亚麻籽中开环异落叶松脂酚二糖苷（SDG）多聚体及其水解产物的色谱分离和检测方法研究

摘要

本文运用快速柱层析技术(FCC)、薄层色谱技术(TLC)、高效液相色谱技术(HPLC)、快原子轰击一质谱(FAB-MS)和核磁共振技术(NMR2)，针对亚麻籽SDG多聚体及其水解产物的分离、纯化和检测开展系统的研究，获得的主要研究成果如下： (1)采用快速柱层析分离和制备薄层色谱相结合的方法，从亚麻籽中分离出SDG，并以SDG为原料，成功制备出其3种酸水解产物；色谱、快原子轰击-质谱和核磁共振谱分析结果表明，这3种酸水解产物分别为开环异落叶松脂酚单糖苷(SMG)、无水开环异落叶松脂酚(ASECO)和开环异落叶松脂酚(SECO)。此外，还从亚麻籽中分离出SDG多聚体及对香豆酸糖苷(CouAG)在碱水解过程中的甲酯衍生物。 (2)建立了一种新的梯度反相高效液相色谱方法，该方法适用于同时分离和定量：(a)用70％甲醇水溶液提取脱脂亚麻籽粉获得的提取液中的SDG多聚体；(b)碱的水溶液中SDG多聚体及其水解产物(包括SDG、CouAG、FeAG、CouAG甲酯和FeAG甲酯)；(c)酸的水溶液中SDG的酸水解产物(包括SMG、SECO、ASECO、CouA、FeA、CouA甲酯、FeA甲酯和5-羟甲基糠醛(HMF)及其降解产物)。 (3)运用新建立的色谱方法，全程追踪了亚麻籽SDG多聚体的解离及其水解过程；SDG多聚体的水解反应动力学研究表明，温度和碱浓度等提取条件明显影响亚麻籽中SDG的提取效率，即在30℃、40℃、50℃和60℃温度下，SDG多聚体的水解反应在表观上遵循一级反应动力学模型，且随着NaOH浓度的增加，水解反应速率常数呈线性增加；至60℃时，NaOH浓度对SDG多聚体的水解速率影响最大。在3.5 mmol／L NaOH浓度范围内，SDG多聚体的水解反应速率常数与温度的关系符合阿累尼乌斯经验公式。随着NaOH浓度的增加，水解反应的活化能逐渐降低；在3.0mmol／L、3.5 mmol／L、4.0 mmol／L、4.5 mmol／L和5.0 mmol／L NaOH浓度下，其碱水解反应的表观活化能分别为67.53 kJ／mol、59.17 kJ／mol、51.12 kJ／mol、42.25 kJ／mol和36.68 kJ／mol。 (4)比较了亚麻籽中SDG多聚体在甲醇、乙醇和水溶液中进行碱水解时反应产物的差异性，确证了在水解过程中产生的CouAG甲酯、FeAG甲酯、CouA甲酯和FeA甲酯是由CottAG、FeAG、CouA和FeA与反应体系中的甲醇发生酯交换所致。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章引言

1.1研究目的和意义

1.2亚麻籽的利用现状

1.2.1西方亚麻籽的利用

1.2.2中国亚麻籽的利用

1.3亚麻籽主要成分研究概述

1.3.1脂肪酸

1.3.2蛋白质

1.3.3亚麻籽纤维

1.3.4木脂素

1.3.5酚酸

1.3.6生氰糖苷

1.3.7植酸

1.3.8维生素和矿物质

1.4木脂素研究进展

1.4.1木脂素的分类及其在天然物中的分布

1.4.2木脂素在人体及动物体内的代谢

1.4.3木脂素的药理活性

1.4.4亚麻籽木脂素的提取及测定方法

1.5主要研究内容

第二章亚麻籽中木脂素及其水解产物的分离及鉴定

2.1引言

2.2材料与方法

2.2.1实验仪器

2.2.2样品和试剂

2.2.3亚麻籽中SDG的快速吸附柱层析分离

2.2.4 SDG的酸水解和酶水解

2.2.5 SDG酸水解产物的分离和纯化

2.2.6亚麻籽中SDG多聚体及其酚类化合物的分离

2.2.7化合物的结构鉴定

2.3结果

2.3.1亚麻籽粉中木脂素的提取

2.3.2亚麻籽粉中SDG的快速柱层析分离

2.3.3 SDG酸水解和酶水解产物组成的比较

2.3.4 SDG酸水解产物的分离

2.3.5 CouAG甲酯、FeA甲酯和CouA甲酯的分离

2.3.6化合物结构的确定

2.4讨论

2.4.1 SDG及其酸水解产物的提取和分离

2.4.2酚类化合物的提取和分离

2.4.3化合物结构的确定

2.5小结

第三章亚麻籽SDG多聚体的水解与定量研究

3.1引言

3.2材料与方法

3.2.1实验仪器

3.2.2样品和试剂

3.2.3亚麻籽SDG多聚体提取液的制备

3.2.4亚麻籽SDG多聚体的解离

3.2.5亚麻籽碱水解产物的酸水解

3.2.6 HPLC-UV方法的建立

3.2.7 SDG多聚体及其水解产物的定量测定

3.3结果

3.3.1方法的确证

3.3.2 SDG多聚体及其碱水解产物的HPLC分离

3.3.3 SDG多聚体的解离

3.3.4亚麻籽酸水解产物的HPLC分离

3.3.5 SDG的酸水解

3.3.6水解过程中酚类化合物的甲酯化

3.3.7 CouAG甲酯和FeAG甲酯的酸水解

3.3.8酸水解产物中5-HMF的鉴别

3.3.9 SDG多聚体及其水解产物的含量测定

3.4讨论

3.4.1分析方法的建立

3.4.2 SDG多聚体及其碱水解产物的HPLC分离

3.4.3亚麻籽酸水解产物的HPLC分离

3.4.4水解过程中酚类化合物的甲酯化

3.4.5酸水解过程中5-HMF的鉴别

3.4.6 SDG多聚体及其水解产物的定量分析

3.5 小结

第四章结语

4.1结论

4.2创新点

4.3展望

参考文献

附录

致谢