尿病研究中的应用
5.2蛋白质组学在糖尿病研究中的应用
6小型猪疾病模型的应用和发展
7研究目的和意义
第二章STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型构建及成模特点比较分析
1材料
1.1试验动物
1.2动物日粮
1.3试验耗材和试剂
1.4试验仪器
2试验方法
2.1试验动物的饲养
2.2血液生理生化指标的测定
2.3静脉注射葡萄糖耐实验(IVGTT)
2.5病理切片制作
2.6巴马小型猪T2DM模型标准
2.7数据处理
3结果
3.1体重测定
3.2血清生理生化指标测定结果
3.3静脉葡萄糖耐试验结果
3.4 HOMA-IR计算
3.5病理试验结果
4讨论
5本章小结
第三章STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型肝脏转录组比较分析
1材料
1.1动物样品
1.2试验试剂
1.3试验仪器
2试验方法
2.1转录组建库测序方法
2.2转录组数据分析方法
3.1 RNA提取和检测
3.2样品测序数据统计
3.3测序片段与参考基因组比对结果
3.4样品RNA-Seq相关性分析
3.5差异表达基因统计
3.6 GO分析差异基因功能
3.7 KEGG分析差异基因功能
3.8差异基因表达验证
4讨论
5本章小结
第四章STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型肝脏蛋白质组学比较分析
1材料
1.1动物样品
1.2试验试剂
1.3试验仪器
2方法
2.1 iTRAQ标记定量蛋白质组学技术流程
2.2蛋白质组学数据分析方法
2.3转录组学和蛋白质组学联合分析方法
2.4 Western Blot方法
3结果
3.1 iTRAQ标记试验结果
3.2差异蛋白统计结果
3.3差异蛋白聚类热图
3.4差异蛋白GO分析
3.5差异蛋白KEGG分析
3.6差异蛋白网络互作(PPI)分析
3.7转录组学和蛋白质组学联合分析结果
3.8 Western Blot验证RPL15基因的表达
4讨论
5本章小结
第五章候选基因RPL15的克隆和细胞水平的功能验证
1材料
1.1试验动物样品
1.2试验细胞株及质粒
1.3试验试剂
1.4试验仪器
2试验方法
2.1肝脏样品RNA的提取和cDNA的合成
2.4 RPL15基因序列分析
2.6 RPL15基因干扰载体构建
2.7 HEPG2细胞复苏与培养
2.8 HEPG2细胞转染
2.9 qRT-PCR检测RPL15互作基因的表达
2.10 qRT-PCR检测相关癌基因和抑癌基因的表达
2.11数据处理和分析
3结果
3.2广西巴马小型猪RPL15基因序列分析
3.3 RPL15基因真核表达载体酶切验证
3.4 HEPG2肝脏细胞RPL15基因过表达结果
3.5 HEPG2肝脏细胞RPL15基因表达干扰结果
3.6 RPL15互作基因的表达验证
3.7 HEPG2肝脏细胞中癌基因和抑癌基因的表达
4 讨论
5本章小结
第六章候选基因RPL15在小鼠T2DM模型中的表达分析
1材料
1.1试验动物
1.2动物日粮
1.3试验耗材和试剂
1.4试验仪器
2试验方法
2.1试验动物的饲养
2.2空腹血糖检测
2.3腹腔注射葡萄糖耐试验(IGTT)
2.5 Western Blot验证小鼠肝脏RPL15基因的表达
2.6数据分析
3结果
3.1体重测定
3.2空腹血糖(FBG)测定结果
3.3腹腔注射葡萄糖耐试验(IGTT)结果
3.4小鼠RPL15基因组织表达分析
3.5 Western Blot验证RPL15蛋白在肝脏的表达
4讨论
5本章小结
1总结
2本研究的创新点
参考文献
附录
致谢
攻读学位期间发表论文情况