壳聚糖/海藻酸盐/白芨多糖复合止血材料的制备及其性能研究

摘要

日常生活中因失血过多造成伤亡的事故屡见不鲜，快速有效的止血是降低伤亡率的关键，不仅能减少伤患的痛苦，还可以及时挽救其生命，因此快速止血材料的研究成为了热点和重点。壳聚糖（Chitosan,CS）、海藻酸盐（Alginate,Alg）、白芨多糖（Bletilla striata polysaccharide,Bsp）作为天然的高分子多糖因具有良好的生物相容性、可降解性、可吸收性、止血性、促愈合等特性，一直是最热门的研究材料，但这三种材料单独作为止血材料来使用止血性却为有限。 为提高止血效果，本研究首先采用乳化交联法和致孔技术制备出具有分子筛作用的海藻酸钙多孔微球（Alg-Ca）。利用水提醇沉技术从白芨块茎中提取了水溶性的白芨多糖，并将其与海藻酸钙多孔微球复合制备出复合止血粉。最后通过机械共混技术和冷冻干燥技术制备出了CS/Alg-Ca和CS/Alg-Ca/Bsp复合海绵。通过SEM、粒度分析、FT-IR、1H-NMR、吸水性、生物显微结构分析、Zeta电位、吸水性、孔隙率、水蒸气透过率等的测试对其进行理化性能表征，又通过细胞毒性、溶血率、急性毒性、红细胞吸附，凝血酶原时间（PT）测定，体外促凝和动物出血模型等测试技术对材料的生物学性能和止血性能进行了评价。得出如下结果： （1）海藻酸钙多孔微球具有较大的比表面积和开放的多孔结构，根据吸水率的结果确定较优制备配方：海藻酸钠2%wt，CaCl25%wt，致孔剂0.5wt%。 （2）所制得的复合止血粉当Alg-Ca∶Bsp=1∶1时的体外促凝效果的BCI值最小，止血时间最短仅为74.7s，该比例的止血效果最好。 （3）通过对CS/Alg-Ca和CS/Alg-Ca/Bsp复合海绵的理化性能、生物学性能以及止血性能的分析，结果表明，CS/Alg-Ca10复合海绵在短时间内具有较强的吸水,较大的孔隙率、较高的水蒸气透过率。另外，在此基础上制备的CS/Alg-Ca/Bsp三元复合海绵具有良好的生物相容性，其中体外凝血和动物止血实验证明CS/Alg-Ca/Bsp10复合海绵的止血时间最短为56.28s，出血量最少为0.024g，作为快速止血材料有望在医用敷料领域得到推广使用。

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摘要

ABSTRACT

第一章绪论

1.1止血机制

1.2止血材料的国内外研究现状

1.2.1无机止血材料

1.2.2有机止血材料

1.3白芨多糖

1.3.1创伤促愈合

1.3.2止血性

1.3.3抗菌性

1.4研究目的、内容和创新性

1.4.2研究内容

1.4.3创新性

第二章 海藻酸钙多孔微球的制备及其表征

2.1引言

2.2实验材料与方法

2.2.1材料与仪器

2.2.2海藻酸钙多孔微球的制备

2.2.3海藻酸钙多孔微球的表观形貌与粒度分布

2.2.4不同条件对微球吸水性的影响

2.3 结果分析

2.3.1微球的表观形貌

2.3.2粒度分布

2.3.3不同条件对微球吸水性的影响结果

2.4本章小结

第三章 海藻酸钙多孔微球-白芨多糖复合止血粉的制备及其性能研究

3.1引言

3.2实验材料与方法

3.2.1主要试剂与仪器

3.2.2白芨多糖的提取

3.2.3海藻酸钙多孔微球的制备

3.2.4复合止血粉的制备

3.2.5FT-IR测试

3.2.6核磁共振测试

3.2.7止血粉体外凝血效果观察

3.2.8体外凝血指数测试

3.2.9SD大鼠出血模型对复合止血粉止血性能评价

3.3结果分析

3.3.1白芨多糖的结构表征与分析

3.3.2止血粉体外凝血效果观察

3.3.3体外凝血指数分析

3.3.4动物出血模型的止血效果

3.4本章小结

第四章壳聚糖/海藻酸钙多孔微球/白芨多糖复合止血海绵的制备及性能研究

4.1引言

4.2实验材料与方法

4.2.1材料与仪器

4.2.2溶液的制备

4.2.3复合海绵的制备

4.2.4SEM测试

4.2.5混合溶液的稳定性测定

4.2.6复合海绵的吸水率测定

4.2.7复合海绵的孔隙率测定

4.2.8复合海绵的水蒸气透过性测定

4.2.9复合海绵的体外凝血测试

4.2.10复合海绵对红细胞的作用

4.2.11复合海绵对PT（凝血酶原时间）的影响

4.2.12溶血率测定

4.2.13细胞毒性测定

4.2.14急性全身毒性试验

4.2.15动物出血模型止血性评价

4.3结果讨论与分析

4.3.1复合海绵的表观形貌

4.3.2混合溶液的稳定性分析

4.3.3Alg-Ca微球含量对CS/Alg-Ca复合海绵吸水率的影响

4.3.4Alg-Ca微球含量对CS/Alg-Ca复合海绵孔隙率的影响

4.3.5Alg-Ca微球含量对CS/Alg-Ca复合海绵透气率的影响

4.3.6体外凝血分析

4.3.7复合海绵对红细胞的作用

4.3.8复合海绵对PT的影响

4.3.9溶血率

4.3.10细胞毒性

4.3.11急性全身毒性试验

4.3.12动物出血模型止血效果

4.4本章小结

第五章结论与展望

5.1结论

5.2展望

参考文献

硕士期间发表论文与学术成果

致谢