三活消痹膏治疗类风湿性关节炎的药效学研究

摘要

类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一种慢性炎症性疾病，是以对称性多关节炎病变为主要临床表现的全身性自身免疫性疾病。其特点是关节滑膜的慢性炎症、软骨吸收、骨质破坏和骨质纤维化。类风湿性关节炎在各年龄中均可发病，成人中多发于中年女性。本病为慢性、进行性、侵袭性疾病，如不给予适当的治疗，病情会逐步发展加重，造成对骨关节的破坏，最后导致关节强直、畸形、功能丧失。同时也可累及心、肺、肾、动脉、神经及眼等脏器。
　　三活消痹膏是广州中医药大学附属医院杨顺益教授外治类风湿性关节炎的经验方，其药物组成有：生川乌、生草乌，生马钱子，生狼毒，独活，三七，虎杖，辣椒、徐长卿等。三活消痹膏中君药生川乌、生草乌味辛、苦，性热，能祛风除湿，温经散寒，消肿止痛，辅以生马钱子通络强筋，生狼毒散结止痛以增强疏经止痛散结功能，三七散瘀活血，独活祛风胜湿，佐以虎杖能活血定痛，清热利湿，徐长卿消肿止痛，活血解毒，丁香辛散温通，薄荷辛凉止痛消炎，全方使瘀血散，肿痛消，湿痹除，寒邪去，毒邪解，经络通，共奏活血祛瘀，祛湿除痹，温经止痛之功效，适合于各种急慢性软组织损伤、劳损、风寒湿痹的治疗。
　　本论文拟用动物疼痛和炎症模型来研究三活消痹膏对急、慢性炎症的抗炎镇痛效果，对三活消痹膏镇痛抗炎和活血祛瘀的药效进行综合评价，为其在临床上治疗类风湿性关节炎提供药效学依据。
　　方法：
　　1、抗炎作用试验
　　完全弗氏佐剂(CFA)诱导雄性 SD大鼠佐剂性关节炎(AA)，观察致炎前后大鼠足趾肿胀度、体重、血清中IL-lβ、TNF-α、MDA含量和SOD活力；观察对角叉菜胶所致的大鼠足肿胀的影响、对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响、对腹腔注射醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响、对大鼠棉球肉芽肿的影响。
　　2、镇痛作用试验
　　采用热板法和扭体法，通过小鼠的痛阈值作为镇痛效应的评价指标，来观察三活消痹膏的镇痛效应。
　　3、祛瘀消肿作用试验
　　通过大鼠创伤性瘀斑实验和小鼠血瘀模型实验来观察三活消痹膏的祛瘀消肿作用。
　　结果：
　　1、抗炎作用试验
　　（1）对大鼠佐剂性关节炎的影响
　　与模型对照组比较，三活消痹膏高、中、低三个剂量组在给药后大鼠右足趾肿胀度均显著降低（P<0.05或 P<0.01）；高、中、低三个剂量组均显著降低大鼠血清中IL-1β、TNF-α含量（P<0.05或P<0.01），显著提高大鼠血清SOD活力和降低MDA的含量（P<0.05或P<0.01）。
　　(2)对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响
　　与空白对照组比较，三活消痹膏高、中、低级剂量组均能显著减轻二甲苯致小鼠耳肿胀的程度（P＜0.05）。
　　(3)三活消痹膏对小鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响
　　与空白对照组比较，三活消痹膏高、中、低剂量组显著抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高（P<0.01或P<0.05）。
　　(4)三活消痹膏对大鼠棉球肉芽肿的影响
　　与空白对照组比较，三活消痹膏高、中、低剂量组棉球肉芽重量均显著低于空白对照组（p<0.01），提示三活消痹膏对慢性炎症棉球肉芽的增生有抑制作用。
　　2、镇痛作用试验
　　（1）对小鼠热板法镇痛的影响
　　与空白对照组比较，三活消痹膏高、中、低剂量组在给药后0.5,1,1.5h均显著提高痛阈值，延长痛反应时间（P<0.05或P<0.01）。
　　（2）对小鼠扭体法镇痛的影响
　　与空白对照组比较，三活消痹膏高、中、低剂量组均显著延长小鼠扭体反应潜伏期（P<0.05），高、中、低剂量组均显著减少20min内扭体次数（P<0.01或P<0.05）。
　　3、祛瘀消肿作用试验
　　（1）三活消痹膏对大鼠创伤性瘀斑实验的影响
　　与空白对照组比较，三活消痹膏高中、低剂量组均显著缩短大鼠创伤性瘀斑消散天数（P<0.01或P<0.05）。
　　（2）三活消痹膏对小鼠血瘀实验的影响
　　与空白对照组比较，三活消痹膏各剂量组均能缩短血斑消失时间，高、中、低剂量组均显著减少血斑面积（P<0.01或P<0.05），提示三活消痹膏具有祛瘀消肿作用。
　　结论：三活消痹膏有改善佐剂性关节炎模型的作用，能改善血瘀大鼠的血瘀状态，有较好的镇痛、抗炎，祛瘀消肿作用。为进一步研究三活消痹膏治疗类风湿性关节炎提供了一定的理论基础。

目录

声明

引言

第一部分 文献研究

1 西医对类风湿性关节炎的研究进展

1.1 病因病机的研究

1.2 作用机理的研究

1.3 病理改变

1.4 西医治疗类风湿性关节炎的疗法研究

2 中医对类风湿性关节炎的研究进展

2.1 病因病机的研究

2.2 类风湿性关节炎的中医治疗

3 中药外治技术概述

3.1 中药外治技术概述

3.2 中药外治方法简介

3.3 中药外治技术与现代技术

4 中药治疗类风湿性关节炎的实验研究进展

4.1 炎症动物模型研究

4.2 中药对细胞因子的影响

4.3 中药对淋巴细胞的影响

4.4 中药对血瘀学，血瘀流变学的影响

4.5 对PGE2的影响

4.6 抗自由基损伤

第二部分 实验研究

第一章 三活消痹膏的抗炎作用实验研究

第一节 三活消痹膏对大鼠佐剂性关节炎的影响[55.56]

第二节 三活消痹膏对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响[57]

第三节 三活消痹膏对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响[58]

第四节 三活消痹膏对小鼠腹腔毛细管通透性增加的影响[58]

第五节 三活消痹膏对大鼠棉球肉芽肿的影响[59]

第六节 小结

第二章 三活消痹膏的镇痛作用实验研究

第一节 三活消痹膏对小鼠热板法镇痛的影响[55,56]

第二节 三活消痹膏对小鼠扭体法镇痛的影响[55,56]

第三节 小结

第三章 三活消痹膏祛瘀消肿作用的实验研究

第一节 三活消痹膏对大鼠创伤性瘀斑实验的影响[60]

第二节 三活消痹膏对小鼠血瘀实验的影响[61]

第二节 小结

讨论

1 动物模型评价

2 实验指标的选择原则

2.1 足跖肿胀度

2.2 血清SOD,MDA含量测定

2.3 血清中IL-1β和TNF-α的测定

3 三活消痹膏对类风湿性关节炎药效学作用

3.1 三活消痹膏对AA大鼠炎症的影响

3.2 三活消痹膏对AA大鼠炎性细胞因子的影响

3.3 三活消痹膏对小鼠镇痛效应的影响

3.4 三活消痹膏对祛瘀消肿作用的影响

结语

结论

展望

参考文献

附录发表论文情况

致谢