成人乙肝疫苗免疫无（弱）应答机制及再免疫方案初探——成人乙肝疫苗接种情况调查，无（弱）应答者体外PBMCs中CD150的表达及再免疫效果研究

摘要

本研究调查医学院校成人学生、医务人员乙肝疫苗免疫接种现状，对乙肝疫苗接种后无(弱)应答的成人采用三种不同方案进行再免疫：复种(仍使用原标准剂量)、增加疫苗剂量、联合粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)，探索行之有效的乙肝疫苗再免疫方法，同时研究乙肝疫苗无(弱)应答者相关的免疫机制，为制订相应策略提供一定的科学依据。全文分为3个部分。 第1章：成人学生、医务人员乙型肝炎病毒感染及乙肝疫苗接种情况调查 第2章：成人乙肝疫苗无(弱)应答者三种不同方案再免疫效采研究 第3章：SLAM(CDl50)在成人乙肝疫苗无(弱)应答者体外PBMCs中的表达研究 第1章 成人学生、医务人员乙型肝炎病毒感染及乙肝疫苗接种情况调查 第1节 成人学生乙型肝炎病毒感染及乙肝疫苗接种情况 方法: 无菌采集无(弱)应答者与应答者肝素钠抗凝静脉血18ml，4小时内送至实验室，采用淋巴细胞分离液密度梯度离心分离法，用PBS 1：1体积对倍稀释；缓缓将细胞悬液加到5ml的淋巴细胞分离液的液面上；离心(700 g／min)20min，用毛细吸管轻轻抽取出位于血浆与分离液界面层呈自膜状的PBMCs，用无菌PBS液反复洗PBMC，离心去上清。其中1支管中细胞悬液，直接对细胞表面抗原进行染色标记，上流式细胞仪测定细胞膜表面分子CD150,另2支管细胞悬液，接种子平底细胞培养板中。 结论: 1.男性学生较女性学生更易成为乙型肝炎病毒的易感人群，是乙肝疫苗接种的重要群体。 2.随着年龄的增加，乙肝疫苗接种效果(HBsAb阳性率)逐渐降低；需要接种乙肝疫苗者则随着年龄的增加而增多。 3.加强学生的乙肝疫苗接种工作对乙型肝炎的防治措施仍属必要。对接种年限大于3年者，可进行抗-HBs监测，及时进行加强免疫。 对接种乙肝疫苗后无(弱)应答的成人，复种(仍使用原标准剂量)、增加疫苗剂量和联合粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)三种方案再免疫均可提高部分无(弱)应答者的抗-HBs应答率，而增加疫苗剂量组和联合GM—CSF组方案免疫效果(抗-HBs阳转率和抗体免疫水平)均优于单纯复种组，但仍不能完全消除无应答状态。是否应加大剂量继续免疫，有待进一步临床研究。 1研究对象的筛选对上述(第2章)既往两年曾行乙肝疫苗接种、乙肝两对半检测均阴性的成年人接受标准程序(0，1，6月)再免疫后，于再接种后第7～12月检测抗HBs滴度(IMx，AUSAB试剂盒)。 方法: 无菌采集无(弱)应答者与应答者肝素钠抗凝静脉血18ml，4小时内送至实验室，采用淋巴细胞分离液密度梯度离心分离法，用PBS 1：1体积对倍稀释；缓缓将细胞悬液加到5ml的淋巴细胞分离液的液面上；离心(700g／min)20min，用毛细吸管轻轻抽取出位于血浆与分离液界面层呈自膜状的PBMCs，用无菌PBS液反复洗PBMC，离心去上清。其中1支管中细胞悬液，直接对细胞表面抗原进行染色标记，上流式细胞仪测定细胞膜表面分子CD150,另2支管细胞悬液，接种子平底细胞培养板中。 结论: CD150可能直接诱导CD4+淋巴细胞的增殖，在机体接种乙肝疫苗后，抗体的无(弱)应答中发挥一定作用。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

第一章 医学院校成人乙型肝炎病毒感染及乙肝疫苗接种情况调查

第一节成人学生乙型肝炎病毒感染及乙肝疫苗接种情况

1.1.1研究对象和方法

1.1.2结果

1.1.3讨论

第二节成人医务人员乙型肝炎病毒感染及疫苗接种情况调查

1.2.1对象与方法

1.2.2结果

1.2.3讨论

第二章 成人乙肝疫苗无(弱)应答者三种不同方案再免疫效果研究

2.1研究对象与方法

2.2结果

2.3讨论

第三章 SLAM(CD150)在成人乙肝疫苗无(弱)应答者体外PBMCs中的表达研究

3.1研究对象和方法

3.2结果

3.3讨论

结束语

课题的特色和创新之处

进一步研究计划

附录

致谢