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泡菜中植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶的分离纯化及nirS基因的表达

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目录

第一章 绪论

1.1 亚硝酸盐的来源及危害

1.2 食品中亚硝酸盐降解方法

1.2.1 物理法降解亚硝酸盐

1.2.2 化学法降解亚硝酸盐

1.2.3 生物法降解亚硝酸盐

1.3 NiRs的研究现状

1.3.1 NiRs的分类及其结构

1.3.2 NiRs的性质

1.5.1 立题意义

1.5.2 研究内容

第二章 高效降解亚硝酸盐及生物胺乳酸菌的筛选

2.1.1材料

2.1.2 主要试剂

2.1.3溶液配制

2.1.4 主要仪器和设备

2.2.1 样品处理

2.2.2 乳酸菌疑似菌株的分离

2.2.3 疑似菌株的生化鉴定

2.2.4 疑似菌株的 16SrDNA序列分析

2.2.5 乳酸菌降解亚硝酸盐能力的检测

2.2.6 乳酸菌降解生物胺能力的检测

2.2.7 乳酸菌产生生物胺的鉴定

2.3.1 乳酸菌的鉴定

2.3.2 乳酸菌降解亚硝酸盐的能力的检测

2.3.3乳酸菌降解生物胺能力的检测

2.3.4乳酸菌产生生物胺能力的检测

2.4 本章小结

第三章 NiRs的分离纯化及其酶学性质分析

3.1.1 主要试剂

3.1.2溶液配制

3.1.3 主要仪器与设备

3.2.1 NiRs的分离纯化

3.2.2 NiRs的酶学性质分析

3.3 实验结果分析

3.3.1 亚硝酸盐标准曲线

3.3.1 NiRs的分离纯化

3.3.2 NiRs的 SDS-PAGE电泳

3.3.3 NiRs降解亚硝酸盐的最适温度

3.3.4 NiRs降解亚硝酸盐的最适 pH值

3.3.5 不同金属离子对 NiRs 酶活的影响

3.4 本章小结

第四章 亚硝酸盐还原酶基因的克隆与表达

4.1.1 主要试剂

4.1.2 溶液配制

4.1.3 主要仪器与设备

4.2 实验方法

4.2.1 亚硝酸盐还原酶基因( nirS)的克隆

4.2.2 nirS的原核表达

4.2.3重组蛋白的复性及酶活力的检测

4.3.1 nirS基因的扩增

4.3.2 T克隆载体的鉴定

4.3.3 重组质粒 pET-32a(+)-nirS的鉴定

4.3.4 重组酶的表达及 SDS-PAGE电泳检测

4.3.5 重组酶酶活的检测

4.5 本章小结

第五章 结论与展望

一、结论

二、展望

参考文献

攻读硕士期间发表论文

声明

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