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无花果沙雷氏菌壳聚糖酶的生化性质及产酶条件的研究

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第一章绪论

1.1引言

1.2低聚壳聚糖的性质、功能及用途

1.2.1低聚壳聚糖在食品上的应用

1.2.2低聚壳聚糖在医药上的应用

1.2.3低聚壳聚糖在化妆品上的应用

1.2.4低聚壳聚糖在农业上的应用

1.3低聚壳聚糖的制备方法

1.3.2物理场降解法

1.3.3合成法

1.3.4酶降解法

1.4壳聚糖酶的研究概况

1.4.1壳聚糖酶的发现及来源

1.4.2壳聚糖酶的分离纯化及基本生化性质的研究

1.4.3壳聚糖酶的生物合成

1.4.4壳聚糖酶的分类及分子生物学研究

1.4.5壳聚糖酶的生理功能

1.4.6壳聚糖酶的应用

1.4.7壳聚糖酶的国内研究情况

1.5固定化细胞的研究现状

1.5.1固定化细胞技术简介

1.5.2固定化细胞在食品及酶工程领域的应用

参考文献

第二章壳聚糖酶产生菌的筛选及鉴定

2.1引言

2.2材料与方法

2.2.1材料

2.2.2仪器

2.2.3实验方法

2.3结果与讨论

2.3.1筛选模型的建立

2.3.2筛选

2.3.3菌种的鉴定

2.3.4讨论

2.4本章小结

参考文献

第三章无花果沙雷氏菌(Serratiaficaria)CH-0203产壳聚糖酶发酵条件的研究

3.1引言

3.2材料与方法

3.2.1试剂

3.2.2底物的制备

3.2.3仪器

3.2.4方法

3.3结果与讨论

3.3.1不同碳源对发酵产酶的影响

3.3.2不同氮源对发酵产酶的影响

3.3.3不同碳氮比对发酵产酶的影响

3.3.4不同壳聚糖浓度对发酵产酶的影响

3.3.5不同发酵温度对发酵产酶的影响

3.6培养基不同的pH值对发酵产酶的影响

3.3.7添加表面活性剂对发酵产酶的影响

3.3.8装液量对发酵产酶的影响

3.3.9接种龄对发酵产酶的影响

3.3.10不同接种量对发酵产酶的影响

3.3.11不同脱乙酰度的壳聚糖对发酵产酶的影响

3.3.12无机盐浓度对发酵产酶的影响

3.4本章小结

参考文献

第四章壳聚糖酶的分离纯化及生化性质研究

4.1引言

4.2材料与方法

4.2.2菌种

4.2.3发酵产酶培养基

4.2.4底物的制备

4.2.5仪器

4.2.6方法

4.3结果与讨论

4.3.1壳聚糖酶的分离纯化及分子量的测定

4.3.2壳聚糖酶的等电点的测定

4.3.3壳聚糖溶液在壳聚糖酶的作用下的粘度变化

4.3.4壳聚糖酶的最适pH

4.3.5壳聚糖酶的最适温度

4.3.6金属离子及螯合剂对壳聚糖酶的作用

4.3.7壳聚糖酶的底物特异性及最适底物

4.3.8壳聚糖酶稳定的温度范围

4.3.9壳聚糖酶稳定的pH范围

4.3.10壳聚糖酶的米氏常数(Km)测定

4.3.11壳聚糖酶水解壳聚糖的产物分析

4.4本章小结

参考文献

5.1引言

5.2材料与方法

5.2.1材料

5.2.2仪器

5.2.3方法

5.3结果与讨论

5.3.1包埋法固定化细胞发酵产酶实验

5.3.2吸附法固定化细胞发酵产酶实验

5.3.3固定化细胞发酵产壳聚糖酶的条件研究

5.4本章小结

参考文献

结论

一结论

二展望

三本论文创新之处

攻读博士学位期间发表的论文

致谢

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摘要

通过实验建立了筛选壳聚糖酶产生菌的模型,在培养基中以壳聚糖为唯一碳源,培养基的pH6.0,通过观察培养基上透明圈的方法对菌株进行选择.采用这种方法对各地27个土壤样品进行筛选,获得一株细菌,该菌可分泌活力较高的壳聚糖酶.经鉴定为无花果沙雷氏菌(Serratia ficaria),命名为CH-0203,该菌可以产生壳聚糖酶为该研究首发现.该菌株所产壳聚糖酶为胞外酶,以壳聚糖和葡萄糖胺为碳源都能有效诱导产生壳聚糖酶,而壳聚糖的诱导效果要好于葡萄糖胺,其他碳源效果不好.

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