杜衡化学成份的初步分析及其有效成份的活性研究

摘要

中医中药是中华民族的瑰宝。中药有效成分的提取、分离、纯化技术以及制剂技术的改进是中药现代化的重要组成部分。杜衡是我国宝贵中药资源的一种，具有清热解毒，凉散风热的功用，在我国存在着丰富的可供药用资源。通过本课题对杜衡的化学成分的鉴定、有效成分进行分离纯化及其活性分析，本课题的研究将促进杜衡的开发。本文应用现代化实验与分析技术，对杜衡成分的醇提取、分离、纯化过程及其结构鉴定以及挥发油的系统研究。主要研究内容与结果如下： 一、杜衡醇浸提法 对化学成份的分离，纯化浸提后的成份通过不同极性试剂的萃取，从而使它们的成份根据极性的不同在不同极性试剂中达到富集，选取萃取的不同极性试剂为：石油醚，三氯甲烷，乙酸乙酯，以及正丁醇。然后通过柱层析，经过不同极性的溶液梯度洗脱、重结晶，得到高纯度单体，通过四大谱图分析得出单体结构。 二、杜衡挥发油的提取和成份分析 首次对杜衡的挥发油成份进行超临界CO<,2>萃取，通过均匀设计和正交设计联用对萃取工艺做了研究，得出最佳的萃取条件为：萃取压力为25MPa，萃取温度为50℃，解析温度为60℃，萃取时间2.5h。得到亮黄色油状液体，萃取得率为4.76％。 水蒸汽提取法也对杜衡挥发油进行了提取，得到较为混浊的黄色油状液体，得率为1.06％。 通过GCMS分析挥发油成份对超临界CO<,2>萃取和水蒸汽提取的成份进行对比，得出不同的萃取方法对成份组成相差很大。超临界CO<,2>萃取得出的主要成份含量最高的是1，2邻苯二酸二异辛酸二酯，质量份数高达20.47％，其次是丁香酚甲醚，高达15.37％。而水蒸汽提取的成份相对要复杂些，萃取的成份极性范围要广得多，其中含量最丰富的是1a,2,3,4,4a,5,6,7b-八氢-1，1，4，7-四甲基-1H-环茂并芳庚，占22.5％，其次是愈创醇，含量为14.9％。 三、杜衡挥发油β-环糊精包结物的研究 杜衡挥发油β-环糊精包结工艺的筛选：经过正交实验，综合评分法分析可知各因素对实验结果影响的大小顺序为：A>C>B，最佳的制备条件即优选工艺A282C2，一环糊精：按油为8：1，包结时间为1h，包结温度为40℃。取杜衡挥发油3批，按最佳工艺包结进行验证性实验，挥发油平均收得率为86.496％，利用率为77.696％。对杜衡原油进行分子蒸馏，获得a、b、c、d四个组份，分别与β-环糊精进行包结试验，得出(a)组份的收得率达到92.451％，利用率达到97.251％，(b)组份和(c)组份的分子量相对比较大些，与β-环糊精的收得率(87.292％，86.263％)和利用率(92.371％，91.985％)相对也比较低，而(d)组份的包结效果就更差了(收得率60.195％，利用率为70.266％)。b组分和c组分通过小白鼠扭体试验得出两个组分具有很好的镇痛效果。

目录

文摘

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第一章绪论

1.1杜衡概论

1.1.1杜衡简介

1.1.2杜衡有效成份

1.1.3杜衡的形态特征

1.1.4杜衡的鉴别

1.2天然产物有效成分的提取技术

1.2.1溶剂提取法

1.2.2水蒸气蒸馏法

1.2.3半仿生提取法(SBE)

1.2.4超临界CO2流体萃取法

1.3天然产物化学成份的分离和纯化技术

1.3.1高速逆流色谱分离技术

1.3.2超滤膜分离技术

1.3.3吸附树脂分离技术

1.3.4分子蒸馏

1.4挥发油的β-环糊精包结

1.4.1 β-环糊精简介

1.4.2包结物的制备方法

1.4.3包结物在中药学中的应用意义

15本论文的立题背景及主要的研究内容

1.5.1立题背景

1.5.2主要研究内容

第二章杜衡浸提物的分离纯化及结构鉴定

2.1仪器与试剂

2.1.1仪器

2.1.2试验试剂

2.2试验方法

2.2.1硅胶柱的制备

2.2.2洗脱液配比的确定

2.2.3薄层层析板的制作

2.2.4点样

2.2.5展开剂对分离效果的影响

2.2.6展距对分离效果的影响

2.2.7显色分析

2.2.8提取分离流程图

2.2.3实验结果与讨论

2.3结构鉴定方法

2.3.1紫外光谱仪(UV)

2.3.2红外光谱仪(IR)

2.3.3液相色谱—质谱联用仪(LC-MS)

2.3.4核磁共振仪(NMR)

2.4实验结果与讨论

2.4.1理化性质测试

2.4.2图谱分析

2.4.3对样品分子结构式的进一步论证

2.5对化合物1的研究

2.6本章小结

第三章中草药杜衡挥发油的提取及其成份分析

3.1设备与材料

3.2超临界CO2萃取挥发油工艺条件方案的确定

3.3试验方法

3.3.1 SFE试验流程简介

3.3.2 SFE因素范围的确定

3.3.3结果与讨论

3.4超临界CO2萃取的杜衡挥发油的气相色谱-质谱分析条件

3.4.1气相色谱条件

3.4.2质谱条件

3.5结果与分析

3.5.1试验结果

3.5.2试验分析

3.6杜衡挥发油的水蒸汽提取法

3.6.1水蒸气提取法过程介绍

3.6.2水蒸气蒸馏结果

3.7水蒸汽提取的杜衡挥发油的气相色谱-质谱分析条件

3.7.1气相色谱条件

3.7.2质谱条件

3.8结果与分析

3.8.1试验结果

3.8.2试验分析

3.9本章小结

第四章杜衡挥发油环糊精包结及其有效成份的研究

4.1材料与仪器

4.2实验方法与结果

4.2.1包结方法

4.2.2考察因素及水平值的选择

4.2.3包结物按油精包结率、包结物收得率的测定与计算

4.2.4实验结果

4.2.5杜衡挥发油的β-环糊精包结分析

4.3对SFE萃取挥发油进行分子蒸馏

4.3.1分子蒸馏的原理

4.3.2分子蒸馏流程

4.3.3分子蒸馏操作步骤

4.3.4分子蒸馏结果分析

4.4挥发油的活性研究

4.4.1挥发油的组份分析

4.4.2小白鼠扭体反应的测定

4.5本章小结

结论与展望

结论

创新点

展望

参考文献

攻读硕士学位期间发表的论文

致谢

评定意见