非酒精性脂肪肝大鼠瘦素、肿瘤坏因子α、脂联素的变化及意义

摘要

目的：通过高脂饮食制备大鼠非酒精性脂肪肝模型，动态观察瘦素，脂联素在非酒精性脂肪肝大鼠血清及肝组织匀浆的变化，初步探讨脂肪因子瘦素、肿瘤坏死因子-α、脂联素在非酒精性脂肪肝的发病及发展过程中的作用。 方法：雄性SD大鼠40只，清洁级，体重150-190克，将动物按随机表随机分为二组：对照组10只，模型组30只。对照组大鼠给与普通饲料喂养，模型组大鼠给与高脂喂养(88％普通饲料，10％猪油，2％胆固醇)。实验动物自由进食和饮水，分笼喂养，每笼5只，室温18-22℃，相对湿度55-70％，自由采光，保持实验室空气流通。实验后分别于8周末，12周末处死5只对照组大鼠和10只模型组大鼠，剩余10只于16周末处死。实验动物处死前隔夜禁食，用氯胺酮腹腔注射麻醉，颈总动脉采血，迅速取出肝脏称重，并从肝右叶切取小块肝脏组织用10％r扣性福尔马林固定制备石蜡切片，取相同部位肝组织放置-70℃冰箱集中制备肝组织匀浆。检测所有动物体重，肝重，血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)。肝脏组织常规石蜡包埋，切片，HE染色观察肝脏组织病理学变化，酶联免疫法检测血清中和肝组织匀浆中瘦素、脂联素、肿瘤坏死因子-α的变化。统计学方法：用SPSS13.0统计软件，数据用均数士标准差表示。组间比较采用t检验、非参数检验，两因素之间的相关分析用直线回归求相关系数。p<0.05有意义。 结果：模型组8周时呈现单纯性脂肪肝伴有轻微汇管区炎细胞浸润，12周，16周时伴有肝细胞气球样变，小叶内混合性炎症细胞浸润以及散在点状坏死。与对照组相比，模型组8周，12周时大鼠体重，肝指数显著性升高，血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)显著性升高。血清天门氨酸氨基转移酶(AST)有升高趋势，但无统计学差异，总胆固醇(TC)在12周时显著升高。甘油三酯(TG)与对照组无差异。血清中瘦素对照组为213.5±318.8pg/ml，模型组8周2697.7±1080pg/ml、12周1963.1±1558.9 pg/ml。与对照组相比，模型8周，12周时显著性升高，p<0.05。在肝脏组织匀浆中，瘦素水平对照组为2075.1±609.2.pg/mg，模型8周、12周、16周分别为1803.9±914.4pg/mg、2052.5±700.3pg/mg、2644.3±1129.7pg/mg，与对照组相比无显著性差异。在肝脏组织匀浆中，TNF-α的水平对照组714.7±86.1pg/mg，模型8周、12周、16周分别为746.4±253.5 pg/mg、861.1±71.8 pg/mg、1113.3±383.3 pg/mg与对照组相比，模型组水平升高，12周，16周显著性升高，p<0.05。血清中脂联素水平对照组13.2±6.2 ug/ml 模型8周，12周分别为25±5 ug/ml、 15.8±6.9 ug/ml与对照组相比，8周时显著性升高p<0.05，12周无显著差异。组织匀浆中，对照组13.2±7.3 ug/mg模型8周、12周、16周分别为16.3±8.8 ug/mg 16.3±7.9ug/mg 35±13.6 ug/mg，与对照组相比16周升高有显著性差异，p<0.05。在肝组织匀浆中，脂联素水平与TNF-α的水平呈正相关，r=0.78 p<0.05，瘦素水平与TNF-α的水平呈正相关，r=0.77p<0.05。 结论：本试验成功制备大鼠非酒精性脂肪肝模型，瘦素、肿瘤坏死因子-α可能参与了非酒精性脂肪肝的发病及发展过程，脂联素在非酒精性脂肪肝早期可能通过代偿发挥保护作用。在肝组织匀浆中，脂联素水平与TNF-α的水平呈正相关；瘦素水平与TNF-α的水平呈正相关；提示肝脏内脂肪因子的调节，可能存在旁分泌，自分泌调节。

目录

论文说明：英文缩略词表

引言

材料和方法

实验结果

讨论

结论

问题与展望

参考文献

附图

综述细胞因子与非酒精性脂肪肝

附录

致谢

附发表综述Ghrelin与消化系统疾病的研究进展